SpCas9蛋白(来自化脓性链球菌的Cas9蛋白)在基因编辑中的主要作用是作为核酸酶,能够精确地切割目标DNA序列。以下是SpCas9在基因编辑中的几个关键步骤和作用:1.**识别和结合**:SpCas9蛋白与一个单导向RNA(sgRNA)结合,形成RNP复合物。这个复合物能够识别并结合到基因组中与sgRNA互补的特定DNA序列。2.**PAM序列识别**:SpCas9需要一个称为原间隔子相邻基序(PAM)的特定序列作为识别目标DNA的先决条件。对于SpCas9,这个PAM序列通常是5'-NGG-3'。3.**DNA切割**:一旦RNP复合物与目标DNA结合,SpCas9就会在PAM序列的3个碱基对的上游位置切割DNA双链,产生一个双链断裂(DSB)。4.**引发DNA修复**:DNA双链断裂触发细胞的DNA修复机制,包括同源定向修复(HDR)和非同源末端连接(NHEJ)。研究人员可以利用这些修复机制来插入、删除或替换特定的DNA序列。5.**基因修改**:通过HDR,可以在断裂的DNA两端引入特定的DNA模板,从而实现精确的基因编辑。而NHEJ通常会导致小的插入或缺失(indel),这可以用来产生基因的敲除或敲入。6.**提高编辑效率**:为了提高SpCas9的编辑效率,研究人员可能会使用优化的sgRNA设计、蛋白质工程或嵌合融合蛋白等策略。

重组Exendin-4在科研方面的作用主要体现在以下几个方面:1.**糖尿病研究**:重组Exendin-4作为一种GLP-1受体激动剂,其在2型糖尿病(T2DM)方面具有的疗效,能够模拟GLP-1的作用,增加胰岛素的分泌,抑制胰高的血糖素的分泌,从而降低糖水平。2.**药物开发**:Exendin-4的结构和功能特性使其成为开发新型糖尿病药物的重要候选物质。科研人员通过基因工程方法构建长效融合蛋白,以延长Exendin-4的半衰期,提高其效果和降低生产成本。3.**分子机制研究**:科研中对Exendin-4的作用机制进行了深入研究,包括其对胰岛β细胞的作用、对神经系统的保护作用,以及其在胰岛移植受者中增加胰岛素分泌量的效果。4.**生物合成研究**:通过生物工程技术,如基因序列优化和密码子改造,提高Exendin-4在宿主细胞中的表达效率,以及通过纯化工艺提高其纯度,为临床应用提供基础。5.**药理作用及机制研究**:Exendin-4的药理作用及其机制是科研关注的重点,包括其对胰岛素分泌的影响、对胰岛β细胞增殖和凋亡的调控,以及其在减缓胃排空和抑制食欲方面的作用。Recombinant Mouse ARTN Protein,hFc TagCas12a同源物能够识别更简单的PAM序列(如5-TTN),这使得基因组的覆盖率显著提高。

荧光光谱分析是一种强大的技术,可以用来优化重组EGFP(增强型绿色荧光蛋白)的荧光特性。以下是通过荧光光谱分析来优化EGFP荧光特性的步骤:1.**确定激发和发射波长**:-使用荧光光谱仪测量EGFP的激发和发射光谱,以确定其比较大激发波长和比较大发射波长。-这些波长是EGFP荧光特性的关键参数,可以用于后续的成像和检测实验。2.**优化激发和发射滤光片**:-根据EGFP的激发和发射光谱,选择合适的滤光片以比较大化荧光信号并减少背景噪声。3.**评估荧光量子产率**:-荧光量子产率是衡量荧光效率的一个重要参数,它表示激发态分子产生荧光的概率。-通过比较EGFP与其他标准荧光物质的荧光强度,可以评估其量子产率。4.**荧光缓冲液的优化**:-某些缓冲液成分可能会影响EGFP的荧光特性,如pH值、离子强度和抗氧化剂的存在。-通过改变缓冲液条件,可以优化EGFP的荧光强度和稳定性。5.**温度和氧浓度的影响**:-温度和氧浓度会影响EGFP的荧光特性,包括荧光强度和光稳定性。-在荧光光谱分析中,可以通过改变温度和氧浓度来评估这些因素对EGFP荧光特性的影响。
IdeSProtease是一种免疫球蛋白G(IgG)特异性降解酶,它能够在IgG的铰链区下方的一个特定位点进行切割,产生F(ab')2和Fc片段。这种酶是通过大肠杆菌(E.coli)表达系统重组表达生产的,并且经过分子改造,使其具有更高的酶活和更广的底物特异性。在生产过程中,确保IdeSProtease符合GMP(良好生产规范)标准,需要进行以下步骤:1.**分子改造**:通过分子生物学技术对IdeS进行改造,增强其稳定性和比活性。2.**大肠杆菌表达系统**:利用大肠杆菌表达系统进行IdeS的重组表达,确保无动物源性成分,减少病毒污染风险。3.**纯化**:通过高度纯化过程,确保IdeS的纯度达到≥95%。4.**酶活定义**:1个酶活力单位定义为在37°C条件下,30分钟内酶切1μg重组单克隆IgG所需的酶量。5.**质量控制**:每批产品都经过严格的质量控制,以确保产品批间稳定性和高稳定性。6.**储存条件**:采用适当的储存条件,如-30℃至-10℃冻存,确保产品在有效期内保持活性和稳定性。7.**微生物学安全性检测**:进行无菌检测、体内有毒物质的检测、抗生物质残留检测、宿主细胞蛋白残留检测和病毒安全性检测,确保产品符合微生物学安全性要求。

