曾为国内、外医药企业做过多个药物的临床前药理研究,研发产品已成功上市。在中国工作期间参加完成10项课题,在美国参与完成了NIH(NationalInstitutesofHealth)及AHA(AmericanHeartAssociation)的多个基金项目。发表学术论文60余篇,曾获得省部级一、二等科技奖7项。在学术期刊如Nature,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,JournalofClinicalInvestigation,Circulation,CirculationResearch,Cell,NatureCommunications,NatureMetabolism,ScienceTranslationalMedicine发表多篇论文。手术疾病模型精选案例1.心肌梗死模型(左冠状动脉结扎术)与缺血再灌注损伤模型2.主动脉弓缩窄3.慢性心力衰竭模型赛业生物可提供的小动物手术疾病模型及相关服务心脑血管系统手术心肌梗死模型(左冠状动脉结扎术)心脏缺血再灌注损伤模型主动脉弓缩窄术(TAC)升主动脉缩窄术腹主动脉缩窄术(模型)心力衰竭模型肺动脉高压模型大脑中动脉栓塞。裸鼠皮下成瘤:前肢近腋后皮下注射细胞悬液; 裸鼠原位瘤:胰腺成瘤;尾静脉注射成瘤。湖北豚鼠动物模型服务

酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常组大鼠自由饮水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease,AFL)模型组大鼠自由饮用酒精饮料,其酒精浓度从5%开始,每个浓度维持一周,依次改为10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%,以40%浓度持续至12周。3、在实验过程中,各组大鼠均给以普通颗粒饲料,共持续为12周。4、第12,动物禁食12h,称重,下腔静脉取血处死,血液离心取上清备用。【检测】1、生化指标检测检测ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、组织病理学酒精性脂肪肝模型组大鼠肝脏体积增大,明显肿胀,包膜紧张,边缘圆钝,呈奶黄色,切面油腻,腹腔内尤以有腹膜后脂肪堆积明显。HE染色显示,正常组肝脏内无明显脂肪变性,肝小叶结构正常,肝细胞索围绕静脉呈放射排列。模型组肝脏弥漫大量脂肪变性,细胞体积增大,呈气球样变。3、标志因子水平ELISA法测定血清中TNF-α和ApoB的含量。江苏豚鼠动物模型培养由于卵巢早衰的病因多种多样,如自身免疫功能异常、遗传因素、代谢因素、化疗、放疗及等。

扩增产物为。其中a2,3,6,9,10,b1为阳性。扩增3’端长臂使用引物:neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’;gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’结果见图3中b,扩增产物为。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g为阳性杂合子,+/+为野生型对照。5将步骤4得到的杂合子小鼠动物与转基因鼠flper鼠交配繁育,得到gm20541基因条件性敲除杂合子小鼠;6将步骤5得到的gm20541基因条件性敲除杂合子小鼠相互交配繁育,得到gm20541基因条件性敲除纯合子小鼠;7将步骤6得到的gm20541基因条件性敲除纯合子动物与转six3-cre基因动物交配,得到视网膜前体细胞gm20541基因敲除小鼠。转基因鼠flper鼠购自美国捷克森实验室(品系名称:(rosa)26sortm1(flp1)dym/rainj)。six3-cre转基因小鼠(mgi:3574771)由美国德克萨斯大学安德森中心赠送。six3是一个前脑腹侧和视网膜前体细胞的标志性转录因子,其特异性驱动cre基因在视网膜前体细胞表达,cre蛋白可以进入细胞核,识别基因组上loxp位点,实现基因敲除。基因敲除小鼠鉴定步骤:对上述视网膜前体细胞敲除gm20541基因的小鼠的基因型鉴定,操作如下:(1)剪小鼠尾梢少许组织样本,置于干净的;(2)在离心管中加入100μl裂解液。
根据gm20541的cdna序列设计引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3';gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3';(g)以提取的cdna为模板,进行rt-pcr。扩增后进行电泳。结果见图4中b,可以看出,通过rt-pcr方法检测gm20541在gm20541基因敲除纯合子小鼠的视网膜中表达量降低。图4的b中ctrl是指野生型对照,sixko是指gm20541基因敲除纯合子小鼠;gm20541rnalevel是指rna表达水平相对变化,以野生型表达水平为1。实施例3对4月龄的gm20541基因敲除纯合子小鼠进行erg视力检测:1暗适应动物应整夜暗适应,环境应做到没有光线;2次日麻醉:称重,腹腔内注射;宜深度麻醉;3动物固定及散瞳:麻醉完成后,在暗红光照明下将小鼠用胶带固定在动物试验平台的前方:需保证小鼠正"趴",即相对于闪光刺激器的刺激口,双眼高度一致,充分暴露,滴加散瞳剂。4电极安装:将视网膜电图仪(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)预热后,在耳夹电极涂上导电膏,夹尾巴,插入放大器“地”接口;双头的针电极插入后颈皮(大约在两耳中间),同时接两个通道的“负”接口;金环电极夹在动物实验平台的电极支架上,仔细调整其角度。慢性阻塞性肺疾病是一种具有气流阻塞特征的慢性和(或)肺气肿。

结果发现在这些组织中,gm20541均有表达,说明该基因可能在体内发挥重要功能。2采用免疫印迹(westernblot)的方法检测gm20541基因在不同组织中的表达。方法:(1)分别获取小鼠脑、肝脏、视网膜、心脏、肾脏以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超声破碎细胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g离心10min后,取上清转移至另一干净离心管,加入50μl的蛋白上样液,混匀后95℃加热5min。(4)待样本冷却后,分别取20μl,160v电压进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)以分离蛋白。(5)sds-page结束后,根据需要,裁剪适当大小的硝酸纤维素膜,按顺序铺上滤纸、胶、硝酸纤维素膜及滤纸,并赶去气泡,转膜槽放入冰水浴中,采用恒流,转膜2h。(6)转膜完毕后,纯水冲洗硝酸纤维素膜一遍,晾干并标记。然后用8%的脱脂牛奶封闭2h。(7)封闭完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗体使用说明书)稀释于封闭液的一抗,4℃孵育过夜。(8)回收一抗,1×tbst缓冲液洗膜4次,每次10min,根据一抗来源,选择合适二抗,用1×tbst稀释辣根过氧化氢酶(hrp)标记的二抗,室温于摇床上孵育2h。(9)二抗孵育结束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc发光试剂盒检测蛋白。急性肺损伤(acute lung injury,ALI)。湖北豚鼠动物模型服务
APOE-/-鼠左颈动脉结扎糖尿病模型。湖北豚鼠动物模型服务
导师给我们上的堂课往往就是交代我们要详细记好实验记录,只要是和实验相关的,无论是照片,还是文字,必须要及时事无巨细地详细记录。并且要备份好每一份实验记录。我个人一般喜欢每天及时地记在「科研实验记录本」上面,然后拍照扫描成电子版储存在电脑和云端。时间规划首先,个人是不赞同每天24小时泡在实验室的,高效率是关键。建议提前一天规划好第二天需要做的事情,按照代办事项的格式逐条列出,哪一个时间段需要做什么事情?这样的好处有两点,一个是自己提前把时间预约好,可以留出足够的时间休息和娱乐;另一个是在执行计划的时候往往会有一种时间紧迫感,办事起来往往更高效且不会遗漏。总之,预实验就是迷你版正式实验,希望小伙伴们在进行预实验的时候一定要尽可能地准备周全,这样才能快的推进正式实验。湖北豚鼠动物模型服务