无血清细胞冻存液:产品优势:1.化学成分明确,无任何外源蛋白和血清,适用于各类动物细胞株冻存。2.无需程序降温,细胞复苏率90%以上。3.冻存细胞可直接存放于-80℃冰箱,稳定保存数年。4.即用型产品,4℃可稳定保存。细胞冻存:1.收集融合率>90%的对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于离心管中。2.1000rmp离心5分钟,去除离心管中的上清液,收集细胞沉淀。3.加入适量细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为1x106~1x107cells/mL。头轻柔吹打混匀,Z成细胞悬液。4.将离心管中的细胞悬液分装与细胞冻存管中,每管1mL或1.5mL。5.将分装好的细胞直接冻存于-80℃冰箱中,可稳定冻存数年。6.如若长期保存,可在次日转移至液氮中。快速冻存即不需要经过梯度降温,直接将细胞放入-80 ℃冰箱24h。南京无血清细胞冻存液产品介绍

细胞冷冻的原理:细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以比较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。上海正规无血清细胞冻存液服务电话细胞冻存管一定要保证完全密封,否则在复苏过程中有可能会炸。

无血清细胞冻存液对比含血清细胞冻存液的优势:传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,统称为含血清细胞冻存液。含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法,如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟,然后移至-20℃冰箱30分钟,再移至-80℃冰箱保存16-18个小时(或隔夜),较后才移至液氮罐中进行长期的储存。(其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量的死亡。)
无血清细胞冻存液:采用patent的冻存配方,用包括重组人血白蛋白等多种蛋白组分替代了血清的用途。用包括DMSO在内的复合冻存保护剂替代了单一的DMSO的保护作用。复合保护剂的内部保护剂,易于穿透细胞膜,避免在细胞冻存过程中细胞内部的水分子形成冰晶损伤细胞;外部保护剂,可在溶液形成冰晶之前,在细胞膜外部竞争性的结合细胞膜表面的水分子,从而降低细胞外溶液的电解质浓度,减少阳离子进入细胞的数量。在细胞内部与外部的协同保护作用下,明显降低了温度迅速下降与温度上升对细胞的损害,因此大幅度提高了细胞经过冻存后的复苏存活率。无血清冻存液用途:细胞保藏中心,无血清细胞冻存液用于细胞株的长期保存。

细胞冻存和复苏操作步骤:细胞冻存和复苏采取“慢冻快融”的原则,慢速冷冻可使细胞内的水份渗出细胞外,减少细胞内形成冰晶的机会,快融以保证细胞外结晶快速融化,避免慢速融化水份渗入细胞内,再次形成胞内冰晶造成对细胞的损伤。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以比较大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。无血清细胞冻存液产品性能:冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分。南京正规无血清细胞冻存液厂家现货
无血清细胞冻存液产品性能:胎牛血清取自牛,因此,难以应用到需要避免接触动物源的应用领域。南京无血清细胞冻存液产品介绍
无血清细胞冻存液,通用于人和各种动物细胞株。特别配方(主要成分为DMSO和氨基酸)具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。产品特色:不含动物源成分,病毒、霉菌和支原体等污染可能性低,各批产品之间有更高的产品质量一致性。成分明确,无批次差异。可直接存放于-80℃冰箱冻存,无需经过费时的程序降温过程(省时、省力、省钱)。独特配方有效提高细胞冻存存活率及复苏率。即用型,无需现配,即开即用。通用型,适用于冻存各种细胞系,原代细胞。可微量,原位冻存,例如杂交瘤细胞的冻存,省时高效。存储条件:储存于4℃以下,质量保障期从产品的生产日期起,为期两年。3个月以上没有使用冻存液计划时,尽可能-20℃冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低,推荐将产品分装成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。南京无血清细胞冻存液产品介绍
细胞冻存步骤说明:配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;离心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节存液中细胞的较终密度为5×106/ml~1×107/ml;将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5ml;在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可...