江苏非动物源内毒素检测低内毒素回收

细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁外膜释放的脂多糖（LPS）成分，具有极强的生物活性，微量即可引发人体发热、休克甚至多脏器功能衰竭。因此，在生物制品、医疗器械、制药用水等领域，细菌内毒素检测是保障产品安全性的关键质控环节。其检测原理基于内毒素与特定试剂的特异性反应：内毒素可活化鲎血变形细胞裂解物（LAL）中的凝血级联反应，通过C因子通路触发酶促反应，通过观察凝胶形成、浊度变化或显色强度实现定量或定性分析。目前，各国药典均将内毒素检测列为强制要求，以降低临床应用中的热原风险。

重组级联试剂作为内毒素检测鲎试剂的理想替代方案，其具备的优势有：①优化的G因子级联反应，无G因子旁路干扰。采用基因重组技术表达鲎血细胞中的C因子（Factor C）、B因子（Factor B）和凝固酶原（Proclotting enzyme），无G因子旁路干扰，排除1，3-β-D葡聚糖假阳性风险。②依然采用动态显色法原理，可沿用天然鲎试剂检测设备。重组级联试剂（rCR）,与天然鲎（动态显色法）具有相同的操作流程、检测设备、分析方法，用户可以沿用天然鲎的仪器、软件、耗材、人员培训、验收程序等，无需投入额外成本。③具有与天然鲎的相同反应机制，检测结果具有等效性。完全模拟了天然鲎试剂的酶联反应，由3种蛋白组成的级联反应机制提供了信号放大的过程，确保了检测的准确性和灵敏度。湖州申科按照药典要求进行替代方法验证，无缝衔接技术转移，助力用户从方法验证到工艺落地，从数据合规到全球申报。

低内毒素回收（LER）的主要形成机制之一是螯合剂与非离子表面活性剂的协同作用，直接影响内毒素检测结果。第一步，样品中的螯合剂（如柠檬酸盐）会去除二价阳离子（Mg²⁺、Ca²⁺），削弱 LPS 聚集体的盐桥结构，降低其刚性；第二步，表面活性剂（如吐温 20）嵌入 LPS 分子，形成混合聚集体（胶体、层状结构），改变 LPS 的超分子形态。LPS 从 “可检测态” 转为 “不可检测态”，导致鲎试剂中的 C 因子无法与内毒素结合，内毒素检测出现假阴性。这种变化是时间依赖的，与稀释度无关，给常规内毒素检测带来独特挑战。

SHENTEK®凝胶法鲎试剂凭借多维度优势，为细菌内毒素检测提供高效解决方案： 法规契合度上，严格遵循中国药典（ChP）、美国药典（USP）、欧洲药典（EP）及日本药典（JP）的统一标准，确保检测结果满足全球药品监管要求，为药品研发、生产及出口提供合规支撑； 抗干扰性能上，配套申科特异性抗增液，可针对性抑制特殊样品（如中药注射剂、生物制品）的非特异性反应，突破复杂基质对检测准确性的干扰，保障数据可靠； 性能适配性上，提供 0.03、0.06、0.125、0.25、0.5 EU/mL 多档灵敏度选项，覆盖从高灵敏到常规检测的多样化需求；操作易用性上，兼容恒温仪、水浴锅、恒温箱等基础设备，无需复杂仪器与软件，降低实验室硬件门槛，适配不同规模企业； 稳定性保障上，试剂采用冻干粉剂型，2~8℃ 储存条件下有效期长达 2 年，减少仓储与使用中的活性损耗，提升批次间一致性； 适用领域上，覆盖生物制品、血液制品、化学药品等全品类样本，从工艺监控到成品放行，全流程支撑药品安全质控。该试剂通过法规、性能、操作、稳定与适用的协同优化，构建起高效、灵活的内毒素检测体系，助力行业提升质量管控水平。

在內毒素检测的技术体系中，凝胶法与动态显色法基于不同原理与特性，形成互补应用格局。凝胶法依托鲎试剂与内毒素的凝集反应，实现定性或半定量检测，其灵敏度覆盖 0.03EU/ml、0.06EU/ml 等多梯度，60 分钟即可完成反应；检测结果依赖肉眼观察（180° 倒转判读凝胶形成），数据需手工记录，配套 内毒素凝胶法测定仪（恒温仪） 即可开展，虽自动化程度有限，但操作简洁，适用于生产环节的快速初筛。与之相比，动态显色法通过监测反应混合物吸光度或透光率的变化（如达预设检测值的反应时间、信号增速）实现 定量检测 ，灵敏度拓展至 5-0.005EU/ml ，60-90 分钟反应时长虽略长，却可借助酶标仪或全自动内毒素检测分析仪完成全流程自动化操作—软件实时采集数据，契合药品生产质量管理规范（GMP）对数据追溯与精度的要求。二者各有侧重：凝胶法以 “快速定性” 服务基础防控，动态显色法凭 “准确定量 + 自动化” 支撑严苛质控，共同为內毒素检测提供灵活适配的技术路径。

低内毒素回收（LER）与传统鲎试剂干扰（抑制 / 增强）在多维度存在差异，准确区分对优化内毒素检测至关重要。表现上，LER 是内毒素回收率＜50%，传统干扰是反应抑制或增强；成因上，LER 由螯合剂 + 表面活性剂协同或蛋白质电荷结合引发，传统干扰因 pH、β- 葡聚糖等导致；排除方式上，LER 时间依赖且无法稀释解决，传统干扰浓度依赖且可通过稀释缓解；确认方法上，LER 需通过保存时间研究（HTS），传统干扰按药典干扰实验评估。明确这些区别能帮助企业排查内毒素检测异常，避免误将 LER 当作普通干扰处理。