核酸(DNA和RNA)的可视化是分子生物学实验中的一项基本技术,用于检测和分析核酸的存在、大小、数量和纯度。以下是几种常用的核酸可视化方法:1.**紫外线(UV)检测**:-利用核酸分子对UV光的吸收特性,特别是在260nm波长下的吸收峰。-常用的UV检测方法包括凝胶电泳后的凝胶成像系统,可以观察到凝胶中DNA或RNA的条带。2.**荧光染料染色**:-使用荧光染料,如溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)或SYBRGreen,这些染料可以与核酸结合并在特定波长的光照射下发出荧光。-EB常用于凝胶电泳后的DNA可视化,而SYBRGreen可用于实时定量PCR(qPCR)中DNA的检测。3.**凝胶电泳**:-通过将核酸样品加载到凝胶中,利用电场驱动核酸分子按大小分离,然后通过上述的UV或荧光染料进行可视化。4.**紫外交联**:-某些荧光染料,如BODIPY或Cy5,可以通过紫外交联直接结合到核酸上,提供更高的灵敏度和特异性。5.**银染**:-一种比EB染色更灵敏的染色方法,通过银离子与核酸的结合,然后还原成金属银,形成可见的黑色或棕色条带。6.**化学发光检测**:-使用特定的化学发光底物,如荧光素或鲁米诺,与核酸结合后,在氧化过程中产生光信号。将MAGE-A3基因序列克隆到一个表达载体中,该载体通常包含有抗生物质抗性基因、启动子、核糖体结合位点。Recombinant Human C5AR Protein-VLP

dATPSolution(脱氧腺苷三磷酸溶液)是一种常用的分子生物学试剂,通常以100mM的浓度提供。这种溶液主要用于支持DNA的合成过程,如聚合酶链反应(PCR)、DNA测序、填入反应、切口平移、cDNA合成和TdT加尾反应等。dATP的化学结构是2'-脱氧腺苷-5'-三磷酸,它是DNA聚合酶在DNA复制过程中用来合成DNA链的原料之一。在Sanger测序中,dATP与ddATP(双脱氧腺苷三磷酸)一起使用,后者是dATP的一种衍生物,缺少3'-OH基团,用于链终止反应。dATP溶液应储存在-20°C的条件下以保持其稳定性和活性,有效期通常为两年。在生产过程中,dATP通常按照ISO9001标准进行,并在D级清洁室中进行以确保高质量和纯度。HPLC确认的纯度通常大于99%。dATP溶液不含qPCR、PCR、逆转录抑制剂,也不含DNase、RNase以及人类和大肠杆菌DNA,以避免实验过程中的污染。Recombinant Mouse CX3CL1/Fractalkine Protein,His TagFnCas12a不仅可用于体外dsDNA的特异剪切,也可用于靶标核酸的快速检测,如HOLMES核酸快检技术。

重组酶聚合酶扩增技术(RecombinasePolymeraseAmplification,简称RPA)是一种核酸扩增技术,能够在等温条件下快速检测特定DNA序列。这项技术以其快速、灵敏度高、特异性强、对设备要求低等优点,在临床快速诊断、食品检测、防控、工业应用、现场实时检测等领域具有广泛的应用潜力。**技术原理**:RPA技术主要依赖于几种关键的酶和蛋白质:-**重组酶**:能够识别并结合到单链核酸(寡核苷酸引物)上。-**单链DNA结合蛋白(SSB)**:与被置换的单链DNA结合,防止其重新结合形成双链。-**链置换DNA聚合酶**:在引物定位同源序列后,进行链延伸,实现DNA的指数增长。RPA的工作原理是,重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。**技术优势**:-**快速性**:RPA可以在37-42°C的等温条件下快速完成核酸的扩增,通常在10到30分钟内即可完成。-**灵敏度和特异性**:RPA能够检测低至单拷贝的核酸模板,并具有高特异性。
T4UvsX重组酶的保存和纯化是实验室工作流程中的重要环节,确保了酶的稳定性和活性。以下是根据搜索结果提供的信息:保存条件:-T4UvsX重组酶通常在-20°C的条件下保存,可以保持3年的有效期。-某些产品说明中提到,该制品不含甘油,可用于建立冻干体系,这可能对长期保存和运输有额外的好处。-建议避免反复冻融,因为这可能会影响酶的活性。纯化过程:-T4UvsX重组酶是由大肠杆菌表达和纯化的。这意味着科学家首先将T4噬菌体的uvsX基因克隆到适合在大肠杆菌中表达的质粒载体中。-然后将这个质粒转化到大肠杆菌宿主细胞中,使其表达T4UvsX蛋白。-接下来,通过一系列生化步骤从大肠杆菌细胞中提取和纯化T4UvsX蛋白,这些步骤可能包括细胞裂解、离心、层析等技术。注意事项:-T4UvsX重组酶的保存液中甘油含量为20%,建议单独分装保存,以避免反复冻融。-该酶无核酸酶活性,这表明它在催化反应时不会切割DNA链,而是促进DNA链的重组。-本产品用于科研用途,不应用于临床诊断。应用:-T4UvsX重组酶主要用于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA),这是一种快速、灵敏的核酸检测技术。通过遵循这些保存和纯化指南,研究人员可以确保T4UvsX重组酶在实验中的有效性和可靠性。Cas9 NLS可用于体外实验中筛选能够高效引导Cas9蛋白进行DNA剪切的gRNA序列 。

