Thioredoxin-NP-27是一种肠激酶的底物,用于检测肠激酶的活性。它是由硫氧还蛋白和NP-27融合而成,中间通过肠激酶的酶切位点(DDDDK)连接。这种底物在经过肠激酶酶切后,可以通过SDS-PAGE电泳观察到分子量分别为18kDa和27kDa的两条带。肠激酶是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶,它在Lys的C端水解多肽。肠激酶可以将胰蛋白酶原转变为胰酶,也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。在37℃,16小时内将0.5mg的反应底物Thioredoxin-NP-27切割为NP-27达95%所需的酶量定义为一个单位。肠激酶的活性单位定义为在37℃,16小时内将0.5毫克的Thioredoxin-NP-2795%降解为NP-27所需要的酶量。这种酶在基因工程产品开发中具有广泛的应用,特别是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂。Thioredoxin-NP-27产品的优势在于它符合GB/T41907-2022标准,适用于肠激酶活性检测的底物。产品保存条件为-30~-15℃,运输条件为≤0℃,以确保其稳定性和活性。使用时,应按照产品说明进行操作,并注意安全防护措施。根据Addgene、MolecularCloud以及实验室自行寄出的数据显示,pCas已被使用723次,pTargetF已被使用615次。浙江九价HPV疫苗开发服务技术服务临床前研究

DNA Marker I Plus:精细的DNA分子量标准DNA Marker I Plus 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小和进行粗略定量。它由7条线状双链DNA条带组成,覆盖100 bp至700 bp的范围,特别适合用于小片段DNA的分析。产品特点组成:包含100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp的DNA条带,其中400 bp条带加亮显示。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,使用时无需额外添加,直接上样。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀。稳定性高:在室温下可稳定保存三个月,长期保存建议置于-20℃。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融,以防止核酸酶污染导致条带降解。避免加热:使用前无需加热,直接上样。电泳缓冲液:及时更换电泳缓冲液,使用高质量的琼脂糖,以获得比较好分离效果。染料选择:如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。应用场景DNA Marker I Plus 适用于常规PCR产物、基因组DNA片段等的大小鉴定,特别适合需要精确测定DNA片段大小的实验,如基因编辑验证、小片段插入/缺失分析等。黑龙江重组蛋白定制服务技术服务技术服务通过基因工程技术,将编码抗体的基因插入到表达载体中,并在适当的表达系统中进行高效表达。

DNA Marker IV:精细的DNA分子量标准DNA Marker IV 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小和进行粗略定量。它由多条线状双链DNA片段组成,能够为DNA分析提供精确的分子量参考。产品特点组成:DNA Marker IV 由6-7条线状双链DNA片段组成,具体片段大小包括200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、3000 bp、4500 bp和7000 bp。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,使用时无需额外添加,直接上样。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀。稳定性高:在室温下可稳定保存六个月,长期保存建议置于-20℃。使用方法上样量:建议每次取2-5 µL直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:推荐使用1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶,1×TAE或0.5-1×TBE缓冲液,电压4-10 V/cm,电泳时间20-40分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,紫外灯下观察。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融。琼脂糖质量:电泳时应尽量选用质量好的琼脂糖,以获得比较好分离效果。染料选择:如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。
重组蛋白表达服务是生物技术领域的一个重要分支,它涉及到使用各种生物表达系统来生产特定的重组蛋白,这些蛋白通常用于临床前研究、药物开发、疫苗制备等。以下是重组蛋白表达服务在临床前研究中的一些关键应用和技术要点:1.目标蛋白的选择与设计:-根据研究目的选择合适的目标蛋白,可能包括蛋白、酶、抗体、病毒抗原等。-设计蛋白序列时,可能需要进行突变、融合标签或优化密码子以提高表达效率。2.表达系统的选取:-选择适合目标蛋白的表达系统,如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞等,每个系统都有其特定优势和局限性。3.载体构建:-构建含有目标蛋白基因的表达载体,选择合适的启动子、标记基因和抗性基因。4.蛋白表达与优化:-将构建好的载体转化到宿主细胞中,进行蛋白表达。-通过优化诱导条件、培养时间和温度等参数来提高蛋白的表达量和可溶性。5.翻译后修饰:-根据蛋白的功能需求,进行必要的翻译后修饰,如磷酸化、糖基化等。6.蛋白纯化:-使用色谱等技术对表达的蛋白进行纯化,确保蛋白的纯度和活性。7.功能性验证:-对纯化后的蛋白进行功能性验证,确保其生物学活性和稳定性。胶原蛋白是脊椎动物的主要结构蛋白。它在为细胞提供支撑支架方面起着至关重要的作用,从而影响细胞的存活。

