医院检验中心糖原染色操作规程:1.雪夫氏试剂:400m1 蒸馏水煮沸除去 C02,逐渐加碱性 品红 2.08 溶解后,待冷却至 60℃,加 1mm01 儿 HCl40ml, 再加偏重亚硫酸钠(NaHSO:)4g,次日加活性碳 1.5g, 放置半天后过滤。配好后液体为无色透明,保存于 4℃ 冰箱中。 2.过碘酸作用液:过碘酸 1g 溶于蒸馏水 100ml 中,或取 过碘酸钾(1tI04)0。698 加蒸馏水 100ml,微加热使溶 解,再加浓硝酸 0.3m1,置冰箱中保存。 3.固定液:95%乙醇 90ml 与甲醛 10m1 混匀。 4.20g/l 甲基绿:甲基绿 2g 溶于 100m1 蒸馏水。 [操作] _x000c_(1) 新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内 10 分钟。 (2) 水洗数次后,对照片先用唾液消化 30 分钟,也可在 同一片,在其中间用蜡笔划界,一半做对照,另一半做 测定。 (3) 水洗后,滴加过碘酸数滴于涂片上,作用 10 分钟后, 再水洗数次。该依据切片厚薄、组织的类别等决定。山东咨询糖原染色试剂盒产品介绍

粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1) 对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2) 对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3) 遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4) 溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗。(6)常规脱水、封片。山东咨询糖原染色试剂盒产品介绍糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能较好地保存糖原,但有使糖原流动到细胞一侧的现象,多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存,是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此较好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳。
染色的原理和临床意义:在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理,同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间,较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞,因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒-单核细胞白血病 该染色法在急性粒-单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞,甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应,因此酯酶双染色反应在急性粒-单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。

糖原D-PAS染色液注意事项:1、切片脱蜡应尽量干冷,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前较好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应。江西哪家提供糖原染色试剂盒平均价格
较大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,*需1h左右。山东咨询糖原染色试剂盒产品介绍
糖原染色生物技术优势:(1)拥有针对不同组织的特殊固定液;(2)拥有日本进口的各种染料,保证切片染色效果;(3)拥有千锤百炼的专业人才队伍,保证实验快速、有效的完成。实验样本要求:(1)植物材料在选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分;(2)动物材料取用时需对动物施以麻醉,常用的麻醉剂有氯仿和,或将动物杀死后迅速取出所需要的组织;(3)取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要,应该尽可能割取生活着的组织块,并随即投入固定液,固定液与组织块的体积比应在10:1;(4)切取材料时刀要锐利,避免因挤压细胞使其受到损伤;(5)切取的材料应小而薄,便于固定液迅速渗入内部。一般厚度不超过3mm,大小不超过5×5m㎡。山东咨询糖原染色试剂盒产品介绍
注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。该依据切片厚薄、组织的类别等决定。江苏如何使用糖原染色试剂盒...