二、样品过载：纯度与回收率的“双重打击”错误表现：色谱峰严重展宽、拖尾，甚至相邻峰重叠无法分离，收集的目标组分纯度大幅下降；部分样品因超载在柱头结晶，反而导致回收率降低。常见原因：1、进样量过大：超过色谱柱的负载能力（通常制备柱的较大进样量与柱体积、样品浓度正相关，如10mm内径柱单次进样不宜超过1mL浓溶液）。2、样品浓度过高：高浓度样品在流动相中溶解度不足，进样后在柱头析出，影响分离效率。3、梯度洗脱不当：梯度变化过快，导致样品在柱内保留过强，累积形成过载。解决方案：l紧急处理：停止进样，用初始流动相冲洗色谱柱30分钟，去除柱头残留样品；若峰形已严重畸变，需重新优化分离条件。l预防措施：1、逐步摸索进样量：从低浓度、小体积开始测试，观察峰形变化，以峰对称因子>、相邻峰分离度>为标准；2、稀释样品浓度：确保样品在流动相中完全溶解，必要时加入少量助溶剂（如DMSO），但需注意与色谱柱兼容性；3、优化梯度程序：采用缓梯度洗脱（如有机相比例每分钟升高1%-2%），延长样品在柱内的分离时间，减少过载风险。总结：实验成功的重要原则制备液相实验的关键在于“预防为先”：样品前处理做到“无杂质、全溶解”。万立制备液相色谱仪，服务网络完善，支持及时周到。南通现代液相色谱仪排名
冲洗10倍柱体积。2、起始流动相平衡冲洗后用起始流动相平衡柱体，使固定相与流动相达到分配平衡，若流动相含缓冲盐，先以5%有机相-水相冲洗10倍柱体积，再切换至目标比例，避免盐在柱内析出。为了更直观地展示以上流程，我们特别录制了一段在万立制备液相色谱系统上的实操视频片段，具体操作可参考视频演示哦！您的浏览器不支持video标签。三、试用结束后的保存实验完成后，必须对色谱柱进行正确冲洗和保存，以备下次使用。还是以反相色谱柱为例：1、采用甲醇：水或者乙腈：水（8：2），让这个比例的有机溶剂填满色谱柱。2、将色谱柱两端用堵头密封好，并贴上标签，注明保存介质和日期，置于干燥处存放。小贴士：保存教学我们也有具体操作视频哦！您的浏览器不支持video标签。结语：正确试用色谱柱，是保证制备纯化结果可靠性、延长色谱柱使用寿命的关键第一步。遵循“准备-平衡-测试-保存”的科学流程，并采用像万立仪器这样稳定可靠的设备和直观的软件，让每一次制备实验都更加高效和安心。希望本篇内容对您有所帮助！如有任何疑问，欢迎在评论区留言讨论。声明：部分内容来源于网络、《液相色谱实战宝典》，本篇文章只是用于科普，不作任何商业用途。 有哪些液相色谱仪大概价格多少主要部件自主研发，配合本土化快速响应服务，保障实验进程。
长期以来，高性能制备液相色谱仪的重要技术与市场被少数国际巨头垄断。如今，像万立仪器这样的国产力量，正通过持续攻坚，实现了从“可用”到“好用”的跨越。我们的突破始于全栈自研的主要部件：耐腐蚀、无脉动的高压恒流泵，确保了在数百毫升每分钟的流速下依然稳定如初；高灵敏度的多波长紫外/光电二极管阵列检测器，能像“鹰眼”般捕捉微弱的目标峰，避免产品流失；精密耐用的馏分收集阀，保证每一滴珍贵产物的归位准确无误。更重要的是，我们构建了完整的自主知识产权体系与供应链，这不仅大幅降低了用户的购置与维护成本，更意味着我们可以针对国内用户的特殊需求（如特定中药提取流程、特殊溶剂体系）进行快速响应和定制开发，提供不受制于人的、安全可靠的解决方案。
需采用差异化的梯度优化思路，避免“一刀切”：1.杂质检测场景：优先保证“目标物与杂质分离”杂质检测（如药物有关物质、食品添加剂杂质）的主要是“目标物与相邻杂质峰分离度≥”，优化策略如下：步骤1：用“宽范围线性梯度”（如5%-95%乙腈，40分钟）初筛，确定目标物与杂质的保留时间区间；步骤2：在目标物与杂质出峰区间，设置“缓斜率分段梯度”（如），同时微调初始有机相比例（±2%），观察分离度变化；步骤3：若杂质峰形拖尾（如碱性杂质），可在水相中加入三乙胺（调节pH），同时保持梯度斜率平缓，避免拖尾加剧。2.复杂样品（多组分）场景：“分段梯度+梯度延迟”结合对于含10种以上组分的样品（如中药提取物、环境污染物），易出现“早出峰重叠、晚出峰展宽”，优化策略：采用“三段式梯度”：前段（强极性组分）：低初始有机相比例（如2%-5%）+缓斜率（1%），避免早出峰重叠；中段（中等极性组分）：中等斜率（），平衡分离与效率；后段（弱极性组分）：陡斜率（3%-5%/min）+终梯度维持（5分钟），缩短晚出峰时间，避免展宽。若出现“梯度鬼峰”（如梯度变化时出现杂峰）：可加入“梯度延迟时间”（即进样后先等度洗脱5-10分钟，再开始梯度）。连续运行零卡顿，万立仪器液相色谱仪硬核护航实验全程。
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流动相进入泵前先经过脱气模块（通常是真空或膜分离技术），实时去除溶解气体；3、氦气吹扫脱气（效果佳，适合高精度实验）：将惰性气体通入溶剂中把溶解的空气排出。严格来说，此方法不能将溶剂脱气，它只是用低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来。连续通氨脱气效果较好，但成本高。4、抽真空脱气（适合大批量流动相）：将流动相放入真空脱气装置中，抽真空的同时搅拌，让气体快速逸出。缺点是易抽走有机相，使混合溶剂组成发生变化。总结：流动相脱气不是“多此一举”，千万不要因为步骤简单就掉以轻心。花几分钟做好脱气操作，既能避免峰形异常、数据失真等问题，又能保护昂贵的仪器和色谱柱，让实验少走弯路、效率翻倍。声明：图片素材来源于豆包，部分内容来源于网络、《液相色谱宝典》，本篇文章只是用于科普，不作任何商业用途，不构成任何实验指导。如涉及内容或其他问题，请联系我们。本文所述为通用实验室规范，具体操作请参照您所使用的仪器说明书和实验室标准操作规程。 南通现代液相色谱仪排名
