首先,Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次,如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的样本在滤过液中,那么请排查: a)是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是rpm,请换算成相应的g离心力,具体换算方法请垂询。 c)离心机**近是否有校准过? d)是否***尝试这个蛋白?上海超滤浓缩管销售公司电话多少?奉贤区Merck超滤浓缩管咨询问价
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。 7. 4,000×g离心15 min。 8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 用Protein A或G对抗体进行亲和纯化静安区默克超滤浓缩管哪家优惠你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?
外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上(以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰),请参考默克磁珠操作说明书。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推荐使用试剂目录号信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准,相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心,用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题,真是惠而不费,不亦乐乎?
默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计,一经推出即成为生物样品操作的行业头牌产品。不论是蛋白、核酸、病-毒-或颗粒物,抑或低浓度样品或宝贵的活性样品,Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻松。 这款Amicon Ultra 15 mL离心式过滤器借助10 kDa NMWL的滤膜可以进行蛋白浓缩。Amicon Ultra离心式过滤器是蛋白纯化、蛋白浓缩和脱盐的理想工具。 Amicon® Ultra 超滤管的独特优点: 有效浓缩同时保证高的蛋白回收率 1.合理的死体积设计 2.避免样品离干而降低回收率 3.便于估计和控制样品浓缩倍数 4.重复性好,便于样品数据相互比较根据您的具体需求选择不同的超滤浓缩管设计。
将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。 3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。 4. 4,000×g离心15 min。 5. 优化选做:将样品在室温下多孵育30 min。 6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。 8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 特点与优点: 特别的反转离心回收设计,滞留体积很小,样品损失少, 样品回收率通常>90% 浓缩倍数达到50-200倍 Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低 特别设计的死体积防止离干,保证样品回收率和活性 上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好?奉贤区Merck超滤浓缩管咨询问价
超滤浓缩管的优点有很多。奉贤区Merck超滤浓缩管咨询问价
这种小管适合在1.5mL离心机中使用,其Ultracel®超滤膜对于蛋白及其它成分都表现出 极低的非特异性结合,连同医药级O型圈封闭设计,确保更少的样品丢失,更稳定的数据结果。诸多考虑周到的精细设计使Microcon®成为比较好用的样品制备工具之一。 特点与优点: 低吸附膜和反转回收设计,即使是小体积、低浓度样品得率也能达到95%以上 可以用产品自带的1.5mL样品收集管存储滤过液和浓缩产物 浓缩倍数可达100X 操作简便快捷,易于标准化。 Microcon® DNA Fast Flow 超滤管 专门设计用于从含有SDS的溶液中浓缩和回收基因组DNA。管子和膜均为低非特异性吸附的材质,医用级O型圈密封,保证了在洗涤步骤中样品丢失**少。反转回收设计,即使样品量很小也能获得理想的得率,浓缩倍数可以达到20X。奉贤区Merck超滤浓缩管咨询问价