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泛素化是通过三个酶促步骤实现的。在ATP依赖的过程中,泛素酶(E1)催化与泛素形成活性硫酯键,然后转移到泛素载体蛋白的活性位点半胱氨酸(E2)。泛素级联对特定底物蛋白的选择性依赖于E2结合酶(细胞中包含的相对较少)和泛素-蛋白连接酶(E3)之间的相互作用,迄今为止已经鉴定出600多种这种酶。E3s是一个大的,多样化的蛋白质组,其特征是几个确定的基序之一。这些包括HECT(与e6相关蛋白c端同源),RING(真正有趣的新基因)或U-box(没有Zn2+结合配体的完整补充的修饰的RING基序)结构域。而HECTE3s在泛素化过程中具有直接的催化作用,RING和U-boxE3s促进蛋白质泛素化。后两种E3类型充当适配器类分子。它们使E2和底物足够接近,从而促进底物的泛素化。虽然许多RING-typee3,如MDM2和c-Cbl,可以单独发挥作用,但其他一些是作为更大的多蛋白复合体的组成部分,如后期促进复合体。综上所述,这些多面的特性和相互作用使E3s能够利用泛素-蛋白酶体系统,在真核生物的所有细胞中提供一种强大而具体的蛋白质机制。该筛选了11种常用E2结合酶,可以筛选具有E3连接酶活性的蛋白所匹配的E2酶.全长跨膜蛋白A2AR,也就是腺苷受体A2aR(ADORA2A),是一种七次跨膜蛋白,属于G蛋白偶联受体。Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag

Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag,标准物质

胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可特异切割赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组胰蛋白酶多用大肠杆菌或酵母系统重组表达并经过多步层析纯化获得,无糜蛋白酶等杂酶污染。重组胰蛋白酶与天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列与猪源胰蛋白酶序列同源。因其无动物源污染性和纯度高,在医药开发、生化研究、蛋白组学等领域中有着广泛的应用。翌圣目前可提供2款重组胰蛋白酶,分别为药典级(Cat#40512ES)、质谱级(Cat#20416ES)药典级:大肠杆菌表达的重组胰蛋白酶,氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致,生产过程不使用任何动物源原料,无外源性的病毒污染,可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:细胞培养、细胞发酵、蛋白质的酶解或各种组织的细胞分离等。本产品纯度高、不含杂酶、宿主蛋白和DNA残留量符合药典标准,避免了杂质对细胞生长的影响,pH为7.0-9.0,稳定pH为2±0.5。质谱级:毕赤酵母表达的重组猪胰蛋白酶,在GMP法规下生产,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,天然缺乏糜蛋白酶活性,并已过滤除菌。Recombinant Human VCC-1/CXCL17使用全长A2AR蛋白进行药物筛选:全长A2AR蛋白可以用于ELISA、SPR亲和分析,以筛选和优化潜在的A2AR调节剂。

Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag,标准物质

利用PCR技术扩增得到编码土豆羧肽酶抑制剂(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表达载体pGEX一4T一1的多克隆位点中,得到重组质粒pGCPI,测序后将重组质粒转化到受体茵EscherichiacoliBL21中。重组茵经IPTG诱导表达,超声波破茵后,通过谷胱甘肽sepheroseFF亲和层析柱一步纯化得到融合蛋白,纯度大于97%。融合蛋白经凝血酶切割并分离除去谷胱甘肽一S一转移酶后得到纯度大于98%的重组CPI,ELISA鉴定产物具有免疫原性,体外检测表明其促进纤溶的生物功能与天然CPI无明显差异。

重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃时可达活性,但在pH6.0-8.5和温度4-30℃范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。产品性质来源(Source)大肠杆菌外观(Appearance)无色透明液体比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定义(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反应1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。纯化(Purification)Ni柱亲和纯化纯度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)产品组分运输与保存方法冰袋运输。全长跨膜蛋白CB1,即受体1(Cannabinoid Receptor 1),是一种G蛋白偶联受体(GPCR)。

Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag,标准物质

RecombinantHumanACE2/ACEHProtein,hFcTag性能参数,分子别名(Synonyms)ACE2;ACEH;ACE-2表达区间及表达系统(Source)HumanACE2/ACEHProteinisexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsGln18-Ser740.[Accession|Q9BYF1-1]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof109.2kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto115-130kDabasedonSDS-PAGEresult.Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedSARS-COV-2SpikeS(B.1.1.529/Omicron)Trimer,HisTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforHumanACE2,hFcTagwiththeEC50of13.7ng/mldeterminedbyELISA.制剂(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重构方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.由于其在细胞信号传递中的重要性,A2aR成为了药物开发的重要靶点之一。Recombinant Human SFRP1/SARP2 Protein,His Tag

在蛋白质工程中,PNGase F可以用于改变蛋白质的糖基化模式,以研究糖基化对蛋白质功能的影响。Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag

抑肽酶(Aprotinin),又称为抑蛋白酶肽,是一种竞争性、可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可与丝氨酸蛋白酶形成稳定复合物并阻断酶的活性位点,这种结合是可逆的,大多数的抑肽酶-蛋白酶复合物在极端的pH<3.0的条件下解除结合。抑肽酶抑制糜蛋白酶、胰蛋白酶、激肽释放酶和血纤维蛋白溶酶,不能抑制Xa因子和凝血酶。从结构上来说,抑肽酶是一种来自牛肺的单体球状蛋白,由58个氨基酸组成并排列在具有三个交联二硫键的单个多肽链中。重组抑肽酶采用大肠杆菌表达,在GMP法规下生产,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,氨基酸序列与来源于牛肺的抑肽酶完全一致,具有与动物源性抑肽酶相同的酶学性质,可替代动物源性抑肽酶用于各种生物技术过程中,如:重组蛋白生产中抑制丝氨酸蛋白酶的活性;细胞培养等。Recombinant Biotinylated Human TSLP Protein,His-Avi Tag

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