抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。透明质酸由D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的双糖单位构成,分子量可以从数千到数千万道尔顿不等。Recombinant Canine S100B Protein,hFc Tag

RecombinantBiotinylatedHumanHLA-A*03:01&B2M&KRASG12V(VVGAVGVGK)MonomerProtein,His-AviTag性能参数分子别名(Synonyms)MHC;KRAS;K-Ras2;KRAS2;C-K-RAS;CFC2;K-RAS2A;K-RAS2B;K-RAS4A;K-RAS4B;KRAS1;KRAS2;NS;NS3;RASK2;GTPaseKras;KI-RAS;RALD表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedHumanHLA-A*03:01&B2M&KRASG12V(VVGAVGVGK)MonomerProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-TerminusItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*03:01),Ile21-Met119(B2M)andVVGAVGVGKpeptide.[Accession|NP_002107.3(HLA-A*03:01)&P61769(B2M)&VVGAVGVGK]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.09kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto51-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制剂(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Recombinant Human RETN Protein,hFc TagFGF-18与FGF R2C,FGF R3C以及高尔基蛋白GLG1结合,并诱导星形胶质细胞和小胶质细胞。

重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃时可达活性,但在pH6.0-8.5和温度4-30℃范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。产品性质来源(Source)大肠杆菌外观(Appearance)无色透明液体比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定义(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反应1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。纯化(Purification)Ni柱亲和纯化纯度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)产品组分运输与保存方法冰袋运输。
RecombinantBiotinylatedHumanAFP(HLA-A*02:03)Protein,His-AviTag性能参数表达区间及表达系统(Source)RecombinantBiotinylatedHumanAFP(HLA-A*02:03)ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminal..ItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:03),Ile21-Met119(B2M)andFMNKFIYEIpeptide.[Accession|AAA03604.1(HLA-A*02:03)&P61769(B2M)&FMNKFIYEI]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.70kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto53-60kDabasedonTris-BisPAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedby>95%asdeterminedbyHPLC制剂(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重构方法(Reconstitution)Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.Kex2不能识别和切割单一碱性氨基酸即精氨酸或赖氨酸的羧基端肽键。

IdeSProtease全称免疫球蛋白G降解酶(ImmunoglubulinG-degradingenzymeofStreptococcuspyogenes,IdeS),是由人类致病菌酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性,能识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可识别人源和其他多种动物来源的IgG,比如人、兔、猴、绵羊以及人动物嵌合IgG等。IdeS具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征抗体、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。产品信息规格2000U/5000U产品性质中文别名(Chinesesynonym)免疫球蛋白G降解酶英文别名(Englishsynonym)IdeSProtease来源(Source)大肠杆菌表达标签(label)N-terminalHisTag纯度(Purity)经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度>95%分子量(Molecularweight)35.3kDa缓冲液组分(Buffer)50mM磷酸钠,150mMNaCl(pH6.6),50%glycerolIdeS Protease全称免疫球蛋白G降解酶是由人类致病菌酿脓链球菌产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。Recombinant Mouse BRAK/CXCL14
重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,保持天然TEV酶的功能活性。Recombinant Canine S100B Protein,hFc Tag
RecombinantBiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProtein,hFc-AviTag分子别名(Synonyms)Mesothelin;CAK1;MSLN;MPFSMRP表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProteinisexpressedfromHEK293withhFctagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsGlu296-Gly580.[Accession|Q13421-2]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto70-80kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedAnti-MSLNAntibody,hFcTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanMSLN,hFcTagwiththeEC50of18.4ng/mldeterminedbyELISA.Recombinant Canine S100B Protein,hFc Tag
Ultra-LongMasterMix(2×)(WithoutDye)是一种专为长片段PCR扩增设计的即用型预混液,广应用于基因组学、分子生物学以及复杂模板的扩增研究中。该预混液结合了经过配体修饰的热稳定TaqDNA聚合酶和优化的反应缓冲体系,能够高效扩增长达25kb的基因组片段。产品特点Ultra-LongMasterMix(2×)(WithoutDye)的重要优势在于其长片段扩增能力。该预混液融合了3-5校正活性因子,能够提高扩增产物的准确性和特异性。此外,预混液中已包含dNTP和Mg²⁺,使用时只需加入模板和引物即可进行反应,极大地简化了实验操作流程。该预混液还添加了保护剂,使其在反复冻...