分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。光度计的厂家哪个好?上海元析告诉您。云南可见分光光度计型号
编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律,测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面,利用荧光分光光度计时,使用荧光强度。在低浓度时,荧光强度与浓度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果,对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较,下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中,调配~5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示,根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中,用~5ug/ml的6点和空白样品(蒸馏水)创建,得到了线性度良好的标准曲线(相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中,噪声的影响相对较大,导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。重庆原子吸收光度计光度计的选材要求是什么?上海元析告诉您。
罗丹明B的标准溶液的荧光光谱如图4所示。短波长侧的荧光被再次吸收,导致标准溶液的浓度变高的同时峰顶向长波长侧变化。根据577nm的荧光强度值创建的标准曲线如图5以及图6所示。如图5所示,在ug/ml(Abs)或更高的高浓度区域,标准曲线是弯曲的,但在图6的低浓度区域,可获得线性度良好的标准曲线。3比较结果、定量下限值来比较灵敏度与应用报告,使用标准曲线和10次空白测定中计算得的标准偏差σ,计算出了定量下限值(10σ)和检测下限值(3σ)。另外,采用了线性度较高的标准曲线。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和检测下限值如表3所示。从通过本实验算出的定量下限值的比可知,RF-6000的灵敏度较高,是UV-2600i的400倍以上。即使对图3和图6的低浓度区域的标准曲线进行比较,图6(RF-6000)的结果中得到了离散较小的标准曲线。与对未被样品吸收的照射光进行检测的吸光光度法不同,荧光光度法以零为标准检测荧光,因此噪声水平低,可得到较高的灵敏度。UV-2600i和RF-6000的标准曲线的相关系数的平方值与浓度范围的关系如表4所示。另外,使用UV-2600i时,低于空白以外的定量下限值的点除外。即使在未达到UV-2600i的定量下限值的区域(0~)。
由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度,对波长准确度要求允许宽些。但是,当吸收峰宽度较小,而且吸收峰两侧边缘比较陡直,此时波长准确度的影响就必须引起注意。2、透射比(吸光度)准确度很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。3、杂散光杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光,随着样品浓度的增加,杂散光的影响也随之增大,将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱,杂散光的影响更不能忽视。因此,杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。使用与维护1、若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。2、指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。3、比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯。光度计的制作方法难吗?上海元析告诉您。
分光光度法始于牛顿( Newton)。早在1 665年牛顿作了一介罈人的实验:他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔,在室内形成很细的太阳光束,该光束经棱镜色散后,在墙壁上呈现红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带。这色带就称为“光谱”。顿通过这个实验;揭示了太阳光是复合光的事实。紫外可见分光光度计附件发展紫外可见分光光度计多一种附件就多一种功能、多一种适应性。纵观当今世界上的紫外可见分光光度计附件的发展,实在是令人眼花缭乱。这些附件很大程度方便了用户,是广大紫外可见分光光度计使用者所欢迎的,也是紫外可见分光光度计进展的重要内容之一。上海光度计的厂家优势。上海可见分光光度计选购
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T2光源转向分布光度计T2光源转向分布光度计(带有光源转动装置)是一种高精度,高可靠性的光度计,用于光源和照明设备的分布光度学(发光强度的分布)和分布光谱学(光谱)测量。T2分布光度计可基于以下条件进行测量:C-Gamma测量系统,用于室内和街道照明灯具V-H(B-Beta)测量系统,用于泛光灯因此,可以测试任何种类的照明设备和光源。标准和建议T2分布光光度计是基于如下标准制造的:EN13032标准类型、CIE70建议书第5章1型和2型(带有可转动光源的照明设备)。特性被测照明设备和光源的尺寸:重量:50千克尺寸:3500×1500×1800mmT3可移动光度计探头的分布光度计T3可移动光度计探头的分布光度计是一种高精度,高可靠性的光度计,适用于小型光源和照明设备的分布光度法(发光强度分布的)和分布光谱法(光谱)测量,特别设计用于测试LED光源。标准和建议T3角度分布光度计是基于以下标准制造:EN13032标准类型CIE70建议书第6章Type1(带可移动光度计探头的分布光度计)特征被测照明设备和光源的比较大尺寸重量:比较大10千克尺寸:直径100mm,高度15mmT6可移动光度计探头的分布光度计T6可移动光度计探头的分布光度计是一种高精度,高可靠性的光度计。云南可见分光光度计型号
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