MB培养基基础(Marine Broth Base)是一种专为海洋细菌设计的富营养液体培养基,由蛋白胨、酵母粉及多种无机盐组成,pH 7.2–7.6,渗透压与海水相当。配方中氯化钠浓度约2–3%,并补充镁、钾、钙等海水中主要离子,可瞬时启动依赖高盐环境的嗜盐菌与耐盐菌,缩短延滞期。实验室常规做法是将培养基干粉溶解于蒸馏水后,补加陈海水或人工海盐,即可恢复接近自然海水的离子谱,使挑剔的海洋放线菌、弧菌、假单胞菌等迅速进入对数生长,用于后续分离、保藏或活性物质筛选。由于海洋微生物常产色素、抗生物质及胞外多糖,MB培养基的高营养特性可充分展现这些次级代谢潜能:弧菌在28℃、180 r/min振荡培养12小时,菌浓即可达10⁹ CFU/mL,菌液呈乳白或淡粉;某些Planococcus则分泌墨蓝色素,使整瓶培养液变为靛蓝,成为天然色素研究的理想起点。若需固体培养,只需补加1.5%琼脂,即成MBA平板,可在表面涂布沉积物悬液,28℃培养2–3天,挑取形态各异的单菌落进行16S rDNA鉴定,流程简洁高效。在质量控制方面,MB培养基需用人工海水或陈海水配制,切忌直接使用自来水,以免钙镁离子不足或氯残留抑制菌体;灭菌后若出现沉淀,多为镁盐析出,可50℃水浴复溶,不影响使用。
史氏芽孢杆菌(Bacillus smithii)是芽孢杆菌属中嗜热分支的,标准菌株 JCM 9076 更初从高温堆肥中分离,能在 55 ℃、pH 6.5 条件下旺盛生长,芽孢可耐 100 ℃沸水 2 h,是验证高压灭菌效果的指示菌之一。其细胞壁含特殊脂肪酸,膜脂熔点高,配合小分子热休克蛋白,使核糖体和 DNA 在高温下仍保持构象稳定,赋予菌体“耐热盾牌”。2024 年,中国团队从镉污染稻田筛选到解磷菌株 M2(保藏号 CCTCC M2024167),鉴定为 Bacillus smithii。该菌兼具三重抗逆:耐盐 6 %、耐镉 50 mg·L⁻¹,并能在 pH 4.5–9.0 范围内正常分泌有机酸,将难溶磷酸钙转化为磷,盆栽试验中使玉米根际有效磷提高 42 %,籽粒镉含量下降 35 %,实现“增磷减镉”同步完成。在酶制剂方向,史氏芽孢杆菌是“高温酶工厂”。其胞外碱性淀粉酶更适温度 70 ℃,在洗涤剂、烘焙和酒精浓醪发酵中可省去降温环节,节能 15 %;耐有机溶剂蛋白酶可在 60 ℃、30 % 乙醇环境中保持 80 % 活性,为生物炼制提供新型催化剂。农业应用上,M2 菌株可与秸秆堆肥复配,使堆体温度 24 h 升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d;作为功能性菌剂,每亩随基肥施入 200 g 菌粉,冬小麦越冬前磷吸收量提高 18 %,分蘖数增加 1.2 个,对后期倒伏有明显缓解作用。粉色红拟层孔菌生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。

嗜碳芽孢杆菌(Bacillus carboniphilus)是芽孢杆菌属里少见的“高碳”。菌体杆状、革兰氏阳性,可形成椭圆芽孢,更适温度 45–50 ℃,pH 7.0–8.5,可在高浓度可溶性淀粉、糖蜜或木质纤维素水解液中快速生长,因而得名“碳爱好者”。一、高效利用碳源菌株 ATCC 700101 携带多拷贝 α-淀粉酶、普鲁兰酶和木聚糖酶基因,48 h 内可将 15 % 淀粉液化糖化至还原糖 180 g L⁻¹,转化率 > 90 %,为浓醪发酵提供廉价糖源;与酵母共培养,乙醇产量提 12 %,蒸馏能耗降 8 %。二、高渗耐受胞内积累相容溶质四氢嘧啶,使菌体在糖浓度 300 g L⁻¹、渗透压 1.8 MPa 下仍保持 80 % 活性;芽孢耐 80 ℃ 30 min,便于浓糖液灭菌后直投,缩短发酵周期 12 h。三、农业应用菌株 BC-20 产 IAA 20 mg L⁻¹ 并溶磷 2.9 mg L⁻¹,玉米盆栽根长增 28 %,吸磷量提 22 %;与秸秆复配堆肥,堆温 24 h 升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d,杀灭病原菌和杂草种子效果明显。四、工业酶潜力其耐热耐碱普鲁兰酶更适 pH 9、65 ℃,已用于淀粉糖化“一步法”,节省中和酸 20 %;木聚糖酶在 pH 10、60 ℃仍保持 85 % 活性,用于纸浆漂白,氯用量减少 30 %,降低可吸附有机卤化物(AOX)排放。
