Recombinant HBsAg-preS2

在现代分子生物学研究中，实时荧光定量PCR（qPCR）已成为基因表达分析、病毒检测和基因定量的重要工具。其中，One Step RT-qPCR SYBR Green Kit凭借其独特的优势，成为众多科研工作者的优先试剂盒。简化操作流程，降低污染风险One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用一步法反应体系，将逆转录（RT）和qPCR反应集成在同一反应管中完成。这种设计不仅简化了实验操作步骤，减少了人为误差，还有效降低了因反复开盖导致的样品污染风险。例如，传统的两步法需要分别进行逆转录和qPCR反应，操作复杂且污染风险较高，而一步法试剂盒则避免了这些问题。高灵敏度与高特异性该试剂盒使用高效的逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶，结合优化的反应缓冲体系，能够显著提高反应的灵敏度和特异性。其检测灵敏度可达极低浓度的RNA样本，例如在某些实验中，即使RNA浓度低至0.1 pg，也能实现精细检测。此外，试剂盒中添加了抑制非特异性扩增的组分，确保熔解曲线呈现单峰，进一步提高了检测的准确性。FnCas12a的双链或单链DNA靶标都能激发其反式剪切活性，即在形成三元复合物后，针对非特异序列ssDNA的剪切。Recombinant HBsAg-preS2

T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点：1.**基因编辑效率评估**：-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA，如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接（NHEJ）修复事件引入了突变，变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**：-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变，则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割，通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带，从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA，不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**：-收集细胞并提取基因组DNA，然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性，以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物，在37℃孵育15分钟。

牛痘DNA拓扑异构酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）与细菌DNA拓扑异构酶的主要区别如下：1.**来源不同**：-牛痘DNA拓扑异构酶I来源于牛痘病毒，是一种真核生物病毒中的酶。-细菌DNA拓扑异构酶则来源于原核生物，如大肠杆菌的ω蛋白等。2.**功能特性**：-牛痘DNA拓扑异构酶I能够解旋DNA的超螺旋结构，并且识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT]，与DNA形成共价连接形成稳定复合物，遇到DNA的5’-OH基团后，重新连接形成完整DNA链。-细菌DNA拓扑异构酶，如大肠杆菌的ω蛋白，主要功能是催化DNA链断开和结合的偶联反应，以改变DNA的拓扑结构。3.**活性条件**：-牛痘DNA拓扑异构酶I即使在Mg2+不存在的条件下也显示活性。-细菌DNA拓扑异构酶可能需要Mg2+等金属离子作为辅因子来发挥活性。4.**作用的DNA链**：-牛痘DNA拓扑异构酶I能使正负两方的超螺旋分子均形成松散型。-原核生物由来的DNA拓扑异构酶I只作用负链的超螺旋分子。5.**共价键形成**：-牛痘DNA拓扑异构酶I与DNA形成共价连接，此酯键中所贮存的能量可能在切断端的再结合上起着作用。-细菌DNA拓扑异构酶在原核生物中是游离型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端与酶形成共价键。

核酸内切酶VIII（EndonucleaseVIII）是一种来自大肠杆菌的DNA损伤修复酶，具有以下特点：1.**双功能活性**：核酸内切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**释放受损嘧啶碱基**：N-糖基化酶活性可以释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，生成一个脱嘌呤(apurinic,AP)位点。3.**切割AP位点**：AP裂解酶活性可以切割AP位点的3'和5'端，产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口(Gap)。4.**识别并切除受损碱基**：核酸内切酶VIII可以识别并切除多种受损碱基，包括尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。5.**与EndonucleaseIII的区别**：虽然核酸内切酶VIII与核酸内切酶III相似，但核酸内切酶VIII具有β和δ裂解酶活性，而核酸内切酶III具有β裂解酶活性。6.**应用领域**：核酸内切酶VIII可以应用于单细胞凝胶电泳、NGS建库中DNA损伤修复、酶法合成DNA中释放DNA链、碱洗脱，搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)进行含U片段的克隆等。

dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)：助力分子生物学实验的高效防污染解决方案在分子生物学实验中，PCR技术是基因扩增和检测的工具之一。然而，PCR产物的残留污染可能导致假阳性结果，严重影响实验的准确性和可靠性。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作为一种高效的防污染试剂，通过与尿嘧啶DNA糖苷酶（UDG）联合使用，能够有效解决这一问题。产品特点高纯度与稳定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高纯度的dATP、dCTP、dGTP和dUTP，纯度≥99%，确保实验的准确性和重复性。该产品在-20℃下可稳定保存24个月，使用时需避免反复冻融。防污染机制该产品通过在PCR反应中用dUTP替代dTTP，使扩增产物中掺入dU碱基。随后，UDG酶能够特异性地降解含有dU的DNA产物，从而有效去除残留的PCR产物污染。这种防污染系统特别适用于高通量PCR实验和需要严格控制假阳性的应用场景。兼容性与适用性dNTP/dUTPMixture适用于多种DNA聚合酶，如Taq酶和BstDNA聚合酶等，可用于PCR、real-timePCR、RT-PCR、引物延伸反应以及cDNA合成等多种分子生物学实验。然而，需要注意的是，某些具有校正活性的酶可能不适用于该混合物，具体需参考酶的产品说明书。在基因编辑中，Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或编辑工具的克隆，减少克隆过程中的非目标突变。Recombinant Human TFPI Protein,His-Avi Tag

使用体外转录技术合成gRNA，确保gRNA的质量和纯度，这对后续实验的成功至关重要 。Recombinant HBsAg-preS2

Taq DNA Polymerase：科研中的关键工具Taq DNA Polymerase 是一种应用于分子生物学研究中的热稳定DNA聚合酶，其独特的性能和特点使其成为PCR技术的重要工具。产品特点Taq DNA Polymerase 的特点是其出色的耐热性。该酶来源于嗜热菌Thermus aquaticus，能够在高温条件下保持活性，适催化温度为75-80℃，即使在95℃下保温半小时，仍能保留50%以上的活性。此外，Taq酶具有5'→3'聚合酶活性，能够在PCR反应中高效地合成DNA链。然而，它缺乏3'→5'校正活性，这意味着在扩增过程中可能会引入少量错误，但对于大多数常规PCR应用而言，这种特性并不影响其好的使用。Taq酶的另一个重要特性是其5'→3'外切酶活性，这一特性使其在探针法qPCR中具有独特的优势。此外，Taq酶在PCR产物的3'末端会添加一个A碱基，这使得PCR产物可以直接用于TA克隆。Recombinant HBsAg-preS2