PreScissionProtease(PSP)是一种在蛋白质纯化和分析中使用的酶,具有以下特点:1.**特异性识别**:PSP能在低温(4°C)下特异性识别八肽序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro或五肽序列Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly之间进行酶切。2.**应用**:PSP常用于去除融合蛋白中的GlutathioneS-transferase(GST)、His等标签,有助于纯化目的蛋白。3.**纯度高**:PSP的纯度达到95%以上,确保了实验的准确性和重复性。4.**稳定性好**:PSP在含有50%甘油的储存缓冲液中,-80℃长期储存,有效期2年;小量分装-20℃保存,有效期6个月。5.**酶活定义**:在5℃条件下反应16小时,能够切割100μg的GST标签蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。6.**兼容性强**:PSP的酶切体系中可以兼容1%TritonX-100、Tween-20或NP-40,10mMEDTA和500mMNaCl。7.**注意事项**:某些化合物如100mMZnCl2、4mMAEBSF和100μMChymostatin会抑制PSP的酶活性50%以上。8.**优化酶切效率**:建议进行预实验摸索实验浓度,实际操作中,建议酶用量1:25-1:100U/μg融合蛋白。Ultra-Long Master Mix 是一种用于长片段PCR扩增的预混液,它含有经过特殊修饰的热稳定Taq DNA聚合酶。Recombinant Biotinylated Human B7-H4 Protein,His-Avi Tag
泛素蛋白是一种在真核细胞中存在的小分子蛋白质,由76个氨基酸残基组成,具有高度的保守性。Recombinant Mouse ARTN Protein,hFc Tag
重组人血清白蛋白(rHSA)是一种重要的蛋白质,广泛应用于生物医学领域。植物表达的细胞培养级重组人血清白蛋白(rHSA)具有多项特点和科研应用价值:1.**高纯度和安全性**:植物源重组人血清白蛋白(rHSA)通过基因工程技术在植物如水稻中表达,避免了动物源成分和血源性的病毒污染的风险,提供了一种更安全、更纯净的蛋白质来源。2.**批次稳定性**:与来源于动物的血清白蛋白相比,植物表达的rHSA提供了更高的批次间一致性和稳定性,这对于科研和工业应用中的重复性和可靠性至关重要。3.**多功能性**:rHSA在细胞培养中可以作为重要的添加成分,有助于细胞生长和维持培养环境的稳定性。它还可以作为药物载体,疫苗保护剂、细胞冻存保护剂和医疗器械包埋剂等。4.**生物相容性**:由于rHSA的化学性质与天然HSA非常接近,它在生物医药生产中具有很高的生物相容性,可以用于多种药物的配方和医疗设备。5.**科研应用**:rHSA在科研中可用于细胞培养、药物载体研究、疫苗开发、组织工程和再生医学等领域。6.**生产规模**:植物表达系统具有大规模生产重组蛋白的潜力,这对于满足全球对rHSA日益增长的需求至关重要。Recombinant Mouse ARTN Protein,hFc Tag
SYBRGreenqPCRMix(2×,UDGPlus):高效防污染的实时定量PCR解决方案SYBRGreenqPCRMix(2×,UDGPlus)是一种为实时荧光定量PCR(qPCR)设计的2×预混液,结合了SYBRGreenI荧光染料和尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,能够有效防止PCR产物污染,提高检测的特异性和准确性。产品特点高特异性和灵敏度:采用抗体修饰的热启动TaqDNA聚合酶,结合优化的反应缓冲液,有效减少非特异性扩增,提高检测灵敏度。防污染设计:预混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反应前降解含尿嘧啶的PCR产物,防止交叉污染。通用性:含有ROX被动参考染料,适用于所有...