上海免疫细胞产品支原体检测使用性验证

长期以来，支原体检测主要依赖培养法和指示细胞法，且法规通常要求两种方法同时使用，但这两类方法存在明显短板——培养法检测周期长达 28 天，指示细胞法也需较长时间等待结果。随着细胞疗法药物快速发展，其上市周期短、货架期有限的特点，使得传统方法难以满足药物放行的时效要求。核酸扩增技术（NAT）尤其是荧光探针 qPCR 检测方法的出现，凭借检测速度快、特异性强的优势，成为支原体检测的理想替代方案。作为替代方法，NAT 检测需通过严格验证以达到法规要求的灵敏度：检测限达到 10CFU/mL 可替代培养法，达到 100CFU/mL 可替代指示细胞培养法，从而实现快速且可靠的支原体筛查。

MycoSHENTEK^® 支原体 qPCR 检测试剂盒（2G）完全符合 EP 2.6.7 的全部验证要求，其检测灵敏度、特异性、耐用性均按药典标准完成完整性能验证，具备替代培养法和指示细胞培养法的合规资质。该试剂盒针对新型生物制品的检测痛点优化升级，经多种支原体菌株验证，灵敏度稳定达到 10 CFU/mL，满足法规对替代培养法的要求。同时，产品遵循 ISO13485 体系认证和 GMP-like 生产标准，可提供完整的验证报告、质检报告及菌株溯源文件，全程贴合各国药典监管要求，为企业合规检测提供坚实支撑。

菌株质量是支原体检测 NAT 方法验证合规的关键，GC/CFU 比（基因组拷贝数与菌落形成单位比值）是关键控制指标。支原体存在聚集特性，单一 CFU 可能对应多个菌体，且 DNA 复制与细胞分裂不同步，部分菌体无法形成菌落但会释放 DNA，导致 GC/CFU 比波动大（研究报道 0.1 CFU 对应 30-500 个基因组拷贝）。若使用高 GC/CFU 比菌株，会高估检测限、导致方法灵敏度不足，因此法规明确要求菌株 GC/CFU 比＜10。2024 年 EDQM 36.1 草案规定参考品 GC/CFU 比应小于 10，USP 77 征求意见稿要求表征菌株 GC/CFU 比、建立菌株库 CFU 与核酸拷贝数关系，JP G3-14-170 也对菌株质量提出明确要求，凸显合规菌株选择的重要性。

AdvSHENTEK外源因子全自动核酸检测分析系统以 “迷你 qPCR 实验室” 的创新形态，突破了传统支原体检测的场地限制。整套系统尺寸为 380mm×305mm×343mm，重量只有 14kg，体积小巧、易于部署，无需专门的 PCR 实验室，只需一间普通实验室即可满足检测需求，大幅降低了企业的场地投入成本。这与传统 NAT 法需严格划分试剂准备区、样本制备区、扩增区等多个功能区域的要求形成鲜明对比，尤其适合场地资源紧张的中小企业。同时，系统一体化设计减少了耗材搭配与损耗，自动化流程降低了人为操作失误导致的重复检测成本，从场地、人力、耗材多维度为企业实现降本增效，让支原体检测更具经济性。

此前，支原体检测依赖培养法和指示细胞培养法，这两种传统方法均被各国药典列为基础检测手段，但存在明显短板。培养法作为 “金标准”，需阳性活菌参照，每批次培养基需做灵敏度测试，完整合规检测周期长达 21-35 天；指示细胞培养法同样耗时 14-28 天，难以满足新型生物制品快速上市、短货架期的放行需求。更棘手的是，面对高蛋白等复杂样品基质，传统方法易受干扰或抑制，需额外增加传代培养步骤，导致检测时间再延长 2-3 周，严重影响生产效率，也难以适配新型生物制品的检测场景。

湖州申科围绕 USP 支原体培养法，提供技术服务，满足生物制剂企业的合规需求。服务内容包括两项：一是支原体培养法样品检测服务，严格遵循 USP 63 标准流程执行，确保检测结果合规有效；二是支原体培养法样品适用性验证服务，针对供试品特性开展定制化验证，保障检测方法与样品的适配性。所有检测与验证完成后，公司将出具标准化报告，报告可直接用于项目申报、审批、工艺优化等场景，为企业产品质量控制提供依据。通过专业的技术服务，帮助企业规避合规风险，确保生物制剂生产全流程的质量与安全性，助力企业高效推进产品研发与上市进程。