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)主要用于从RNA模板合成链cDNA,而不是直接用于线性RNA的放大。然而,合成的cDNA可以作为模板用于后续的线性RNA放大过程,这通常涉及以下几个步骤:1.**cDNA合成**:使用1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)按照试剂盒的说明进行操作,从线性RNA模板合成链cDNA。2.**第二链cDNA合成**:在某些情况下,可能需要合成双链cDNA。这可以通过使用DNA聚合酶和第二链合成试剂来完成,从而获得完整的双链cDNA。3.**线性RNA放大**:一旦获得了cDNA,可以使用体外转录(IVT,InVitroTranscription)技术来放大RNA。这通常涉及以下步骤:-使用含有RNA聚合酶启动子序列的特定引物对cDNA进行PCR扩增。-使用含有RNA聚合酶识别位点的引物进行体外转录反应,以合成大量RNA拷贝。4.**RNA纯化**:体外转录产生的RNA需要通过适当的方法(如柱层析或沉淀)进行纯化,以去除DNA模板、未反应的核苷酸和其他杂质。5.**RNA质量检测**:使用凝胶电泳或生物分析仪检测RNA的质量和大小,确保RNA的完整性和纯度。在一项研究中,比较了具有不同NLS融合的Cas9蛋白和Cas9 mRNA在斑马鱼基因组编辑中的效率。Recombinant Biotinylated Human TPBG/5T4 Protein,His-Avi Tag
由于其高活性,pA-Tn5转座酶允许从极少量的细胞中进行实验,如单细胞水平的研究。Recombinant Human C5AR Protein-VLP
合成互补DNA(cDNA)的试剂盒是一种实验室工具,用于从RNA模板通过逆转录过程合成DNA。逆转录是一种酶促反应,其中RNA模板被逆转录酶(一种特殊的DNA聚合酶)读取,并根据RNA序列合成一条互补的DNA链。这个过程在分子生物学研究中非常重要,因为它允许科学家从RNA样品中获取遗传信息,并进行进一步的分析和应用。cDNA合成试剂盒通常包含以下关键组分:1.**逆转录酶**:一种特殊的酶,能够以RNA为模板合成DNA链。例如,M-MuLV反转录酶是一种常用的逆转录酶。2.**RNase抑制剂**:一种蛋白质,可以防止RNA样品在实验过程中被环境中的RNase酶降解。3.**缓冲液**:提供适宜的化学环境,保证逆转录酶的活性和反应的顺利进行。4.**dNTPs**:四种去氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP和dTTP),是合成DNA链的原料。5.**引物**:短的单链DNA或RNA基础片段,用于启动cDNA的合成。常见的引物类型包括oligo(dT)引物(针对mRNA的poly(A)尾)、随机引物或特异性引物。6.**水**:通常是无核酸酶的水,以避免样品被污染。Recombinant Human C5AR Protein-VLP
重组人SPARC蛋白(His Tag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。SPARC(Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine)是一种分泌性糖蛋白,广存在于细胞外基质中,参与多种生物学过程,包括细胞黏附、迁移、增殖以及组织修复和重塑。它在胚胎发育、伤口愈合、病发生和心血管疾病中发挥重要作用。SPARC的功能与机制SPARC通过其富含半胱氨酸的结构域与其他细胞外基质蛋白(如胶原蛋白、纤连蛋白)相互作用,调节细胞外基质的组装和重塑。此外,SPARC还通过与细胞表面受体(如整合素)结合,影响细胞的黏附、迁移和增殖。在...