对于成功的ChIP实验，选择适当的ChIP抗体是**关键的步骤之一。即使是比较高质量的抗体，即在经典的Western blot验证中表现非常好的抗体，也不一定适合ChIP。比较好只考虑使用在ChIP实验中专门验证过的抗体。一般的， ChIP实验之后会用定量PCR（qPCR）来验证某一特定DNA序列是否与靶蛋白有关。研究人员可以采用这种经典方法评估目标蛋白与已知的靶基因之间的相互作用。
ChIP实验可以细分为以下几个主要步骤：
样品制备
蛋白与DNA交联
细胞裂解和染色质片段化
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对每种细胞类型或组织焚型单壮优化表解，使用l化试管或低吸附试管。确保所有试剂都是新鲜配制的，且没有污染物。增加洗涤次数。运行一次"无DNA"PCR反应，以确定您的样品是否被核酸污染。
使用PCR的**移液管;在设置PCR之前，使用紫外性照射移液管。采用**移液管，在三个不同的房间/区域进行ChIP、DNA纯化和PCR反应设置，或在遇风期内设置反应。 避免使用票装水或其它形式的预包装水。使用从含有紫外光源的Mll-QR系统中制造的水。使用防雾移液管吸头。 徐汇区Upstate抗体抗体销售MYC抗体的报价具体是多少呢?
免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP))
免疫沉淀是很有价值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的关键信息，包括：小规模蛋白纯化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素：原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前，确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。
叠氮化钠可通过某些偶联方法干扰多种生物实验。因此，进行此类实验时比较好使用离心透析过滤法、透析法或凝胶过滤法除去叠氮化钠，或使用无叠氮化物的抗体。注意：叠氮化钠有毒。对于所有实验室试剂，处理注意事项均请查阅“材料安全性数据表”（MSDS）。抗体为相对稳定的蛋白，能够抵抗较广范围的温和变性条件。当按照生产商的建议条件正确保存时，抗体可保持稳定达数年。
大多数情况下，抗体保存在-20℃时可不损失其结合能力。 找神经抗体哪家靠谱？
比较好避免在无霜冰箱中保存抗体。
关于多克隆抗血清，理想的抗体阴性对照应是来自同一动物的免疫前血清。但是，在缺乏来自同一动物的免疫前血清时，从同一种类的不同动物获得的相等浓度的非免疫（正常）血清也能满足要求。
免疫沉淀法可以分为下述关键步骤：
抗原标记（可选）
样品制备（细胞裂解释放蛋白）
形成抗体-抗原（免疫）复合物
免疫复合物沉淀
分析
染色质免疫沉淀（ChIP）
染色体免疫沉淀（ChIP）是用于研究细胞内蛋白在染色体DNA上分布的经典技术。
这些蛋白质可能是组蛋白亚单位、转录因子或与DNA直接或间接结合的其它调节蛋白或结构蛋白。 Sigma抗体零售多少钱呢？浦东新区CST抗体抗体参数
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对于探索性研究，Western blotting仍是优先平台，是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析
法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学）的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间（例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统，目录编
号SNAP2MM），提高了WB实验的效率。
Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤
样本制备
凝胶电泳
转膜
封闭非特异性结合
加入抗体
检测
Western Blot 实验流程图
Troubleshooting
问题 可能的原因 处理方法
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