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每隔2天用电阻仪测量细胞跨膜电阻值,直到达到平台,提示细胞已经形成致密单层;或者通过检测荧光染料荧光黄的通过率,以判断细胞刚好完全汇合。电阻仪测量因不伤害细胞,可以继续培养而比荧光黄法更为普遍地被采用。细胞单层汇合后,用DPBS清洗一次细胞,加入含有不同浓度药物(一般10-200μM)的缓冲液。如果要测药物从上至下的运输效果,则上层小室中加药物,下层培养板孔里只加缓冲液;反之则相反。将培养板在37℃条件下培养(60rpm震荡或者不震荡)1-2h,到达时间之后,分别从细胞小室和培养孔里取出一定 体积缓冲液(一般50μL )转移至新的转运分析板进行LC/MC分析。对于放射性标记药物,分别取出20μL缓冲液加入100μL闪烁液,通过多孔闪烁读板仪读值。
本实验技术要点: **细胞比较好经过饥饿处理,并且小室上下培养基的FBS有浓度差,以保证细胞可以穿透基质胶。铺细胞要均匀,滤膜底部不能产生气泡,否则会导致细胞染色不均匀,或者局部细胞无法穿透。根据细胞类型选择合适的膜孔径和膜类型。PET膜兼容***,适合绝大多数种类的细胞。侵袭实验的细胞密度比较大,一般在1 0 6cells/cm2左右,不同**细胞的接种密度、培养时间不同,需要参考文献和实验摸索。细胞太少,迁移不过去;细胞太多,可能导致正常组和实验组无差异。益启***的批发价是多少呢?
间充质干细胞: ***提供间充质干细胞研究相关的细胞、培养基、诱导分化试剂盒(间充质干细胞向脂肪细胞或成骨细胞的分化与鉴定)。 生长因子: 提供***的细胞因子,多种包装满足不同需求。还提供更高活性的人源细胞因子。 主要优点 •无血清或低血清形式 •促逬细胞活力和形态 ・增加细胞培养寿命 •更快的传代效率 •无酚红或其它添加剂带来的屏蔽效应 ・独特的避光和温控包装促逬培养基的稳定性,获得更好的结果 •严格的QC保证批次间的稳定性益启生物公司带您了解Transwell小室详情。浦东新区细胞转染细胞培养联系方式
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