编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律，测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面，利用荧光分光光度计时，使用荧光强度。在低浓度时，荧光强度与浓度成正比，所以，可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果，对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较，下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中，调配～5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示，根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中，用～5ug/ml的6点和空白样品（蒸馏水）创建，得到了线性度良好的标准曲线（相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中，噪声的影响相对较大，导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。在使用紫外可见分光光度计测试过程中可能出现噪音较大的情况，可能是其光源灯泡使用时间超过寿命期。福建国产分光光度计推荐
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以免影响光效率。5、WFZ800-DA、756型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。6、放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。7、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下：分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色杯；220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色杯：700nm处装蒸馏水，将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。典型故障及其排除方法1、仪器不能调零。可能原因：a.光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。b.透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。c.仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥。
由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。2、透射比（吸光度）准确度很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。3、杂散光杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。使用与维护1、若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。2、指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。3、比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯。使用分光光度计前要调零。
分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度*常用的工具之一。仪器使用频繁，但甚少见到有人维护。其实，保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。仪器注意事项1．该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。2．使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。3．在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。分光光度计的关键参数有哪些选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的*关键的指标有三点：一是波长范围，二是波长准确度，三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定，波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低，表示性能越好。影响显色反应的主要因素（1）显色剂用量：通过实验来确定*适用量；（2）反应液的酸碱度（pH）溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性；。紫外可见分光光度计灵敏度高、选择性好、准确度高、适用浓度范围广、分析成本低、操作简便、快速。中国香港可见分光分光光度计原理
双光束分光光度计的两束光同时通过参比溶液和样品溶液，因此能够自动消除光源强度变化所引起的误差。福建国产分光光度计推荐
杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。福建国产分光光度计推荐
上海元析仪器有限公司总部位于南乐路1276弄115号9幢6楼，是一家公司现阶段的主要产品是紫外可见分光光度计、微波消解仪、TOC分析仪和原子吸收分光光度计。 产品可细分为: V-5可见系列、 UV-5系列定量分析型、 UV-6系列大屏幕扫描型、 UV-8/9系列大屏幕扫描型双光束紫外可见光度计。 MWD-800/850型高通量密闭式智能微波消解仪、MWD-700/650型密闭式智能微波消解仪/mwd-630/TRUMP系列微波消解仪、MWD-600/520/500型密闭式智能微波消解仪。 TOC-2000总有机碳分析仪、TOC-3000总有机碳分析仪、 TOC-1500/1700(在线型) 总有机碳分析仪。 AA-3300/3600/3800系列原子吸收分光光度计，涵盖火焰型、石墨炉型和火焰石墨炉一体型。的公司。公司自创立以来，投身于分光光度计，总有机碳分析仪，微波消解仪，原子吸收分光光度计，是仪器仪表的主力军。上海元析仪器始终以本分踏实的精神和必胜的信念，影响并带动团队取得成功。上海元析仪器创始人钱莹莹，始终关注客户，创新科技，竭诚为客户提供良好的服务。
