二代测序——甲基化的作用和检测方法有哪些?
作用
基因表达调控:DNA 甲基化通常与基因沉默有关。例如,在**发生过程中,某些抑*基因的启动子区域(调控基因转录起始的 DNA 序列)可能会发生高甲基化,导致这些基因无法正常表达,从而失去对肿瘤细胞生长的抑制作用。
发育调控:在胚胎发育过程中,DNA 甲基化模式的动态变化对于细胞分化和组织***形成至关重要。不同的细胞类型具有特定的 DNA 甲基化图谱,这些图谱引导细胞向特定的方向分化。
检测方法
亚硫酸盐测序法:这是一种能够精确检测 DNA 甲基化状态的方法。其原理是利用亚硫酸盐处理 DNA,未甲基化的胞嘧啶会被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则保持不变。经过 PCR 扩增和测序后,可以区分甲基化和未甲基化的位点。 单细胞测序也是二代测序。贵州哪里有二代测序应用
二代测序——RNA甲基化的概念、作用和检测方法
RNA 甲基化概念及位置:RNA 甲基化是在 RNA 分子上添加甲基基团,其中 N6 - 甲基腺苷(m6A)是最常见的一种 RNA 甲基化修饰形式,它主要发生在 mRNA(信使 RNA)的腺嘌呤(A)残基上。
作用
1、影响 RNA 的稳定性:m6A 修饰可以影响 mRNA 的稳定性。例如,一些带有 m6A 修饰的 mRNA 更容易被降解,从而调控基因表达的时间和水平。2、调节 RNA 的剪接和翻译:m6A 修饰还能够调节 mRNA 的剪接过程,影响不同转录本的生成。同时,它也可以在翻译水平上发挥作用,影响蛋白质合成的效率。
检测方法
甲基化 RNA 免疫沉淀测序(MeRIP - Seq):这种方法主要是利用特异性识别 m6A 修饰的抗体,对 RNA 进行免疫沉淀富集,然后通过高通量测序来鉴定 m6A 修饰的位点和水平。 苏州二代测序原理RNA测序也是二代测序。
二代测序——转录组测序的应用领域
1、基础生物学研究:可以用于研究生物的发育过程。例如,在胚胎发育过程中,通过转录组测序可以了解不同阶段胚胎细胞中基因的表达变化,揭示胚胎发育的分子机制。还可以用于物种进化研究,比较不同物种间转录组的差异,推断基因表达的进化模式。
2、医学研究和临床诊断:在疾病研究方面,用于寻找疾病相关的生物标志物。例如,在**研究中,通过对比**组织和正常组织的转录组,可以发现一些在**中特异性高表达或低表达的基因,这些基因有望成为**诊断、预后判断的标志物。同时,也可以用于药物研发,通过转录组测序了解药物作用后细胞基因表达的变化,评估药物疗效和毒性。
3、农业和植物学研究:在作物育种中,可以研究不同品种作物在抗逆性(如抗旱、抗寒、抗病)等方面的基因表达差异,为培育优良品种提供理论依据。在植物生长发育研究中,分析植物在不同生长环境和生长阶段的转录组变化,了解植物***等因素对植物生长的调控机制。
①二代测序一般多久出结果?
二代测序(Next-GenerationSequencing,NGS)出结果的时间会受到多种因素的影响,一般在数天到数周不等。
1、样本类型和质量
不同的样本类型处理时间不同。例如,血液样本相对容易处理,提取DNA的过程比较常规。如果是组织样本,可能需要先进行样本的解离等复杂操作。如果样本质量高,DNA提取和文库构建等前期工作会比较顺利,能加快整体进程。但如果样本量少或者DNA有降解等质量问题,可能需要重新提取样本或者进行DNA修复等操作,这会**延长时间。例如,对于新鲜血液样本,DNA提取可能在1-2天内完成;而对于一些福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织样本,可能需要3-5天来完成高质量DNA的提取和后续的优化处理。
二代测序产出的数据量有多少?
二代测序——技术原理类问题
二代测序与一代测序的区别是什么:一代测序技术如Sanger测序,一次只能读取一条DNA序列,通量低、速度慢、成本高,但准确性高,适用于对少量基因片段的精确测序。而二代测序技术具有高通量、速度快、成本低等优点,可以同时对大量DNA分子进行测序,但在单个碱基的准确性上稍低于一代测序,二者在不同的应用场景中各有优势。二代测序有哪些主要的测序原理:主要包括边合成边测序和连接法测序。边合成边测序是在DNA聚合酶的作用下,逐个添加带有荧光标记的dNTP,通过检测释放的荧光信号来确定碱基序列;连接法测序则是利用DNA连接酶将寡核苷酸探针连接到模板DNA上,根据连接的探针序列来推断模板DNA的碱基组成。 二代测序广泛应用于医学研发。浙江二代测序
二代测序常用于产前的检测或诊断。贵州哪里有二代测序应用
二代测序技术的一些***研究进展①
疾病诊断与***领域 :消化系统**标志物检测:2024 年的**共识指出,二代测序(NGS)技术可同时检测消化系统**中的多种标志物,如错配修复基因变异、微卫星不稳定性(MSI)状态、**突变负荷(TMB)等,为**的精细***提供了更***、准确的信息。例如,MSI-H 的实体瘤患者可使用帕博利珠单抗进行***,而 NGS 技术能更好地检测 MSI 状态及相关耐药机制。
**液体活检:通过检测血液中的循环** DNA(ctDNA)等标志物,实现对**的早期筛查、诊断和***监测。NGS 技术能够更敏感地检测到 ctDNA 中的基因突变和变异,为**的无创诊断提供了有力支持。
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