伊氏李斯特氏菌

解糖肠球菌（Enterococcus saccharolyticus）是一种革兰阳性、兼性厌氧的球菌，更早从英国稻草垫料中分离，模式菌株ATCC 43076被广用于API及VITEK®系统的质量控制。该菌因能发酵多种糖类产酸，故得名“解糖”，在分类学上与粪肠球菌、屎肠球菌并列，却极少携带典型毒力基因，安全性较高。近年研究发现，解糖肠球菌具有突出的益生潜力：它可在pH 2.5的胃酸和0.3%胆盐中保持90%存活，并分泌乳酸、乙酸等短链脂肪酸，迅速降低肠道pH，抑制沙门氏菌、大肠杆菌等致病菌的定植。体外试验还显示，该菌能黏附于Caco-2细胞单层，上调紧密连接蛋白ZO-1与Occludin的表达，增强肠屏障功能，减轻脂多糖诱导的炎症反应。在动物应用中，日粮添加10^7 CFU/g解糖肠球菌可显著提高断奶仔猪平均日增重8.7%，降低料重比6.3%，并减少腹泻率一半；其代谢产物还能促进双歧杆菌、乳酸菌等有益菌增殖，使结肠丁酸浓度升高30%，改善绒毛高度与隐窝深度比。此外，该菌对万古霉素敏感，不含vanA/vanB耐药操纵子，降低了基因横向转移风险。综上，解糖肠球菌凭借耐酸耐胆盐、产酸抑菌、增强屏障及促生长等多重功能，被视为替代抗生物质的潜力菌株，未来在婴幼儿食品、畜禽养殖及微生态制剂领域具有广阔前景。在工业领域，解硫胺素类芽孢杆菌的应用主要集中在生物合成方面。伊氏李斯特氏菌

盐敏芽孢杆菌（Bacillus halmapalus）是芽孢杆菌属中“怕盐”的稀有成员，却因此成为科研与教学的“模式对照株”。标准菌株 DSM8723 更初由丹麦 Novo Nordisk 分离，更适 NaCl 浓度只 0.5 %，盐度 >2 % 即明显受抑，与嗜盐菌形成鲜明对比，为研究芽孢杆菌耐盐机制提供了理想“负对照”。一、形态与生理菌落乳白色、边缘光滑，革兰氏阳性大杆菌，具周生鞭毛，可形成椭圆芽孢；氧化酶阳性，好氧，更适温度 30 ℃、pH 7.0，能分泌 α-淀粉酶，在 DSMMedium 31 培养基中生长迅速。二、科研价值由于盐敏感特征明确，常被用作“盐胁迫空白”：与耐盐菌株进行平行转录组、蛋白组比较，可快速锁定 Na⁺/H⁺ 逆向转运蛋白、相容溶质合成酶等关键耐盐基因；其 α-淀粉酶在 0–1 % NaCl 时活力比较高，盐度升高活性骤降，为研究酶分子盐适应机制提供“开关型”模型。三、教学与质控国内多所高校将其列为微生物实验“盐梯度生长”标准菌，学生通过梯度平板即可直观观察盐浓度对芽孢杆菌生长速率、芽孢形成率及酶活性的影响，实验重复性好、安全等级 1 级，无需特殊防护。植物内生赖氨酸芽孢杆菌在医药领域，解硫胺素类芽孢杆菌的应用主要集中在营养补充和疾病预防方面。

克劳氏芽孢杆菌（Bacillus clausii）是芽孢杆菌属中的“耐碱”，1915年由意大利克劳氏从碱性土壤中分离，菌体杆状、周生鞭毛，可在 pH 8–10.5、盐 0–12 % 的条件下旺盛生长，芽孢能耐受 100 ℃ 沸水 30 min，是研究极端碱适应的模式菌之一。一、耐碱机制基因组编码多拷贝 Na⁺/H⁺ 逆向转运蛋白（nhaC、mnh）与碳酸酐酶，可将胞内多余 Na⁺ 泵出并维持 pH 稳态；细胞壁肽聚糖富含 meso-二氨基庚二酸，膜脂分支化程度高，为高温高碱酶的高效表达提供稳定平台。二、工业酶宝库其耐碱蛋白酶在 pH 11、40 ℃ 仍保持 90 % 活性，已用于无磷洗涤剂，血渍、奶渍去污力提升 30 %；耐碱淀粉酶更适 pH 9、90 ℃，可在纺织退浆中省略中和步骤，节能 15 %；耐碱木聚糖酶用于纸浆漂白，氯用量减少 30 %，降低可吸附有机卤化物（AOX）排放。三、农业与环境菌株 SIN 可产 IAA 15 mg·L⁻¹ 并溶磷 2.6 mg·L⁻¹，使玉米根系增 28 %，吸磷量提 18 %；与秸秆复配堆肥，24 h 堆温升至 65 ℃，纤维素降解率提高 30 %，堆肥周期缩短 6 d。耐碱特性使其在 pH 9 的苏打盐碱土中仍能定殖，水稻产量增加 10 %。

