荧光定量PCR仪具有高灵敏度、高特异性和精确定量等特点,被广泛应用于多个行业,以下是一些主要的应用行业:农业育种行业作物基因检测:用于检测作物中的转基因成分,确保转基因作物的安全性和合规性。同时,可对作物的优良基因进行筛选和鉴定,如抗病虫害基因、抗逆基因、质量品质基因等,加速作物品种改良和选育进程。种子纯度鉴定:通过分析种子的 DNA 指纹图谱,准确鉴定种子的纯度和真实性,防止假冒伪劣种子流入市场,保障农业生产的质量和效益。植物病害监测:快速检测植物病原体,如病毒、细菌、等,及时发现植物病害的发生和流行趋势,为制定有效的病害防治措施提供依据,减少农作物损失。对于一些难以培养或培养周期较长的细菌,荧光定量 PCR 仪可以快速检测其特定的核酸序列,实现早期诊断。无锡HEX荧光定量PCR仪询问报价

VIC与 FAM 类似,是一种荧光报告基团,可标记在引物或探针上用于荧光定量 PCR。它在 PCR 过程中,随着引物或探针与目标 DNA 的结合以及 PCR 产物的扩增,会发出特定波长的荧光,其荧光信号强度与 PCR 产物的量成正比,通过检测荧光信号的变化来实现对目标 DNA 的定量分析。特点:激发波长和发射波长与 FAM 有所不同,激发波长约为 538nm,发射波长约为 554nm,荧光颜色为黄绿色。VIC 常用于多重荧光定量 PCR 中,可与 FAM 等其他荧光染料同时使用,实现对多个不同目标基因的同时检测,因为其光谱特性与其他染料有较好的区分度,能避免荧光信号之间的相互干扰。荧光定量PCR仪厂家直销它们具有极低的噪声水平和较高的量子效率,能够检测到极少量的荧光光子,从而实现对低丰度核酸的检测。

以下是判断荧光定量 PCR 仪光路系统是否需要校准的方法:熔解曲线异常峰形改变:熔解曲线的峰形变得不规则、宽化或出现多个峰,而样品和实验条件均无变化时,可能是光路系统对荧光信号的检测精度下降,导致熔解曲线的分析结果不准确,此时需要考虑对光路系统进行校准。Tm 值偏移:熔解曲线的 Tm 值(解链温度)与预期值相比出现明显偏移,且排除了引物设计、反应条件等因素的影响,可能是光路系统的荧光检测存在误差,影响了对 DNA 双链解链过程的准确监测,需要对光路进行检查和校准。
荧光标记探针法原理:使用一种特异性的荧光标记探针,它能与目标 DNA 序列杂交。探针的 5' 端标记有荧光报告基团,3' 端标记有荧光淬灭基团。在游离状态下,报告基团发出的荧光会被淬灭基团吸收,无法检测到荧光信号。当 PCR 反应进行时,DNA 聚合酶在延伸引物的过程中,会将探针水解,使报告基团与淬灭基团分离,报告基团发出的荧光信号就可以被仪器检测到。每扩增一条 DNA 链,就会有一个探针被水解,释放出一个荧光信号,荧光信号的强度与 PCR 产物的数量成正比。过程:在 PCR 反应的退火阶段,荧光标记探针会与目标 DNA 序列特异性结合。在延伸阶段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性会将探针从 5' 端开始逐个水解,使报告基团游离出来,产生荧光信号。仪器会在每个循环的延伸阶段检测荧光信号的强度,随着 PCR 反应的进行,荧光信号逐渐增强,同样可以得到 Ct 值。定量依据:与荧光染料法类似,通过标准品建立标准曲线,根据待测样本的 Ct 值在标准曲线上计算出起始模板量。由于荧光标记探针具有特异性,能与特定的目标序列杂交,因此可以更准确地对目标基因进行定量分析,减少非特异性扩增的干扰。通过婚前或孕前筛查,能够评估夫妻双方生育患病子女的风险,为遗传咨询和生育指导提供重要信息。

SYBR Green I是一种双链 DNA 结合染料,它能非特异性地嵌入双链 DNA 的小沟中。在游离状态下,SYBR Green I 发出微弱的荧光,但当它与双链 DNA 结合后,荧光信号会明显增强。在荧光定量 PCR 反应中,随着 PCR 产物的不断合成,SYBR Green I 与双链 DNA 结合,荧光信号强度不断增加,通过检测荧光强度的变化来反映 PCR 产物的量,从而实现对起始模板的定量分析。特点:能与所有双链 DNA 结合,不依赖于特定的序列,因此可用于各种 DNA 模板的定量分析,通用性强。其激发波长约为 497nm,发射波长约为 520nm,荧光颜色为绿色。但由于它非特异性结合双链 DNA,可能会对引物二聚体等非特异性产物也产生荧光信号,需要通过熔解曲线分析等方法来区分特异性产物和非特异性产物。准确的热循环系统对于保证 PCR 反应的特异性和效率至关重要,进而影响检测灵敏度。常州Texas Red荧光定量PCR仪市场报价
若温度控制不准确,会导致 PCR 反应效率降低、特异性下降,产生非特异性扩增,影响荧光信号准确性;无锡HEX荧光定量PCR仪询问报价
实时荧光定量 PCR 仪在多个领域都有广泛的应用,以下是一些主要的应用领域:作物遗传育种:在作物遗传改良中,可用于筛选优良基因、鉴定杂种优势以及检测转基因作物中外源基因的整合和表达情况。例如,通过检测与作物抗逆性、产量等相关基因的表达水平,筛选出具有优良性状的品种,加快育种进程。植物病害检测:快速检测植物病原体,如病毒、、细菌等,及时发现植物病害,采取相应的防治措施,保障农作物的产量和质量。例如,检测果树中的病毒情况,为果树的病虫害防治提供依据。无锡HEX荧光定量PCR仪询问报价