北京微流控芯片数字PCR原理

        精细诊断是精细医学的关键环节，液体活检作为一种无创、均一的检测技术，迅速成为精细诊断领域的新星，2015年被《麻省理工大学科技评论》评选为年度**突破技术， 2017年入选世界经济论坛评出的全球**新兴技术，引发了全球科研、临床和产业界的极大热情，已在**、产前诊断、***移植等疾病领域***被应用。

        数字PCR技术与高通量的二代测序技术，共同组成液体活检领域的两大利器；数字PCR技术是公认的液体活检领域灵敏度比较高的检测方法，采用有限稀释的方法将目标分子分割到**的反应体系中，在不依赖标准曲线条件下实现靶标***定量检测，能检测低至0.01%的突变基因；Bio-Rad及Thermo Fisher目前是这一领域的主导者，分别采用微滴或芯片方式将样本分割成两万份，MiniDrop™创新性采用高压驱动的方法将样本分割成50万份，打破了国外厂商在微滴式数字PCR领域的垄断。

超高灵敏度，适用于稀有序列及稀有突变的检测。北京微流控芯片数字PCR原理

研究方向

低丰度及稀有序列的精确定量

目前对于低丰度目标序列的检测，定量PCR、杂交、毛细管测序及NGS等方法都因受到背景DNA的干扰，使得检测灵敏度及精确性都达不到精细定量的要求(如定量PCR检测中Ct值大于33的情况下，其重复性就不是很高)， 而微滴式数字PCR系统通过**的微滴化处理，使得稀有的核酸序列从大量的背景DNA中分离出来，从而提高了检测的灵敏度及重复性。

此外，由于样品微滴化处理的同时，也将样品中可能存在的***剂进行了分装，提高了数字PCR扩增对于***剂的耐受程度，因此可具体应用于很多临床样品(血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液等)中对**核酸标记物的检测。一般而言，毛细管电泳和定量PCR的检测灵敏度约在10%;NGS的灵敏度可达到1%;而ddPCR的检测下限为0.001%。 北京JUE对定量数字PCR现货可使用第三方PCR反应液，配备PCR A300（温度范围4°C-98°C，扩增模块温控精度±0.2°C）。

研究方向

病原微生物的检测(***、细菌等)

疾病预防控制中心、出入境检验检疫局系统的实验室目前主要采用基于TaqMan探针法的定量PCR体系对病原微生物进行核酸水平的检测，而这些目前正在使用着的检测体系可以无缝地转移到QX200上，从而满足该类实验室对于检测结果的要求：灵敏度更高、重复性更好、无需依赖标准曲线的***定量结果，同时操作简便。

对于其他类型的研究实验室，也可以利用ddPCR灵敏度高的特点，对各种样品中的病原微生物展开***的研究。如HIV抗逆转录***治疗过程中***残留量的监控;HBV耐药突变的检测;HCV的分子分型;抗甲氧西林金黄色葡萄球菌的院内***监控;环境微生物不同功能基因之间的连锁分析等等。

**个体化诊疗

通过检测T790M位点突变情况，可以更好地评估一代TKI***的疗效及耐药情况并指导第三代TKI靶向药Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平台ARMS检测技术的灵敏度有限，没有办法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效准确的检测到T790M突变。这个时候dPCR技术展现出了****的检测精度，此外，dPCR***定量的优势也能充分发挥出来了，可以监控突变含量变化，做到及早发现耐药。

2.）基因表达分析

伊马替尼（Imatinib）可以有效帮助很多慢性髓细胞白血病（CML）患者延长生存期，但是临床上发现，伊马替尼的疗效与BCR-ABL1融合基因的转录产物表达量有很大的关系。研究人员采用dPCR对CML患者的BCR-ABL1融合基因转录产物进行测定，结果检测下限可以达到0.001%，显示出dPCR在痕量核酸检测方面比qPCR具有无可比拟的优势 FAM、VIC双通道荧光检测。

定量PCR和数字PCR的特点：

分辨率——低至0.1倍基因表达差异。广州广州永诺数字PCR

样本多样性，样本通量可达96个样本，支持灵活设定。北京微流控芯片数字PCR原理

定量PCR和数字PCR的特点：

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