每隔2天用电阻仪测量细胞跨膜电阻值,直到达到平台,提示细胞已经形成致密单层;或者通过检测荧光染料荧光黄的通过率,以判断细胞刚好完全汇合。电阻仪测量因不伤害细胞,可以继续培养而比荧光黄法更为普遍地被采用。细胞单层汇合后,用DPBS清洗一次细胞,加入含有不同浓度药物(一般10-200μM)的缓冲液。如果要测药物从上至下的运输效果,则上层小室中加药物,下层培养板孔里只加缓冲液;反之则相反。将培养板在37℃条件下培养(60rpm震荡或者不震荡)1-2h,到达时间之后,分别从细胞小室和培养孔里取出一定 体积缓冲液(一般50μL )转移至新的转运分析板进行LC/MC分析。对于放射性标记药物,分别取出20μL缓冲液加入100μL闪烁液,通过多孔闪烁读板仪读值。哪家血清是有正规授权的?长宁区细胞转染细胞培养销售
常见检测细胞: **细胞(MDA-MB-231, MCF-7, HT1080, B16F10)等,用孔径为8μm的培养小室巨噬细胞、单核细胞 PMN:用孔径为5μm的培养小室内皮细胞(HUVEC)、白血病细胞 K562、骨髓瘤细胞HB124:用孔径为 3μm或5μm的培养小室 具体操作: 以配合24孔板的8μm PET膜Millicell®悬挂式细胞培养小室(cat#MCEP24H48)为例,实验周期:3-5天 复苏代数靠前的**细胞,在含有10%FBS的培养基中预先培养2-3代,待细胞汇合达到80%左右,饥饿处理18-24小时。 准备铺胶: a) 4 °C融EMC胶过夜。 b) 将细胞小室、培养板和***头等于4°C 预冷。浦东新区细胞培养细胞培养联系方式上海益启生物的细胞转染询价公司电话。
主要优点 •两种过滤装置均有快速过濾的Millipore Express PLUS (PES)和**蛋白吸附的Durapore膜两种材质可选 •过滤中培养基损失极小,回收率超高 •孔径的过滤装置推荐用于去除支原体 Sterivex™过滤器 Sterivex™过滤器可以结合注射器、蠕动泵或压力装置使用,避免因倾倒或移液带来的污染。 主要优点 •比较好处理100 mL-2 L •可以直接过濾至几乎任何接收容器 •有多种***膜类型可供选择 不锈钢平板式过滤器 •根据不同的处理体积有90mm及142mm可供选择 •通过加压过濾来清洁或消毒液体与气体 •特氟隆镀面的支撑网 •可以将滤膜装入后整体进行高压消毒
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