肉汤培养基（测磷细菌菌数）是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简：牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子；磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙，经球磨过300目，悬于蒸馏水中呈乳白混悬液；pH调至7.0±0.2，分装试管后121℃灭菌15 min，冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂，培养基既保持肉汤的高营养促生优势，又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”，可同步完成溶磷功能验证和菌数测定，适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数（MPN）法：将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释，各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管，每稀释度3重复，28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解，培养液由乳白→局部透明→全管澄清，并伴随菌膜形成；非溶磷菌虽可增殖，但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管，查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数，全程只需3天，比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点：灭菌后磷酸三钙易沉降，使用前需涡旋混匀；若肉汤本身含磷（牛肉膏批次差异），可先用磷钼蓝法测可溶磷，超过5 mg L⁻¹即弃用。菌株20Q9B-2-14对马铃薯软腐病菌抑制明显，为生防制剂添新选项。

盐反硝化枝芽孢杆菌（Virgibacillus halodenitrificans）是芽孢杆菌科中兼具“嗜盐”与“反硝化”双重技能的稀有物种。模式菌株 ATCC 49067 分离自法国太阳能盐场，可在 2–23 % NaCl、10–45 °C 范围内生长，更适盐度 3–7 %、pH 7.4–7.5，细胞壁含 meso-DAP，肽聚糖厚且膜脂分支，赋予其耐高渗与碱胁迫的能力。一、盐中反硝化该菌携带完整的 narG/napA-nirK-nor-nosZ 基因簇，能在 3–12 % 盐度下将 NO₃⁻ 依次还原为 N₂，并同步积累四氢嘧啶作为相容溶质，既完成脱氮又抵御渗透冲击。实验室摇瓶试验显示，盐度 8 % 时其对 NO₃⁻-N 去除率仍达 90 % 以上，N₂O 释放量低于检测限，为高盐废水生物脱氮提供了“零碳源”方案。二、油田与暗管应用菌株 WH-6 被制成“热-盐双耐”菌剂，在 55–80 °C、0.5–3.5 % NaCl 的采出水体系中，通过优先利用 NO₃⁻ 作电子受体，抑制硫酸盐还原菌活性，使 H₂S 产量下降 70 %，延长注水井管柱寿命。同时，含该菌的清淤剂与多孔沸石复配，用于盐碱地暗管排盐，一年后盐水收集率提高 35 %，出口浑浊度降至 4.7 mg L⁻¹，明显缓解因泥沙堵塞造成的维护难题。三、农业与生态修复在 1 % 盐度盆栽中，接种 10⁷ CFU g⁻¹ 土壤，可使生菜根际钾提高 20 %，硝酸盐含量下降 15 %，产量增 12 %。

生物公司以玉米浆发酵罐培养，把芽孢制成可湿性粉剂，拌种、滴灌皆宜，保质期两年，运输不必冷链。伊氏李斯特氏菌

花园芽孢杆菌（Bacillus horti）更早从花园腐殖土中分离，因而得名。菌落奶白、边缘整齐，杆状细胞具周生鞭毛，能形成椭圆芽孢，耐碱、耐盐、耐干燥，在pH 6–9、15–45℃范围内生长良好，是典型“环境通吃型”根际益生菌。一、防病降毒花园芽孢杆菌能分泌表面活性素、fengycin等环脂肽，破坏病原膜结构，对立枯丝核菌、番茄青枯拉尔氏菌抑菌带宽达26mm；同时产生芳基酰胺酶，降莠定、甲磺隆等碱性除草剂，土壤残留量7d内下降60%，为连作障碍田“”。二、促生提质菌株IAA产量25mg/L，溶磷3.2mg/L，并产挥发性2,3-丁二醇，诱导黄瓜、生菜根系增30%，叶绿素提高2SPAD单位；大棚试验显示，亩施200g菌粉可使番茄Vc增加12%，糖酸比更协调，货架期延长4d。三、工业酶潜力其耐碱纤维素酶更适pH9、50℃，在洗衣液中仍保持80%活性，可替代化学去渍剂；低温淀粉酶10℃下活力保留70%，为寒区洗碗粉节约能耗20%。四、未来展望借助合成生物学，将花园芽孢杆菌的降毒、促生、耐冷模块植入枯草底盘，可构建“一菌多效”工程菌，用于碱要害田、寒地蔬菜基地及城市绿化基质，让花园芽孢杆菌从“花园”走向更广阔的大地。伊氏李斯特氏菌