应根据所检测指标的要求,需采取不同策略处理。在如今分子生物学当道的现实背景下,动物实验除了对实验动物的体征及生理指标进行的监控外,各种分子检测甚至是组学检测也开始大行其道,动物实验结束之后的机制研究成为了实验的重头戏。一般来说,动物实验检测对象主要包括:(1)体液中各类因子定性及定量检测由于此类检测对象多为蛋白及各类小分子物质,因此在取样过程中应注意防止此类物质降解,在获取后,应及时置于温(≤-80℃)进行保存,在后续实验过程中,也应当注意保存条件的稳定性,避免反复冻融。常用的方法便是酶联免疫吸附测定(ELISA),除此之外,可利用生化分析仪及不同检测方法的试剂盒(比色法、比浊法等)方法对各类生化指标及因子进行定性及定量检测。(2)组织病理、生理变化及免疫组化检测常用的病理检测多使用H&E染色对细胞质及细胞核进行染色标记,以观察细胞变化。除此之外,许多特殊染色也在病理生理变化中得到了应用,如利用Masson染色检测组织纤维化病变,Nissl染色检测神经元损伤,β-半乳糖甘酶染色检测细胞衰老等。此外,还可以通过免疫组化技术对某些特异性标记物进行免疫显色检测,达到原位定性或定量检测的目的。。放血致失血性贫血小鼠模型。湖南裸鼠动物模型手术

进而使一些生长因子受体磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周龄雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮肤。在DMBA涂抹一周后,每周两次将TPA(40nmol)施用到相同部位。模型验证:几周后,小鼠背部皮肤上出现色素沉着斑点。组织学研究表明,小鼠真皮组织中色素细胞积累,某些色素细胞表现出嵌套的形态学模式。缺点:化学诱导黑素瘤小鼠模型缺乏与人类疾病的临床相关性。另外,此类模型可用于研究阳光对黑色素细胞痔转化为侵袭性的黑色素瘤的过程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系统功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前应用多的模型。应用:移植接种的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位发展、转移的一些特点,多用于抗和转移药物评估。1同种移植模型同种移植模型是将小鼠黑素瘤细胞接种到具有相同遗传背景的小鼠中获得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。优点:同种移植模型具有免疫能力,可通过黑色素细胞与免疫细胞之间固有的相互作用来研究黑色素瘤与微环境的关系。西藏C57动物模型造模恶性黑色素瘤是起源于神经嵴的黑色素细胞恶性。

四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠模型【方法】1、将大鼠随机分配至2组中,每组5只,正常喂食喂水7d后进行试验;2、大鼠体重为200g±10g,按组别给予药物:生理盐水组每只腹腔注射1ml生理盐水、模型组每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各组药物注射24h后取材进行相关检测(注:注射前按比例混合四氯化碳:橄榄油=1:)【评定】给予四氯化碳后TP含量下降,ALT和AST含量上升【检测】生理盐水组肝索结构清晰,血管内无淤血,血管周围无炎症病灶,肝小叶结构清晰;给予四氯化碳后肝索排列紊乱,结构不清,存在大量坏死区域且肝索结构消失,有大小不一的空泡结构,多数血管内有淤血并伴有粉染蛋白样物质,血管周围有炎症反应灶,少量红细胞渗出;西维来司钠介入后肝索排列不清晰,存在部分坏死区域且肝索结构消失,有大小不一的空泡结构,少数血管内有淤血并伴有粉染蛋白样物质,血管周围有炎症反应灶,极少量红细胞渗出。
所用仪器为bio-rad的化学发光凝胶成像系统。结果见图1中c和d,可以看出,通过免疫印迹(westernblot)的方法证明了gm20541蛋白在小鼠脑、肝脏、视网膜、心脏、肾脏以及脾中均有表达。实施例2本实施例以小鼠为目标动物,对本发明提供的视网膜色素变性疾病模型的构建方法进行说明,gm20541基因敲除的路线如图2所示,具体操作如下:基因敲除小鼠获取步骤:1将与小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有报告基因gfp的表达框、有neo抗性基因的表达框、两端有同向排列loxp位点的第3外显子和3’端臂克隆到bac载体(图2)以用于替换欲敲除的gm20541基因第3个外显子;2利用dna同源重组技术将gm20541基因中的第3个外显子替换,得到gm20541基因条件性敲除的小鼠胚胎干细胞;3利用步骤2得到的胚胎干细胞制备得到含gm20541基因敲除细胞的嵌合体小鼠(图2);4将步骤3得到的嵌合体小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中筛选出gm20541基因敲除的杂合子小鼠(图2)。鉴定:实施例2中长距离pcr鉴定阳性子一代鼠的实验结果,扩增5’端长臂使用引物对gm5’lrf和sa3’r,扩增产物为。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。结果见图3中a。骨质疏松症是以骨量减少及骨组织微观结构为特征的一种全身性骨骼疾病,伴有骨的脆性增加、易于发生骨折。

所述高原光照环境模拟装置15包括可见暖光系统和照明亮度无极控制系统,所述可见暖光系统设置饲养仓2顶部。本实施例的工作原理:本系统集成了可见暖光系统(可模拟高原红外线和紫外线)与照明亮度无极控制系统,需要灯光时,可通过灯光系统开启紫外灯以及照明灯,并可根据所需实现亮度调节,通过日光灯加紫外线灯来实现高原高紫外线光照环境。实施例5在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统,所述高原温度环境模拟装置16包括降温系统、升温系统、温控系统和温度采集显示系统。本实施例的工作原理:本系统配置降温系统、升温系统、温控系统与温度采集显示系统使系统内温度可无极调控,以保障海拔(3000m~7000m)高原温度环境进行模拟,温度调节通过冷暖风机来实现,就是和空调一样的原理。实施例6在实施例1的基础上提供的一种高原性人类疾病模型制备环境模拟系统,所述高原湿度环境模拟装置17包括加湿系统、除湿系统、湿度控制系统和湿度采集显示系统。本实施例的工作原理:本系统配置加湿系统、除湿系统、湿度控制系统与湿度采集显示系统使系统内湿度可无极调控,以保障海拔(3000m~7000m)高原湿度环境进行模拟。因此,外科结扎胆总管并使胆总管完全阻塞已成为引起啮齿动物梗阻性胆汁淤积性损伤的常用模型。北京脑定位动物模型饲养
高脂饲料致高脂血症大鼠模型。湖南裸鼠动物模型手术
糖尿病足大鼠模型【目的】构建糖尿病足大鼠模型;【材料】1、材料:STZ药物、注射器、柠檬酸、柠檬酸三钠;2、试剂配制:1)柠檬酸纳缓冲液配制:A液十B液=1:,PH=;A液:柠檬酸mL;B液:朽檬酸三纳2)STZ液配制:55mg/kg(避光,现配现用10min内注射);3、糖尿病模型构建方法:1)大鼠术前禁食12h;2)按55ug/g注射.连续3天注射,对照组注射柠檬酸缓冲液,造模组注射STZ液,注射后不禁水、禁食2-4h;3)STZ注射结束5天后空腹测血糖,血糖值高于12mmol/L选入实验组;【方法】方法一:细菌悬浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周时,后足背侧注射l0ul金黄色葡萄球菌悬浮液,造成糖尿病肢端的动物模型;2、后续观察伤口情况;方法二:皮肤划伤造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手术剪做一个圆形皮肤创口,直径5mm;2、后续每日观察伤口情况,作好记录。湖南裸鼠动物模型手术