超滤（UF）常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响，这种方法主要还是以分子大小为**基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa（MW）的分子，盐和水等小分子会透过，因此在大分子样品处理中得到了应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品***小于膜孔径，则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径，膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和，没有发生容易导致生物大分子失活的相变，而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的应用不限于蛋白样品的操作，也常用于核酸样品制备，包括分子克隆和质粒纯化。DNA和RNA样品起始浓度低至5ng/mL也可以被高效地在数分钟内被浓缩，回收率达到99%以上。超滤浓缩管直销公司。虹口区默克0.5ml超滤浓缩管代理价格
首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因： 1）如果目的样本在滤过液中，那么请排查： a）是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？ b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。 c）离心机**近是否有校准过？ d）是否***尝试这个蛋白？虹口区默克0.5ml超滤浓缩管代理价格上海超滤浓缩管代理销售电话多少？
7次低速离心，总耗时~100分钟（含60分钟孵育时间） 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（可选用50k MWCO型号）。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。 7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。 8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min，置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。
离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”，操作时样品首先被浓缩，继而加入新的溶液，再次浓缩时，原溶液已经被换成选定的溶液。 化学相容性与溶出 样品的化学背景有时很多样而复杂，过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质，但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括：• 标称分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）• 截留 • 浓差极化 • 通量超滤浓缩管的优势您了解多少呢？
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用上一分子量级别的超滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。 2）如果目的样本也不在滤过液中，那么： a）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？ c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。超滤浓缩管哪家比较靠谱？徐汇区默克4ml超滤浓缩管代理价
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加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。 4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。 5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。 6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。 * 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。虹口区默克0.5ml超滤浓缩管代理价格