花园芽孢杆菌(Bacillus horti)更早从花园腐殖土中分离,因而得名。菌落奶白、边缘整齐,杆状细胞具周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐碱、耐盐、耐干燥,在pH 6–9、15–45℃范围内生长良好,是典型“环境通吃型”根际益生菌。一、防病降毒花园芽孢杆菌能分泌表面活性素、fengycin等环脂肽,破坏病原膜结构,对立枯丝核菌、番茄青枯拉尔氏菌抑菌带宽达26mm;同时产生芳基酰胺酶,降莠定、甲磺隆等碱性除草剂,土壤残留量7d内下降60%,为连作障碍田“”。二、促生提质菌株IAA产量25mg/L,溶磷3.2mg/L,并产挥发性2,3-丁二醇,诱导黄瓜、生菜根系增30%,叶绿素提高2SPAD单位;大棚试验显示,亩施200g菌粉可使番茄Vc增加12%,糖酸比更协调,货架期延长4d。三、工业酶潜力其耐碱纤维素酶更适pH9、50℃,在洗衣液中仍保持80%活性,可替代化学去渍剂;低温淀粉酶10℃下活力保留70%,为寒区洗碗粉节约能耗20%。四、未来展望借助合成生物学,将花园芽孢杆菌的降毒、促生、耐冷模块植入枯草底盘,可构建“一菌多效”工程菌,用于碱要害田、寒地蔬菜基地及城市绿化基质,让花园芽孢杆菌从“花园”走向更广阔的大地。功能层面,巴基斯坦赖氨酸芽孢杆菌表现出“促生-抗病-解决”三合一特性。

巴基斯坦赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus pakistanensis)是2009年从巴基斯坦干旱区大豆根际分离的新种,因肽聚糖含meso-二氨基庚二酸而非赖氨酸,在属内独树一帜。菌体革兰氏阳性、具周生鞭毛,可形成椭圆芽孢,能在10–28℃、pH6.5–9.0及0–6%NaCl范围内生长,并耐受150mM硼酸,被视为“中度耐硼”的旱地先锋。在抗逆机制上,该菌细胞膜以二磷脂酰甘油、磷酸乙醇胺为主,脂肪酸iso-C18:0占30%,赋予其高膜稳定性;基因组G+C含量37%,携带多重外排泵与渗透调节基因,可在干旱、盐碱环境中维持胞内水平衡。功能层面,巴基斯坦赖氨酸芽孢杆菌表现出“促生-抗病-解”三合一特性。实验室条件下,其IAA产量达118mg/L,明显高于同属菌株,可刺激小麦根长增加35%,干重提高28%;菌液处理后,花生根结线虫侵染率下降42%,对南方根结线虫卵孵化抑制率超60%,为线虫绿色防控提供新选择。此外,该菌对革兰氏阴性植物病原菌具有明显抑菌圈,代谢产物中的酶抑制剂可干扰细菌双功能酶系统,相关菌机制仍在持续解析。其芽孢可抗紫外、耐干燥,货架期长达24个月,为商品化奠定基础。寡噬香鞘氨醇单胞菌
侄子根瘤菌是土壤里的微型氮厂,直径不过微米,却能把天空搬上餐桌。Roseivivax halodurans
苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)是土壤里走出的“生物导弹”。它在芽孢形成时同步合成伴胞晶体,内藏δ-内;当鳞翅目幼虫咬食叶片,晶体被碱性肠液溶肽插入中肠上皮,几分钟内停止取食,芽孢乘虚进入血腔,引发败血症,害虫两日后饥饿而亡 。田间每亩用200毫升Bt悬浮剂,可将菜青虫、稻纵卷叶螟、玉米螟等130余种害虫的种群压到经济阈值以下,且对瓢虫、蜜蜂几乎无害 。因其安全无残留,我国年产量已达3.5万吨,覆盖333万公顷农田,成为用量比较大的微生物杀虫剂 。科学家把Cry基因导入棉花、水稻,培育的Bt作物毕生自带抗虫盾,减少农药喷洒七成以上 。从茶园到玉米地,再到防蚊孑孓的水塘,Bt用显微镜下的臂膀,为人类守住绿色丰收与清洁水源 。Roseivivax halodurans