这是一种用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。 为了与下游应用兼容,常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长,多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活,而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新,需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。 Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准 操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果,数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体,减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差,使蛋白样品的处理更加标准化,数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。超滤浓缩管代理销售哪家比较靠谱。青浦区默克2ml超滤浓缩管报价
通量(超滤效率)及其影响因素 超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的 通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时 会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参 与影响通量的因素很多,包括: 压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力 (TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯, 这种因素影响较为明显。如果极化影响***,通量会达到一个平台,甚 至可能随着压力的增加而降低。Millipore超滤浓缩管商家你知道超滤浓缩管的用途吗?
对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV(腺相关***)的制备方法供参考。 去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration, CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果。 Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。 2)如果目的样本也不在滤过液中,那么: a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。上海超滤浓缩管代理销售电话多少?
***的化学兼容性 •膜与管壁采用特别的热封工艺,避免使用胶水 带来的化学溶出对样品的污染 •Ultracel® 超滤膜和聚丙烯管材性能稳定,化学 兼容性好 •pH3-10 适用 特别推荐应用(提供实验报告作为参考) Amicon® Ultra 离心超滤管: • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 尿液中蛋白质的浓缩 • 游离标记物的去除 • 抗体的快速浓缩 • 血清多肽生物标志物的纯化 • 双向电泳蛋白样品制备 • 样品去垢剂的去除 操作更安心 •设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即 使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作 •性能稳定,数据平行性、重现性好,适合精细操作和 高通量操作上海超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。青浦区默克2ml超滤浓缩管报价
超滤浓缩管的好处都有很多。青浦区默克2ml超滤浓缩管报价
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。 7. 4,000×g离心15 min。 8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 用Protein A或G对抗体进行亲和纯化青浦区默克2ml超滤浓缩管报价