T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。UBE2L3作为泛素化途径中的关键酶,其在蛋白质降解、信号传导、细胞周期控制等重要内容有着作用。10mg/ml EB

Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/µl):高效除PCR污染的关键酶在分子生物学研究中,PCR技术的应用极为广,但PCR产物的交叉污染问题一直是影响实验准确性和可靠性的关键因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作为一种高效的酶工具,凭借其独特的性能和广的应用,已成为解决这一问题的理想选择。一、产品特点高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能够特异性地催化DNA中尿嘧啶(dU)碱基与脱氧核糖之间的N-糖苷键水解,释放游离尿嘧啶。这种酶对单链和双链DNA均有效,但对RNA或长度不超过6个碱基的DNA寡核苷酸无活性。防止PCR产物污染UDG的主要应用之一是防止PCR产物的交叉污染。通过在PCR反应中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR产物,UDG可以特异性地切割这些含有dU的DNA,从而防止其在后续反应中作为模板被扩增。反应条件兼容性UDG在pH8.0左右表现出活性,且不需要二价阳离子,可在较宽的pH范围内工作。它对高离子强度(>200mM)敏感,因此在使用时需注意反应体系的离子浓度。Recombinant Human CD200 R1/CRTR2 (hFc Tag)Endo H 相对比较娇贵,需要在特定的条件下保存才能保持其活性,一般需要在 - 20℃或更低温度下保存。

在现代分子生物学研究中,实时荧光定量PCR(qPCR)技术已成为基因表达分析、病原体检测、基因拷贝数变异研究等领域的工具。而OneStepRT-qPCRProbeKit凭借其产品特点和性能,为科研工作者提供了一种高效、可靠的解决方案,极大地推动了相关研究的进展。一、产品特点(一)一步法操作OneStepRT-qPCRProbeKit采用独特的一步法反应体系,将逆转录(RT)和qPCR反应集成在一个反应体系中。这种设计极大地简化了实验操作流程,减少了人为操作误差和样本污染的风险。相比传统的两步法,一步法节省了时间和人力成本,还提高了实验的重复性和稳定性,尤其适合高通量样本的检测。(二)高灵敏度与特异性该试剂盒采用了先进的探针技术,结合优化的酶体系和反应缓冲液,能够实现对低丰度靶标基因的高灵敏度检测。其特异性探针设计确保了与目标序列结合,避免了非特异性扩增的干扰,从而为定量分析提供了准确可靠的数据支持。无论是对微量样本中的基因表达进行定量,还是对低浓度病原体进行检测,OneStepRT-qPCRProbeKit都能表现出性能。
重组人整合素αVβ5(ITGAV&ITGB5)异源二聚体蛋白(His-Avi标签)是一种重要的细胞粘附分子,广泛应用于细胞生物学、药物筛选和疾病机制研究。整合素αVβ5由αV(ITGAV)和β5(ITGB5)两个亚基组成,是细胞外基质(ECM)与细胞之间信号传递的关键介质,尤其在转移、血管生成和病毒沾染等过程中发挥重要作用。该重组蛋白通过基因工程技术在哺乳动物细胞中表达,确保了其天然的构象和生物活性。His标签便于通过金属螯合亲和层析进行纯化,而Avi标签则允许通过生物素连接酶进行特异性生物素化,便于后续的检测、固定或与其他分子的偶联。这种双重标签设计更大提高了蛋白在实验中的可操作性和应用灵活性。在功能研究中,αVβ5异源二聚体蛋白可用于研究其与配体(如玻连蛋白)的结合特性,或作为体外细胞粘附实验的关键试剂。此外,它也是开发靶向整合素药物的重要工具,尤其在抗和抗纤维化药物筛选中具有重要价值。其高纯度和高稳定性使其成为科研和药物开发中不可或缺的关键材料。AccI 还可以用于构建基因文库,为研究基因功能和进化提供了重要的工具。

Uracil-DNAGlycosylase(Heat-labile,Cod),即热敏型鳕鱼尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG),是一种源自大西洋鳕鱼(Gadusmorhuacod)的酶,具有独特的热敏感性和高效性。这种酶在分子生物学和诊断领域中具有广泛的应用,尤其是在需要严格控制污染的PCR和qPCR实验中。产品特点热敏感性:与普通UDG酶相比,热敏型UDG在50℃下加热10分钟即可完全且不可逆地失活。这种特性使其在PCR反应中表现出色,避免了常规UDG酶灭活后可能残留的活性对扩增产物的降解作用。高效性:该酶能够在25℃下迅速催化水解含有尿嘧啶的DNA链,释放游离尿嘧啶,对单链和双链DNA均有效。特异性:UDG酶对RNA无活性,作用于含有尿嘧啶的DNA,这使其在DNA处理和分析中具有高度的特异性。性能优势防止污染:热敏UDG酶能够有效去除含dU的PCR产物气溶胶污染,从而避免假阳性结果的出现。这对于需要高灵敏度和特异性的分子诊断实验至关重要。兼容性:该酶在多数PCR反应缓冲液中均具有活性,且在实验过程中无需添加额外的抑制剂或组分即可实现热失活。储存与运输:热敏UDG酶在-20℃下可稳定保存两年,运输过程中采用干冰保护,确保酶的活性Phusion DNA Polymerase是一种高性能的热稳定DNA聚合酶,以其高保真度快速扩增和稳健反应而闻名于科研领域。Recombinant Mouse RGM-C Protein,His Tag
FnCas12a需要一个crRNA,而不需要tracrRNA,简化了RNA的设计和构建过程。10mg/ml EB
ROR1属胚胎期I型受体酪氨酸激酶,成年后沉默复现于多种实体瘤与血液恶病,成为“病胚”标志物与ADC、CAR-T热门靶点。本品采用HEK293真核表达,覆盖胞外完整Ig-like/Frizzled/Kringle结构域(aa30-406),C端6×His标签经Ni-NTA两步纯化,纯度≥98%,内素<0.05EU/μg,糖基化与天然构象经质谱与圆二色谱双重验证。功能层面,重组ROR1以高亲和力结合Wnt5a(KD=4.7nM),可剂量依赖启动非经典通路,诱导乳腺病细胞迁移;在体外阻断实验中,50ng/mL即可抑制Wnt5a介导的ROR1-FZD复合体形成。His标签支持ELISA、SPR与细胞染色多重应用,加速抗体筛选、ADC内化效率及CAR-T抗原密度测定。该蛋白为解析ROR1驱动病干性与免疫逃逸机制,以及下一代精细疗法开发提供了标准化、高活性的关键材料。10mg/ml EB
在基因工程的微观世界中,限制性核酸内切酶是科学家们手中的重要工具,而ApaLI便是其中一位“精细刻刀”。它以其独特的识别序列和精细的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物学研究中发挥着关键作用。ApaLI的识别序列是“G^TGCAC”,这一序列在DNA中相对罕见,使得ApaLI能够在特定位置进行切割。它会在“^”标记的位置将DNA链切断,产生黏性末端。这种黏性末端的特性使得ApaLI在基因克隆和重组DNA构建中具有独特的优势。在基因工程中,ApaLI的应用极为广。科学家可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地分离出来,再通过DNA连接酶将切割后的基因片段与载体DNA连接起来,构建出能够高...