逆转录酶的热稳定性对实验结果有影响,主要体现在以下几个方面:1.**提高cDNA合成的效率和产量**:热稳定性高的逆转录酶可以在较高的反应温度下工作,有助于使具有坚固二级结构和/或高GC含量的RNA变性,使得逆转录酶能够更有效地读取序列。这样,在较高反应温度下的逆转录能够实现全长cDNA合成,产量更高,进而使RNA能够更好地逆转录为cDNA。2.**减少RNA的二级结构影响**:高温有助于减少RNA分子的二级结构,这对于高效合成全长cDNA尤为重要。一些经过基因工程改造的逆转录酶可以耐受55℃的高温,这种高度耐热的逆转录酶特别适用于从富含GC的RNA模板合成cDNA。3.**增强引物与目标基因结合的特异性**:在一步法RT-PCR中,使用热稳定性的逆转录酶可以在较高温度下进行逆转录,增强引物与目标基因结合的特异性。这种策略可以在随后的PCR中增加产量和降低背景干扰。4.**提高对抑制剂的耐受性**:具有高合成能力的逆转录酶对可能来源于RNA的常见抑制剂具有抗性。这些抑制剂包括来自血液和粪便的肝素和胆汁盐,来自土壤和植物的腐殖酸和多酚,以及来自福尔马林固定,石蜡包埋(FFPE)样品的福尔马林和石蜡。position:absolute;left:334px;top:263px;">允许目标蛋白、具有不同亚基结构的多聚体蛋白的多个拷贝,或者表达目标蛋白及其同源结合伙伴。安徽汉逊酵母表达HPV技术服务技术服务
重组蛋白在医学、生物技术、生物制药和工业生产等领域中得到了广泛的应用。浙江九价HPV疫苗开发服务技术服务临床前研究
Tris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE):高效、稳定的电泳缓冲液Tris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE)是一种广应用于分子生物学实验的高效缓冲液,尤其适用于核酸电泳。其主要成分包括900 mM Tris-磷酸和20 mM EDTA。这种缓冲液经过特殊处理,能够提供稳定的pH环境,确保核酸在电泳过程中的完整性和清晰的分离效果。产品特点高效分离:10×TPE缓冲液在稀释为1×工作液后,能够提供稳定的pH值和离子强度,特别适合分离小片段核酸。稳定性高:该缓冲液的高浓度设计使其在储存和使用过程中更加稳定,不易受环境因素影响。兼容性强:适用于多种核酸染料(如EB或GoldView),并可用于琼脂糖凝胶电泳。RNase-free:某些品牌提供无RNase污染的版本,适用于RNA电泳。使用方法稀释:使用时需将10×TPE缓冲液用去离子水稀释至1×工作液,例如取10 mL的10×TPE加入90 mL去离子水。制备凝胶:用稀释后的1×TPE缓冲液制备琼脂糖凝胶。电泳操作:将核酸样品加入凝胶孔中,使用1×TPE缓冲液进行电泳。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料对凝胶进行染色,并在紫外透射仪下观察结果。注意事项避免污染:使用时需注意避免核酸酶污染,确保实验环境和试剂的纯净。浙江九价HPV疫苗开发服务技术服务临床前研究
除了CRISPR-Cas9技术,还有其他几种基因编辑技术可以用于金黄色葡萄球菌的研究:1.单碱基编辑技术:这是一种新型的基因编辑技术,可以在不切割DNA双链的情况下实现基因的定点突变。季泉江教授课题组与中国科学院北京基因组所韩大力研究员课题组合作,在金黄色葡萄球菌中建立了单碱基编辑技术,通过融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脱氨酶(APOBEC1),实现了高效单碱基编辑,有助于研究耐药机制和开发新型手段。2.同源重组(HR)修复技术:在某些细菌中,可以通过同源重组机制对CRISPR-Cas9系统产生的双链DNA断裂进行修复,实现基因的精确编辑。例如,在谷氨酸棒杆菌中,利用CRI...