Bushnell-Haas琼脂(Bushnell-Haas Agar,简称BH琼脂)是一种专为检测环境微生物降解烃类能力而设计的合成培养基。其配方精简而精细:以磷酸钾缓冲对维持pH 7.0±0.2,硫酸铵提供氮源,氯化钠、硫酸镁与微量金属盐构成基本离子环境,却不含任何有机碳源。正这份“刻意为之的贫瘠”,使BH琼脂成为筛选“吃油微生物”的黄金标准——只有当培养皿中额外滴加柴油、石蜡或多环芳烃时,能利用这些烃类作为碳与能源的细菌、酵母乃至菌才会长出可见菌落,降解能力越强,菌落周围出现透明晕圈的速度越快、直径越大。自1940年代问世以来,BH琼脂被广用于石油污染土壤、海洋表面膜及工业废水的微生物资源普查。研究人员只需将样品匀浆涂布于表面覆有薄层原油的BH平板,28℃培养3–7天,即可依据菌落形态与晕圈初步分离高效降解株;再结合GC-MS测定残余烃量,可在两周内完成从筛选到定量评价的完整流程。近年来,随着极端环境研究升温,BH配方被灵活调整:添加3% NaCl可分离耐海盐烃降解菌;降低pH至4.5、补充Cu²⁺则用于勘查酸性矿山废水中的耐重金属菌。在工业领域,奇异水螺菌的产酶能力和代谢产物也具有重要的应用价值。北见微杆菌
冷解糖芽孢杆菌(Bacillus psychrosaccharolyticus)是芽孢杆菌属的“低温工匠”。菌体在10–40℃皆能生长,更适25–30℃;芽孢椭圆、中生,可耐干燥、耐紫外,货架期长,为制剂化提供质量材料。其名字里的“解糖”源于强大的胞外酶系:淀粉酶、纤维素酶、琼脂糖酶活性高,能把大分子碳源切成低聚糖,既供自己能量,也为周围菌群“开粮仓”,成为低温堆肥、海藻残渣降解的先锋。更难得的是它“抑菌+保水”双技能。平板对峙试验显示,对黄瓜尖孢镰刀菌、棉花立枯丝核菌、茄青枯拉尔氏菌等7种病原菌抑制率超50%,其中对黄瓜枯萎病原抑菌带宽达8mm,抑制率80%以上。机理在于分泌环脂肽和胞外多糖:多糖成膜后降低叶片水分散失,同时吸附Pb²⁺、Cd²⁺、Cu²⁺,1h内对铅吸附量可达50mg/g,为重金属污染农田提供“微胶囊修复”。农业应用上,研究者将冷解糖芽孢杆菌HD-3与枯草、巨大、胶冻样芽孢杆菌复配,再添海藻提取物、氨基酸和微量元素,制成有效活菌数2–10亿/g、有机质20–40%的“复合微生物海藻肥料”。大田试验中,白菜、番茄、棉花增产幅度均超30%,线虫侵染率下降70%,农药用量减少三成;在滴灌肥中添加1‰胞外多糖,玉米抗旱期延长7天,产量提高18%。拟棒形节丛孢由于其耐辐射特性,它被泛用于研究微生物在极端环境下的生存机制。

解淀粉芽孢杆菌是土壤里藏着的一把“生物刀”。它在营养充足时长成杆状,一遇干旱、高温便缩成厚壁芽孢,可耐沸水煮十分钟、紫外曝晒三小时,十年后遇水仍能萌发。复苏后,它先分泌α-淀粉酶、葡聚糖酶,把作物根际的淀粉、果胶切成低聚糖,抢得碳源,同时释放表面活性素、伊枯草菌素等脂肽,像微型剪刀刺破病原菌膜,对白绢、枯萎、灰霉的抑制率超过七成;还能诱导植物开启系统抗性,番茄未染病就先“武装”叶片。温室试验显示,每亩用两百克菌粉拌基质,黄瓜枯萎率降四成,农药少打一半,果实仍青亮。更妙的是,它能将难溶磷酸钙转化为有效磷,并分泌植物素前体,使玉米须根量增三成,亩产提8%。东北连作大豆田因它缓解“磷饥饿”,减少化肥施用量一成。如今,生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。科学家还在其基因组里插入耐盐基因,让它在西北盐碱地也能萌发,为弃荒滩涂夺回粮田。解淀粉芽孢杆菌用肉眼看不见的臂膀,托住绿色农业的明天:让农药瓶少一个,饭碗多一粒,也让板结的土地重新呼吸。
