首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因： 1）如果目的样本在滤过液中，那么请排查： a）是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？ b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。 c）离心机**近是否有校准过？ d）是否***尝试这个蛋白？买超滤浓缩管找益启生物公司。静安区默克4ml超滤浓缩管咨询报价
外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体：300μg样品（相当于300μg总蛋白）用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释，与protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上（以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰），请参考默克磁珠操作说明书。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推荐使用试剂目录号信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准，相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心，用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题，真是惠而不费，不亦乐乎？长宁区默克超滤浓缩管批发上海超滤浓缩管供应商。
Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南 亲和纯化 用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作 6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间） 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤，这个时候考虑到得率，应该采用离心法处理，以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]
用于搅拌式超滤杯的Ultracel®预切超滤膜片 Ultracel® 再生纤维素膜可以用来对较为稀释的溶液进行脱盐或浓缩。Ultracel® 膜是亲水性的，微观结构紧密，确保对蛋白、核酸等大分子吸附比较低而回收率比较高。 *膜的常规截留分子量分为1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直径分为25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 对于大体积、高浓度（如蛋白浓度大于 1.0 mg/mL）的样品进行脱盐和浓缩，Biomax®聚苯醚砜（PES）超滤膜是很好的选择。血清、血浆或条件组织培养基等，都是 Biomax®超滤膜适合处理的样品。 *膜的常规截留分子量为5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直径分为25,44.5,47,63.5和76mm。超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢？
特点与优点 温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性 所有型号都可以高压灭菌 提供 3 种规格共选择，用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品 浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速 应用： 大分子（如蛋白、酶、抗体和***）溶液的浓缩和缓冲液置换 渗滤（Diafiltration）模式 非连续渗滤是换液的一种操作方法，即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积，并多次重复这个操作，直到溶液中的盐或溶剂被 去除或降到需要的浓度。而连续渗滤（保持恒定体积）是将超滤杯经转换装置（目录号6003）与补液杯（目录号6028）连接， 使供气压和液体流转。连接有转换装置时，不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换，将两种操作模式的优点 集中在一起，有利于敏感的（蛋白）样品在**恒定、温和的条件下高效换液。益启生物公司就带您了解一下超滤浓缩管的特点。崇明区Merck离心浓缩管联系人
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超滤（UF）常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响，这种方法主要还是以分子大小为**基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa（MW）的分子，盐和水等小分子会透过，因此在大分子样品处理中得到了应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品***小于膜孔径，则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径，膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和，没有发生容易导致生物大分子失活的相变，而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的应用不限于蛋白样品的操作，也常用于核酸样品制备，包括分子克隆和质粒纯化。DNA和RNA样品起始浓度低至5ng/mL也可以被高效地在数分钟内被浓缩，回收率达到99%以上。静安区默克4ml超滤浓缩管咨询报价
