抑制暗棕色杆菌

无机磷细菌培养基（不含琼脂）是专为“溶磷菌”筛选与活性测定设计的合成液体培养基。其配方精髓在于“难溶磷”：磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕以悬浮颗粒形式存在，不提供任何磷；葡萄糖或甘露醇担任碳源，硫酸铵为氮源，并辅以Mg²⁺、K⁺、微量元素及磷酸盐缓冲液，pH稳定在6.8–7.2。唯有能分泌有机酸、质子或磷酸酶的细菌，方可将不溶性磷转化为可溶PO₄³⁻，供自身同化并释放到液相中，使原本乳白的悬浊液逐渐澄清，上清有效磷浓度上升，实现“溶磷”可视化与可量化。实验流程简洁高效：250 mL三角瓶装50 mL培养液，接入土壤或根际稀释液，28℃、170 r/min振荡培养5–7天；每24 h取样离心，钼锑抗比色法测定钼蓝吸光度，绘制“溶磷-时间”曲线。高效菌株72 h内上清磷浓度可突破200 mg·L⁻¹，pH降至4.5以下，溶磷率与酸度呈明显负相关。若需高通量比较，可改用96深孔板，同步测定OD₆₀₀与可溶性磷，计算单位生物量溶磷效率，快速锁定优良菌株。质量控制要点：灭菌后磷酸三钙易沉降，使用前需涡旋或磁力搅拌重悬；背景可溶磷须低于0.5 mg·L⁻¹，避免假阳性。储存过程若出现絮凝，多为钙-蛋白复合物，可超声打散，不影响活性。这些酶可以分解麻类植物中的果胶、半纤维素和木质素，从而将纤维从植物组织中分离出来。抑制暗棕色杆菌

史氏芽孢杆菌（Bacillus smithii）是芽孢杆菌属中嗜热分支的，标准菌株 JCM 9076 更初从高温堆肥中分离，能在 55 ℃、pH 6.5 条件下旺盛生长，芽孢可耐 100 ℃沸水 2 h，是验证高压灭菌效果的指示菌之一。其细胞壁含特殊脂肪酸，膜脂熔点高，配合小分子热休克蛋白，使核糖体和 DNA 在高温下仍保持构象稳定，赋予菌体“耐热盾牌”。2024 年，中国团队从镉污染稻田筛选到解磷菌株 M2（保藏号 CCTCC M2024167），鉴定为 Bacillus smithii。该菌兼具三重抗逆：耐盐 6 %、耐镉 50 mg·L⁻¹，并能在 pH 4.5–9.0 范围内正常分泌有机酸，将难溶磷酸钙转化为磷，盆栽试验中使玉米根际有效磷提高 42 %，籽粒镉含量下降 35 %，实现“增磷减镉”同步完成。在酶制剂方向，史氏芽孢杆菌是“高温酶工厂”。其胞外碱性淀粉酶更适温度 70 ℃，在洗涤剂、烘焙和酒精浓醪发酵中可省去降温环节，节能 15 %；耐有机溶剂蛋白酶可在 60 ℃、30 % 乙醇环境中保持 80 % 活性，为生物炼制提供新型催化剂。农业应用上，M2 菌株可与秸秆堆肥复配，使堆体温度 24 h 升至 65 ℃，纤维素降解率提高 30 %，堆肥周期缩短 7 d；作为功能性菌剂，每亩随基肥施入 200 g 菌粉，冬小麦越冬前磷吸收量提高 18 %，分蘖数增加 1.2 个，对后期倒伏有明显缓解作用。嗜热喜粪链霉菌其基因组已被测序，为分子生物学和生物技术研究提供了丰富的资源。

盐敏芽孢杆菌（Bacillus halmapalus）是芽孢杆菌属中“怕盐”的稀有成员，却因此成为科研与教学的“模式对照株”。标准菌株 DSM8723 更初由丹麦 Novo Nordisk 分离，更适 NaCl 浓度只 0.5 %，盐度 >2 % 即明显受抑，与嗜盐菌形成鲜明对比，为研究芽孢杆菌耐盐机制提供了理想“负对照”。一、形态与生理菌落乳白色、边缘光滑，革兰氏阳性大杆菌，具周生鞭毛，可形成椭圆芽孢；氧化酶阳性，好氧，更适温度 30 ℃、pH 7.0，能分泌 α-淀粉酶，在 DSMMedium 31 培养基中生长迅速。二、科研价值由于盐敏感特征明确，常被用作“盐胁迫空白”：与耐盐菌株进行平行转录组、蛋白组比较，可快速锁定 Na⁺/H⁺ 逆向转运蛋白、相容溶质合成酶等关键耐盐基因；其 α-淀粉酶在 0–1 % NaCl 时活力比较高，盐度升高活性骤降，为研究酶分子盐适应机制提供“开关型”模型。三、教学与质控国内多所高校将其列为微生物实验“盐梯度生长”标准菌，学生通过梯度平板即可直观观察盐浓度对芽孢杆菌生长速率、芽孢形成率及酶活性的影响，实验重复性好、安全等级 1 级，无需特殊防护。