潘诺尼亚锁霉(Itersonilia pannonica)是一株担子菌门、锁霉属的低温丝状菌,原产中国,常见于草地、腐叶及冷藏蔬菜表面。菌丝白色至淡黄,扩展呈绒毯状,更适生长17℃,pH6,需氧,对盐浓度变化敏感,4℃保存即可。一、科研价值耐冷特性使其成为冷链食品研究的模式菌;与毡状金孢霉近缘,基因组含多种细胞壁降解酶基因,可用于低温酶筛选及担子菌系统发育分析。二、生物防治潜力培养滤液对灰霉、菌核等植物病原菌抑制圈达15–20 mm,并能分泌几丁质酶,分解线虫卵壳,盆栽试验使番茄根结线虫侵染率下降40 %,为开发低温生剂提供候选。三、低温酶应用菌株在10℃仍产较高活性纤维素酶和β-葡萄糖苷酶,可用于低温洗涤、纸浆漂白或冷链废弃物降解,节能20 %,降低高温处理成本。四、教学与质控生物危害四类,培养简易,国内多所高校将其列入“冷链微生物”教学实验,学生可通过梯度平板直观观察低温生长曲线,并用于冷藏食品监测的阳性对照。未来,借助合成生物学,把潘诺尼亚锁霉的冷活性酶基因导入工业酵母,有望构建“冷链-降解”一体化细胞工厂,为冷链物流、低温环保和绿色防控提供新工具。小小锁霉,用一把“冷钥匙”开启低温生物技术的广阔天地。它能够高效地分解硫胺素,生成多种有用的代谢产物,如核苷酸和氨基酸。

施氏芽孢杆菌(Bacillus smithii)是芽孢杆菌属中少见的“高温工匠”,标准菌株 JCM 9076 更早从堆肥深处分离,可在 30–65 ℃、pH 4.5–9.0 范围内旺盛生长,更适温度 55 ℃,芽孢耐 100 ℃沸水 2 h 仍存活,是验证高压蒸汽灭菌的指示菌之一。其耐热关键在于芽孢内高浓度吡啶二羧酸钙(DPA-Ca)结合低水分状态,配合小分子热休克蛋白,使酶与 DNA 在高温下依旧稳定。2024 年,中国团队从湖南镉污染稻田筛选到解磷菌株 M2(保藏号 CCTCC M2024167),鉴定为 B. smithii。该菌可在 50 mg L⁻¹ Cd²⁺、6 % NaCl 条件下正常分泌有机酸,将难溶磷酸钙转化为磷,盆栽玉米根际有效磷提高 42 %,籽粒镉含量下降 35 %,实现“增磷减镉”同步完成。在工业酶方向,施氏芽孢杆菌是“高温酶工厂”。其耐碱性 α-淀粉酶更适温度 70 ℃,在淀粉液化、纺织退浆中可省去降温环节,节能 15 %;耐热蛋白酶在 60 ℃、30 % 乙醇中仍保持 80 % 活性,为生物炼制提供新型催化剂。农业应用上,M2 菌株与秸秆堆肥复配,可使堆体 24 h 升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d;作为功能性菌剂,每亩基施 200 g 菌粉,冬小麦越冬前磷吸收量提高 18 %,分蘖数增加 1.2 个,对后期倒伏有明显缓解作用。牙龈蛋白酶(Gingipains)是牙龈卟啉单胞菌在细胞内合成并分泌到细胞外的一种胰蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶。藤黄节杆菌
随着人们对环保和可持续发展的关注不断增加,生物脱胶技术越来越受到重视。北见微杆菌
耐热芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)是微生物世界的“高温铁人”。其更适生长温度55–65 ℃,芽孢可耐100 ℃沸水2小时、紫外线辐照8小时仍存活,被广用于检验高压灭菌效果。该菌的耐热密码在于:细胞膜富含支链脂肪酸和钙-吡啶二羧酸复合物,降低膜流动性;组蛋白样蛋白紧紧包裹DNA,防止高温断裂;同时拥有一套高效热休克蛋白(Hsp)系统,可快速修复变性蛋白。在工业酶领域,耐热芽孢杆菌是“催化剂工厂”。其分泌的耐高温α-淀粉酶在90 ℃、pH 6.0条件下活性比较高,可将淀粉液化时间缩短一半,广用于酒精、制糖、纺织退浆,年市场需求超万吨;耐热蛋白酶则在60 ℃仍保持80 %活性,可用于洗涤剂,提高低温洗衣的去污力。此外,该菌还能合成耐高温木聚糖酶和脂肪酶,在造纸漂白和生物柴油合成中展现潜力。农业与环境方面,科学家将其与堆肥菌系复配,使堆温迅速升至65 ℃,加速有机质分解,杀灭病原菌和杂草种子,缩短堆肥周期30 %;在油田,耐热芽孢杆菌可耐受55 ℃、高盐环境,利用原油为碳源,产生生物表面活性剂,提高采收率5–8 %。北见微杆菌