食品微生物检测关注了解更多检测内容分光光度计是实验室常用设备之一，在食品、制药、环境、生命科学等领域都有***的应用。所以实验室的小伙伴熟悉并掌握其如何使用时非常必要，而且简单的故障维修和维护也要有所了解。***小编把分光光度计使用中的那些事进行了总结，希望能对你有所帮助。分光光度计是用不连续的波长采样反射物体或透射物体的一种测量仪器。由于不同物体分子的结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同，因此，每种物体都具有特定的吸收光谱。能从含有各种波长的混合光中，将每一种单色光分离出来，并测量其强度的仪器叫做分光光度计。分光光度法是比色法的发展。比色法只限于在可见光区，分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。分光光度法则要求近于真正单色光，其光谱带宽比较大不超过3－5nm，在紫外区可到1nm以下，来自棱镜或光栅，具有较高的精度。分光光度计？就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。分光光度计可分为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。项目对分析结果的影响1、波长准确度分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。上海元析光度计的优势。光谱仪光度计原理
可以对某一种物质进行全波段扫描，分析物质的特征波长，判断实验过程的误差）；多波长测试（可以对物质同时进行多个波长的测试，分析物质的相关特性）；还有可以进行DNA蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等。2.波长范围可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右，紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样，紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。3.光源不同可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯氘灯两个光源，同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样，紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。4.光学器件不同由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用石英光学部件。同时由于这个原因，在比色皿的选择上也就有不同了，可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿。山东紫外可见分光光度计购买光度计的制作步骤详解。
杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。
罗丹明B的标准溶液的荧光光谱如图4所示。短波长侧的荧光被再次吸收，导致标准溶液的浓度变高的同时峰顶向长波长侧变化。根据577nm的荧光强度值创建的标准曲线如图5以及图6所示。如图5所示，在ug/ml(Abs）或更高的高浓度区域,标准曲线是弯曲的，但在图6的低浓度区域，可获得线性度良好的标准曲线。3比较结果、定量下限值来比较灵敏度与应用报告，使用标准曲线和10次空白测定中计算得的标准偏差σ，计算出了定量下限值（10σ）和检测下限值（3σ）。另外，采用了线性度较高的标准曲线。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和检测下限值如表3所示。从通过本实验算出的定量下限值的比可知，RF-6000的灵敏度较高，是UV-2600i的400倍以上。即使对图3和图6的低浓度区域的标准曲线进行比较，图6(RF-6000）的结果中得到了离散较小的标准曲线。与对未被样品吸收的照射光进行检测的吸光光度法不同，荧光光度法以零为标准检测荧光，因此噪声水平低，可得到较高的灵敏度。UV-2600i和RF-6000的标准曲线的相关系数的平方值与浓度范围的关系如表4所示。另外，使用UV-2600i时，低于空白以外的定量下限值的点除外。即使在未达到UV-2600i的定量下限值的区域（0～)。光度计的应用范围十分广阔。
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分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。光谱仪光度计原理
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