Bushnell-Haas琼脂(Bushnell-Haas Agar,简称BH琼脂)是一种专为检测环境微生物降解烃类能力而设计的合成培养基。其配方精简而精细:以磷酸钾缓冲对维持pH 7.0±0.2,硫酸铵提供氮源,氯化钠、硫酸镁与微量金属盐构成基本离子环境,却不含任何有机碳源。正这份“刻意为之的贫瘠”,使BH琼脂成为筛选“吃油微生物”的黄金标准——只有当培养皿中额外滴加柴油、石蜡或多环芳烃时,能利用这些烃类作为碳与能源的细菌、酵母乃至菌才会长出可见菌落,降解能力越强,菌落周围出现透明晕圈的速度越快、直径越大。自1940年代问世以来,BH琼脂被广用于石油污染土壤、海洋表面膜及工业废水的微生物资源普查。研究人员只需将样品匀浆涂布于表面覆有薄层原油的BH平板,28℃培养3–7天,即可依据菌落形态与晕圈初步分离高效降解株;再结合GC-MS测定残余烃量,可在两周内完成从筛选到定量评价的完整流程。近年来,随着极端环境研究升温,BH配方被灵活调整:添加3% NaCl可分离耐海盐烃降解菌;降低pH至4.5、补充Cu²⁺则用于勘查酸性矿山废水中的耐重金属菌。更妙的是,收获后大量根瘤遗落土中,氮素富集,连后续玉米都长得壮,像给土地存了活期存折。囊形腐霉
胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)是土壤里会“熬胶”的硅酸盐细菌。菌落圆润、表面像果冻,能把矿物中的钾、磷、硅一股脑解离出来,被农民亲切地称作“天然第二钾肥厂”。一、解矿机制它分泌多糖和有机酸,在钾长石表面形成生物膜,质子交换+络合双管齐下,把难溶的矿物钾转化为可溶性钾,盆栽试验显示,土壤钾含量可提高25%,相当于每亩白捡3公斤K₂O。二、促生抗逆产IAA、 gibberellin,刺激玉米、土豆侧根激增30%;生成的胞外多糖保水又固粒,使沙壤土含水率提升8%,帮助作物度过春旱。三、田间成绩山东大葱示范区,亩施200g(10⁸ CFU/g)菌粉,葱白粗度增加0.3 cm,产量提高12%,化肥钾用量降20%;宁夏葡萄沟灌后,糖酸比更协调,果粉增厚,货架期延长5天。四、工业发酵以糖蜜-玉米浆为培养基,28℃、200 r/min发酵36 h,芽孢数可达5×10⁹ CFU/mL,喷雾干燥存活率>90%,与腐熟鸡粪造粒,制成“生物硅钾肥”,存放18个月活菌仍大于2亿/克。五、未来方向科学家正把耐盐碱、耐重金属基因簇导入该菌,构建“解钾-降盐-钝化镉”三合一工程菌,让盐碱滩、矿区复垦地也能长出高产庄稼。叶近藤氏酵母同时释放挥发性 2,3-丁二醇,启动植物 ISR 信号,使叶片过氧化物酶活性提高 1.8 倍,达到“未病先防”。

德氏乳杆菌德氏亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii)是乳酸菌家族中更早被分离命名的“元老”之一,1901年即进入科学视野。菌体短杆、无芽孢、不运动,专性发酵葡萄糖产乳酸,更适生长温度42~45℃,可在pH 3.5的酸环境中存活,耐高温却畏冷,4℃即停止繁殖。基因组只1.8 Mb,代谢途径精简,却拥有完整的乳酸脱氢酶与寡肽转运系统,使其在蛋白质丰富的基质中快速产酸,抑制菌。工业上,它是酸奶、瑞士奶酪与保加利亚传统发酵乳的关键菌种,与嗜热链球菌协同可将牛乳在3小时内酸化至pH 4.2,形成细腻凝乳与特征性乙醛风味;同时分泌胞外多糖,赋予产品顺滑口感并延缓后酸化。近年研究还发现,其表面蛋白SlpA能黏附肠道上皮,诱导IL-10分泌,缓解小鼠结肠炎;热灭活菌体亦可通过启动树突细胞TLR2信号,增强肠道IgA应答,兼具益生与免疫调节潜力。随着合成生物学兴起,德氏乳杆菌德氏亚种被工程化改造为“活药工厂”,可在肠道内持续释放胰岛素样肽或白细胞介素,为糖尿病与炎症性肠病提供新型微生态治疗方案。
纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)是土壤里的“多面小钢炮”。菌体直杆、常成链排列,革兰氏阳性,周生鞭毛,可形成椭圆芽孢,耐干燥、耐酸碱,正面黄色、湿润小菌落,易挑取,是实验室常见模式菌株。一、绿色防控菌株CGMCC No.28950对南方根结线虫防效突出,盆栽试验虫口密度降70 %;同步产蛋白酶、几丁质酶,破坏虫卵壁,为蔬菜连作障碍提供化学杀线剂的替代方案。二、促生提质该菌溶磷量达277 mg kg⁻¹,解钾能力明显,可分泌IAA,使玉米、番茄根系增30 %,吸磷量提棚试验每亩滴灌200 g菌粉,番茄Vc含量提高12 %,糖酸比更协调,货架期延长5天。三、环境修复贵州大学团队利用菌株GZU-Lys01转化煤矸石中难溶磷钾为植物可吸收养分,制备微生物肥料;还能矿化固定垃圾焚烧底灰和尾矿中的Cd、Pb,吸附量分别达50 mg g⁻¹与35 mg g⁻¹,为矿区复垦提供低成本方案。四、工业酶潜力该菌产果胶酶活性高,可在25 ℃、pH 8条件下水解果胶,为果汁澄清、麻类脱胶提供低温酶源;耐碱蛋白酶已在洗涤剂中试用,10 ℃下去污力提升30 %,节能20 %。因其安全无残留,我国年产量已达3.5万吨,覆盖333万公顷农田,成为用量大的微生物杀虫剂 。

无机磷细菌培养基(不含琼脂)是专为“溶磷菌”筛选与活性测定设计的合成液体培养基。其配方精髓在于“难溶磷”:磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕以悬浮颗粒形式存在,不提供任何磷;葡萄糖或甘露醇担任碳源,硫酸铵为氮源,并辅以Mg²⁺、K⁺、微量元素及磷酸盐缓冲液,pH稳定在6.8–7.2。唯有能分泌有机酸、质子或磷酸酶的细菌,方可将不溶性磷转化为可溶PO₄³⁻,供自身同化并释放到液相中,使原本乳白的悬浊液逐渐澄清,上清有效磷浓度上升,实现“溶磷”可视化与可量化。实验流程简洁高效:250 mL三角瓶装50 mL培养液,接入土壤或根际稀释液,28℃、170 r/min振荡培养5–7天;每24 h取样离心,钼锑抗比色法测定钼蓝吸光度,绘制“溶磷-时间”曲线。高效菌株72 h内上清磷浓度可突破200 mg·L⁻¹,pH降至4.5以下,溶磷率与酸度呈明显负相关。若需高通量比较,可改用96深孔板,同步测定OD₆₀₀与可溶性磷,计算单位生物量溶磷效率,快速锁定优良菌株。质量控制要点:灭菌后磷酸三钙易沉降,使用前需涡旋或磁力搅拌重悬;背景可溶磷须低于0.5 mg·L⁻¹,避免假阳性。储存过程若出现絮凝,多为钙-蛋白复合物,可超声打散,不影响活性。温室试验显示,每亩用两百克菌粉拌基质,黄瓜枯萎率降四成,农药少打一半,果实仍青亮。囊形腐霉
其适生长温度55–65 ℃,芽孢可耐100 ℃沸水2小时、紫外线辐照8小时仍存活,被广用于检验高压灭菌效果。囊形腐霉
拟圆孢线黑粉菌(Filobasidium globisporum)隶属担子菌门、线黑粉目,是一类以冻干粉形式保存、生物危害四类的非模式菌,却在低温酶学与绿色技术领域展现巨大潜力。一、分类与培养特性菌株为乳白色、湿润的酵母状菌落,更适培养温度20℃,可在4–10℃长期冷藏存活2–25年;YPM培养基(甘露醇20g/L、酵母提取物、蛋白胨)即可满足生长,液体培养需避免长时间静置以保持活性。二、低温酶工厂在20℃条件下,该菌分泌高活性纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和木质素降解酶,10℃时仍保留70%以上酶活,适合冷链废弃物处理、低温洗涤和纸浆漂白,可节省蒸汽能耗约20%。三、代谢产物多样发酵液中可检测抗生物质、色素及胞外多糖,对革兰氏阳性细菌具有明显抑制圈;其胞外多糖乳化力强,已作为天然增稠剂用于食品与化妆品小样试制。四、环境修复潜力菌丝体对苯酚、重金属Cd²⁺、Pb²⁺表现出吸附-降解双重作用,5d内可将50mg/L苯酚降至5mg/L以下,吸附铅量达45mg/g,为低温含酚废水、重金属污染水体提供生物修复候选。五、科研与安全作为四类危害微生物,操作只需BSL-1基础实验室;冻干粉复苏快、ITS序列清晰,是研究担子菌低温酶调控、孢子长期保存及冷链机制的理想模式菌。囊形腐霉