为了证明Genovis的PNGase F冻干和PNGase F固定在各种底物上的去糖基化能力，用PNGase F冻干或PNGase F固定化处理了一系列糖蛋白。使用天然反应条件在一小时内有效去除曲妥珠单抗和依那西普上的所有N-糖，以及西妥昔单抗上的Fc-糖。当加入RapiGest™并在变性条件下进行反应时，西妥昔单抗的所有N-聚糖（包括Fab-聚糖）在PNGase F固定化10分钟内完全去除，PNGase F固定化15分钟内完全去除。在变性反应条件下，PNGase F 在 30 分钟内成功将更复杂的 F 融合蛋白阿巴西普和阿柏西普去糖基化。使用变性和还原反应条件，将常用的糖蛋白标准品RNase B在10或15分钟内完全去糖基化，分别使用PNGase F冻干或PNGase F固定化。在天然和变性条件下生成的去糖基化样品与LC-MS分析兼容。使用OpeRATOR图谱O-聚糖位点对依那西普进行LC-MS分析。四川高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究
genovis的FucosEXO在生理缓冲液和中性pH值中具有活性，使其与大多数样品相容。此外，FucosEXO活性不依赖于任何可能影响LC-MS分析的辅因子，如BSA。根据底物的性质，FucosEXO 可在 1 至 2 小时内水解糖蛋白上的末端 α1-2,3,4 连接的岩藻糖残基，而对于非常复杂的样品可能需要更长的孵育时间。FucoseEXO也可固定在离心柱中，可快速方便地处理高达0.5mg的糖蛋白。使用离心柱形式，将糖蛋白样品与固定化的FucosEXO树脂一起孵育，然后在离心步骤中轻松收集消化的糖蛋白。江苏瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶蛋白质组学研究亲和纯化微离心柱，SialEXO 冻干 200 单位，OpeRATOR 冻干 200 单位。
Genovis的OglyZOR 是一种内切糖苷酶（O-糖苷酶），可特异性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖。OglyZOR 用于去除 O-糖，用于糖分析、确认 O-糖的存在和降低样品的异质性。Genovis的OglyZOR 是一种内切糖苷酶（内切-α-N-乙酰半乳糖氨酸酶），可催化来自天然糖蛋白的he心 1 和有限程度的he心 3 O-聚糖的水解。 OglyZOR酶活性需要去除唾液酸，因此，由唾液酸酶混合物组成的唾液酸冻干，用于去除α2-3，α2-6和α2-8连接的唾液酸，与OglyZOR一起提供。在pH 6.5至7.5和37°C下获得良好活性。
Genovis的SialEXO固定化用于复杂糖蛋白的去唾液酸化：在设置反应条件时，需要在所需的反应时间和完成反应所需的酶量之间进行权衡。较高的酶量可保证在更短的时间内完成周转，但会使下游分析复杂化。为了避免此类问题，我们以离心柱形式固定了活性SialEXO。这允许以更短的孵育时间孵育具有明显更高量的唾液酸酶的糖蛋白底物。Genovis测试了 SialEXO 冻干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制剂上的性能。这种糖蛋白是一种具有挑战性的底物，具有 6 个 N- 和多达 26 个 O-聚糖，由 α2,3 和 α2,6 连接的唾液酸修饰。对游离的N-聚糖的分析表明，SialEXO在溶液中完全脱唾液酸化，SialEXO固定化。O-糖基化蛋白和肽的特异性富集：包括抑制病原体引起的gan染、炎症反应、造血和细胞信号传导。
Genovis的GlycOCATCH®是一种亲和树脂，可特异性结合O-糖基化（粘蛋白型）蛋白和肽，从而实现简单的工作流程，以富集和纯化携带O-聚糖的蛋白质和肽。洗涤离心柱，并用8M尿素洗脱结合的蛋白质。对洗脱材料的分析表明，由于洗脱O-糖基化蛋白，并且树脂与非糖基化蛋白和N-糖基化蛋白的结合可以忽略不计。选择性结合 O-糖蛋白：为了测试选择性，将一系列 O-糖基化、N-糖基化和非糖基化蛋白与Genovis的GlycOCATCH 一起孵育。为了在肽水平上研究Genvois的GlycOCATCH的O-糖特异性，将O-glcyosyled肽（糖蛋白）与一系列未修饰的肽混合。SialEXO、FabRICATOR消化去糖基化蛋白，通过中级质谱测定完整质量数。四川高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究
FucosEXO 可在 1 至 2 小时内水解糖蛋白上的末端 α1-2,3,4 。四川高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究
Fc N-聚糖在抗体的效应功能中起着至关重要的作用，但可能会增加蛋白质表征测定的复杂性。在天然条件下用PNGase F去除Fc N-糖可以表征游离N-糖以及去糖基化抗体的功能和结构。 为了证明PNGase F固定化和PNGase F冻干在天然反应条件下有效去除Fc N-聚糖，对zhiliao性抗体曲妥珠单抗进行了处理。图2中的质量数偏移表明，在37°C下用Genovis的PNGase F冻干或PNGase F固定化孵育1小时后，曲妥珠单抗上的Fc N-聚糖成功去除，与在溶液中用PNGase F冻干处理的样品相比，没有酶干扰用PNGase F固定处理的样品的分析。四川高活性/无非特异酶活PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究
Genovis的PNGase F 是一种糖酰胺酶，可水解多肽天冬酰胺与所有哺乳动物天冬酰胺连接复合物...
【详情】GlycOCATCH®亲和纯化：用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽亲和纯化的富集树脂。GlycOCATCH亲...
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【详情】为了证明Genovis的PNGase F冻干和PNGase F固定在各种底物上的去糖基化能力，用PN...
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【详情】Genovis的SialEXO产品是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶。这些酶对天然糖蛋白或游离的聚糖结...
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【详情】C1抑制剂的去糖基化：在O-糖基化生物制药的生产过程中，由于he心GalNAc残基的加工不完全，可能...
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