乳酸铁营养琼脂（Lactose Iron Nutrient Agar）是一种兼具选择性、鉴别性与营养性的复合培养基，常用于食品、水质及临床标本中革兰阴性肠道菌的快速分离与初步鉴定。其关键原理在于“双指示”设计：乳糖作为可发酵碳源，与铁盐共同构成判别系统——能发酵乳糖的菌株产酸，使酚红指示剂由红变黄；若同时产气，则可在培养基内形成气泡或裂缝。而铁离子的加入，让具备硫化氢（H₂S）生成酶的细菌（如某些变形杆菌、沙门氏菌）将硫代硫酸钠还原，与Fe²⁺结合生成黑色FeS沉淀，菌落中心呈现特征性黑心，实现“一眼辨菌”。配方上，乳酸铁营养琼脂在营养琼脂基础上添加1%乳糖、0.02%硫代硫酸钠与0.02%柠檬酸铁铵，pH调至7.4±0.2，既保证肠杆菌科的基本营养需求，又通过高糖与铁盐抑制部分非目标菌的过度生长。倾注平板后呈淡红色半透明，若室温存放出现泛黄，说明培养基已酸化，需弃用。接种时，多采用分区划线，35℃培养18–24小时即可读取结果：乳糖发酵阳性菌（如大肠埃希菌）形成黄色、边缘整齐的大菌落；乳糖阴性菌（如志贺菌）则保持红色；若菌落中心发黑，则提示H₂S阳性，需进一步做血清学或质谱确认。其适生长温度55–65 ℃，芽孢可耐100 ℃沸水2小时、紫外线辐照8小时仍存活，被广用于检验高压灭菌效果。

包姜氏液体培养基基础（BGA Broth Base）是为培养姜苗根茎共生促生菌而设计的富氮液体培养基，由包头师范学院与姜科作物团队共同优化，故得“包姜”之名。其配方以酪蛋白胨与大豆木瓜酶消化物提供与缓释氨基酸，酵母粉补充B族维生素和微量元素，可溶性淀粉作碳源，既避免葡萄糖过量产酸，又模拟根茎分泌物成分；特别添加0.3% K₂HPO₄与0.2% MgSO₄，缓冲能力强，可中和菌体代谢酸，维持pH 6.8–7.0，满足假单胞菌、芽孢杆菌及稀有放线菌的同步增殖。实际应用中，1 L培养基接种5 mL姜块研磨液，28℃、160 r/min振荡培养24 h，菌浓即可达2×10⁹ CFU/mL，菌液呈淡棕、微粘，带新鲜生姜清香；继续补糖发酵可产胞外多糖1.2 g/L，对番茄、辣椒具明显促根活性。若需固体分离，补加1.2%琼脂即得BGA平板，可直观观察菌落形态：有效菌株多呈乳白、边缘波状，48 h后在365 nm紫外下可见蓝绿色荧光，与16S rDNA序列联用，可在72 h内完成“功能—种属”双重鉴定。质量控制上，BGA培养基需用去离子水配制，高压灭菌后若出现轻微沉淀，为镁—磷复合物，50℃水浴摇匀即可；储存过程若液体变黄，提示淀粉水解过度，应废弃。霍氏肠杆菌触酶试验阴性，分解甘露醇，不分解阿拉伯糖，胆汁七叶苷试验阳性，在含6.5% NaCl的肉汤中生长。纤细糖霉菌

土地鞘氨醇盒菌在降解多种有机污染物方面展现出明显的潜力。抑制暗棕色杆菌

枯草芽孢杆菌斯氏亚种（Bacillus subtilis subsp. spizizenii）是“枯草家族”里的轻骑兵，菌体纤细，却藏着一套“攻防兼备”的微生物 toolkit。1930 年代被 Spizizen 从沙漠尘土中分离，因而得名。它更擅在 35–45 ℃、低湿度的热旱边际快速萌发，芽孢外壁含特殊吡啶二羧酸钙层，可耐 90 ℃热水 20 min、紫外 5000 μW·s/cm² 仍存活，为制剂长途运输省下冷链成本。复苏后，斯氏亚种先分泌高活性 surfactin、fengycin 与 bacillomycin D，三脂肽协同击穿病原菌膜，对番茄青枯、辣椒疫霉、小麦纹枯的抑菌带宽达 28–32 mm；同时释放挥发性 2,3-丁二醇，启动植物 ISR 信号，使叶片过氧化物酶活性提高 1.8 倍，达到“未病先防”。田间试验中，每亩用 100 g 斯氏亚种可湿粉拌种，玉米出苗率提升 12%，后期纹枯病指降 46%，产量增 8.3%；若与滴灌同施，可使连作草莓根际尖孢镰刀菌数量下降 70%，果实可溶性糖提高 1.2 度，货架期延长 3 天。更妙的是，它能合成耐碱 α-淀粉酶与β-葡聚糖酶，在 pH 9.5、温度 50 ℃ 条件下仍保持 80% 酶活，用于青贮饲料可提前 2 天完成乳酸发酵，降低干物质损耗 3%。目前，工厂采用糖蜜—豆粕深部好氧发酵，48 h 芽孢量可达 5×10¹⁰ CFU/mL，喷雾干燥后存活率 > 95%，制成黑衣粉剂，保质期 24 个月。抑制暗棕色杆菌