•自噬调节剂套装 Autophagy Regulators Panel目录号189488,包括23种小分子调节剤,专门用于自噬过程研究,组分也可单独订购 •自噬流式检测试剂盒 FlowCellect™ Autophagy LC3 Antibody-based Assay Kit目录号FCCH100171,选择性透膜处理,去掉LC3-I的干扰,特异检测LC3-II,定量检测细胞自噬 •GFP-LC3稳定表达细胞系 lowCellect™ GFP-LC3 Reporter Autophagy Assay Kit§>^FCCH100170/ FCCH100181,稳定表达GFP-LC3细胞系,通过选择性透膜处理,能够特异检测LC3-II,用来研究自噬诱导或***,有CH0和U20S两种细胞系可供选择,也提供RFP版本 •表达GFP-LC3慢***试剂盒 LentiBrite™ GFP-LC3-II Enrichment Kit目录号17-10230,包含表达GFP-LC3的高滴度慢***颗粒和选择性透膜试剤,用来构建稳定表达GFP-LC3细胞系,也单独提供该慢***颗粒和RFP版本上海益启生物血清订购方便。Transwell小室细胞培养一级代理
本实验技术要点: **细胞比较好经过饥饿处理,并且小室上下培养基的FBS有浓度差,以保证细胞可以穿透基质胶。铺细胞要均匀,滤膜底部不能产生气泡,否则会导致细胞染色不均匀,或者局部细胞无法穿透。根据细胞类型选择合适的膜孔径和膜类型。PET膜兼容***,适合绝大多数种类的细胞。侵袭实验的细胞密度比较大,一般在1 0 6cells/cm2左右,不同**细胞的接种密度、培养时间不同,需要参考文献和实验摸索。细胞太少,迁移不过去;细胞太多,可能导致正常组和实验组无差异。闵行区细胞培养细胞培养商家上海益启生物公司干细胞培养的优势。
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c ) 用无血清的冷培养基稀释ECM 胶至2 0 µ g/mL ,以5-10µg/cm2的密度加入到细胞小室的上层(按照ECM产品说明书的推荐比例和体积),轻轻摇晃使胶均匀铺在膜上。以上操 作在冰上进行。 d)立即将铺好ECM胶的细胞小室置于培养板中,于37°C孵育1小时,ECM胶可由液体凝成固体,吸走多余的或者未凝的胶。细胞用PBS清洗一次,EDTA或者0.05%胰酶消化,然后用包含5%BSA的无血清培养基中和,1500rpm离心5-10min。用无血清培养基重悬细胞,调整细胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。Transwell小室细胞培养一级代理