河北宿主细胞残留DNA检测常用知识

重组蛋白、抗体、疫苗、细胞与基因类生物制品，大多源自细菌、酵母、动物或人源细胞等生物工程细胞构成的复杂表达/生产系统。不同宿主对应的rHCD与rHCR存在差异，且二者具有不同片段长度与组成的复杂阵列，其风险需结合具体情况开展评估。各国药品监管机构对终产品中宿主细胞残留DNA的含量实施严格限度管控，多数要求不超过10ng/剂，部分标准甚至更低。湖州申科生物自主研发了一系列宿主细胞残留DNA荧光探针qPCR定量检测试剂盒，同时提供特定细胞系定制化试剂盒的开发、生产与测试服务，能够满足不同宿主的检测需求。编辑分享继续润色这段文字，使其更简洁还有哪些方法可以降低生物制品中宿主细胞残留DNA的风险？宿主细胞残留DNA的检测对于生物制品的质量控制有多重要？

宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒（磁珠法）机装版，适用于生物制品样品的前处理环节，能稳定高效获取样品中的微量宿主细胞DNA。该试剂盒可在细胞裂解液、澄清上清、纯化中间品等多种复杂基质缓冲液中，实现DNA的稳定提取与高回收率，且适配多种基质缓冲溶液，可有效提取纯化微量DNA。此外，该试剂盒能与各类SHENTEK^®宿主细胞（包括CHO、大肠杆菌E.coli、Vero、酵母、NS0、Human、MDCK、Sf9&AcNPV、Hi5&AcNPV、质粒、SV40LTA&EIA等）DNAqPCR检测试剂盒搭配使用。

SHENTEK^® 质粒 DNA 残留检测试剂盒，可定量检测基因治疗产品（如 CAR-T 细胞中慢病毒载体制备相关的质粒 DNA）中的质粒 DNA 残留。该试剂盒依托 Taqman 探针原理，针对 ColE1/pMB1/pBR322/pUC 来源复制子等各质粒共有 DNA 序列，实现对样品中质粒 DNA 残留的定量检测。客户可提前将质粒 DNA 序列提供给湖州申科生物技术人员进行确认。试剂盒检测速度快、专一性强、性能可靠，检测限可达到 10² copies/μL，且内配套提供质粒 DNA 定量参考品。该试剂盒与 SHENTEK^® 宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒搭配使用，能够准确定量样品中残留的微量质粒 DNA。

SHENTEK^® CV-1 残留 DNA 检测试剂盒（PCR - 荧光探针法）适用于定量检测各类生物制品中间品、半成品及成品中 CV-1 宿主细胞的 DNA 残留。该试剂盒基于荧光探针技术原理，实现对样品中 CV-1 残留 DNA 的定量分析，具有检测快速、专一性突出、性能稳定且结果可靠的特点，检测限可达到 fg 级别。试剂盒配备 CV-1 DNA 定量参考品，且需与 SHENTEK^® 宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒联合使用，以实现对样品中 CV-1 残留 DNA 的准确定量。整个分析系统通过优化前处理与检测步骤的兼容性，有效提升了对 CV-1 细胞微量 DNA 残留的回收率和定量准确度。

美国食品药品监督管理局（FDA）提示，采用 HEK293T 细胞生产病毒载体时，因该细胞中存在 SV40 T 抗原，还需额外检测残留的腺病毒 E1（E1A 与 E1B）及 SV40 T 抗原序列。《中国药典》中关于生物制品宿主残留核酸的质量控制要求，以及 CDE 发布的《细胞 *** 产品申请临床试验药学研究和申报资料的考虑要点》里涉及质粒与病毒载体的质量标准也明确：若采用 HEK293 细胞进行病毒载体生产，需开展宿主细胞残留 DNA 检测，同时还需检测 RNA 残留、SV40 大 T 抗原 DNA 残留，以及 E1A 和 E1B 基因的 DNA 残留。

SHENTEK^®CV-1残留DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法），可对各类生物制品的中间品、半成品及成品中CV-1宿主细胞DNA进行定量检测。该试剂盒基于荧光探针法原理，实现对样品中CV-1残留DNA的定量分析，具备检测快速、专一性强、性能稳定可靠的特点，检测限可达到fg级别。试剂盒内配套有CV-1 DNA定量参考品，且与SHENTEK^®宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒搭配使用，可准确定量样品中的CV-1残留DNA。整个分析系统通过优化前处理与检测步骤的兼容性，能有效提升对CV-1细胞微量DNA残留的回收率及定量准确度。