如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。 2)如果目的样本也不在滤过液中,那么: a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。益启生物公司主营超滤浓缩管销售。虹口区默克离心浓缩管商家
高浓度样品浓缩 Centriprep®超滤管 Centriprep®超滤管是一次性使用的离心管,可以用于2-15mL生物样品的纯化、浓缩、脱盐等过滤应用。这种离心超滤管流速很快,设计紧凑,螺旋盖使用起来非常方便,过滤收集管内置低吸附的Ultracel®再生纤维素膜,装有气密盖。 优点与应用 特有的反向流操作模式,较大的死体积 采用Ultracel®膜,用于浓缩和纯化富含颗粒物 的高浓度样品,样品回收率>90% 配合标准的50mL离心管吊篮式转子使用 从发酵培养基、细胞培养基、细胞裂解液中分 离低分子量溶质。虹口区默克离心浓缩管商家超滤浓缩管的系列有很多种。
特点与优点: 特别的反转离心回收设计,滞留体积很小,样品损失少, 样品回收率通常>90% 浓缩倍数达到50-200倍 Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低 特别设计的死体积防止离干,保证样品回收率和活性 有四种截留分子量供选择 法医gDNA鉴定、PCR产物纯化与小分子分离 Microcon® 超滤管 Microcon®为横膜式超滤管,没有死体积,用于大分子样品的浓缩、脱 盐、换液都非常高效方便。实际应用中还常用于大分子与其它分子的分 离,比如蛋白酶切后的处理及药物结合率分析等等。
创新的纯化 - 浓缩 - 换液一体化系统 Amicon® Pro 纯化超滤系统 目前的蛋白纯化常常包括很多步骤,用到多种器具,却又因此带来蛋白降解和损失的问题。为了避免因样品转移带来的各种风险,减少您在样品孵育、漂洗、洗脱、浓缩及换液各步上耗费的时间,默克密理博的研发团队创新地推出了Amicon®Pro一体化纯化超滤系统。Amicon®Pro提供了对小量蛋白样品的标准化操作,使纯化浓缩蛋白变得简便高效,数据稳定易得。 开放的设计使您可以根据实际需要灵活使用,Amicon®Pro将成为实验室小量蛋白纯化、浓缩、换液各种操作的多功能工具。超滤浓缩管的优点有很多。
用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜, 75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。您知道益启生物公司的超滤浓缩管系列都有哪些吗?金山区默克离心浓缩管代理价
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微滤中膜的孔径大小通常以微米计,表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据 NMWL分级,有时也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见,实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时,孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时,需要谨慎地选择合适的NMWL膜和设备。虹口区默克离心浓缩管商家