编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律,测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面,利用荧光分光光度计时,使用荧光强度。在低浓度时,荧光强度与浓度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果,对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较,下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中,调配~5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示,根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中,用~5ug/ml的6点和空白样品(蒸馏水)创建,得到了线性度良好的标准曲线(相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中,噪声的影响相对较大,导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。寻找光度计的优良代理厂家。辽宁光谱仪光度计型号
紫外可见分光光度计有着较长的历史,其主要理论框架早已建立,制作技术相对成熟。目前,紫外可见分光光度计在追求准确、快速、可靠的同时,小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代紫外可见分光光度计新的增长点。紫外可见分光光度计的发展历史分光光度法始于牛顿。早在1665年牛顿做了一个实验:他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔,在室内形成很细的太阳光束,该光束经棱镜色散后,在墙壁上呈现红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带。这色带就称为“光谱”。1815年夫琅和费仔细观察了太阳光谱,发现太阳光谱中有600多条暗线,并且对主要的8条暗线标以A、B、C、D…H的符号。这就是人们Z早知道的吸收光谱线,被称为“夫琅和费线”。但当时对这些线还不能作出正确的解释。1859年本生和基尔霍夫发现由食盐发出的黄色谱线的波长和“夫琅和费线”中的D线波长完全一致,才知一种物质所发射的光波长(或频率),与它所能吸收的波长(或频率)是一致的。1862年密勒应用石英摄谱仪测定了一百多种物质的紫外吸收光谱。他把光谱图表从可见区扩展到了紫外区,并指出:吸收光谱不仅与组成物质的基团质有关。接着,哈托莱和贝利等人,又研究了各种溶液对不同波段的截止波长。西藏光度计使用上海光度计批发多少钱?
以免影响光效率。5、WFZ800-DA、756型等分光光度计,由于其光电接收装置为光电倍增管,它本身的特点是放大倍数大,因而可以用于检测微弱光电信号,而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移,灵敏度下降。针对其上述特点,在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。6、放大器灵敏度换挡后,必须重新调零。7、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用,否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下:分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液,把仪器置于某一波长处,石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水,玻璃比色杯:700nm处装蒸馏水,将某一个池的透射比值调至100%,测量其他各池的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在±,若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。典型故障及其排除方法1、仪器不能调零。可能原因:a.光门不能完全关闭。解决方法:修复光门部件,使其完全关闭。b.透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮。c.仪器严重受潮。解决方法:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥。
试剂盒包含一个空白滤光片、三个检查光度的滤光片和三个校正波长的滤光片。每个滤光片的吸光值是相对空白滤光片测定的。这个试剂盒不仅能让用户获得测量准确性的信息,也能提供精确度的信息,包括平均值和变异系数。在测量准确性和精确度时,将空白滤光片和样品滤光片放入插槽内。将测得的输出吸光度值与允许值范围比较。在检查波长时,测定三个测试滤光片在对应波长(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以确定每个波长的变异系数。**后,许多分光光度计,包括Eppendorf的所有仪器,都带有一个特殊的功能——自检。Eppendorf建议用户至少每周运行一次自检,但自动自检的频率可根据需要进行设定。自检主要检查仪器的几个部分。它通过测定现有波长的随机误差来校验检测器,通过检查**大能量、随机误差、基准传感器的信号和光强度来校验光源。**后,它还通过测定紫外光谱范围内强度峰值位置的精确度来确定波长的系统及随机误差。遵照这些建议来维护分光光度计,那么在今后的使用过程中再也不用担心测量结果有问题啦。(来源:互联网整理)(图片来源:Pixabay)上周看点2832万大单!山一大公开采购成像分析系统等设备刷瓶子!实验室新人的共同回忆……趣味科普丨啊!上海光度计的定制尺寸有哪些?
并更换干燥剂。d.电路故障。解决方法:检修电路。2、仪器不能调“100%”。可能原因:a.光能量不够。解决方法:增加灵敏度倍率档位,或更换光源灯(尽管灯还亮)。b.比色皿架未落位。解决方法:调整比色皿架使其落位。c.光电转换部分老化。解决方法:更换部件。d.电路故障。解决方法:调修电路。3、测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因:a.比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表面有液滴。解决方法:用擦镜纸擦干净比色皿表面,然后将其安放在比色槽的左边,上面用定位夹定位。b.电路故障(电压、光电接收、放大电路)。解决方法:送修。4、数显不稳。可能原因:a.预热时间不够。解决方法:延长预热时间至30分钟左右(部分仪器由于老化等原因,长时间处于工作状态时,也会工作不稳)。b.光电管内的干燥剂失效,使微电流放大器受潮。解决方法:烘烤电路,并更换或烘烤干燥剂。c.环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法:改善工作环境。d.光电管、电路等其它原因。小结综上所述,以下几个问题应引起仪器操作人员注意:1、比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视,因操作不当造成偶然误差,严重影响分析结果。上海元析光度计值得信赖。uv光度计型号
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一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。辽宁光谱仪光度计型号
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