香港濒危物种精子分析精子动力分析

精液显微镜检查(1)精子存活率：排精后30～60分钟，正常精子存活率应为80%～90%，精子存活率降低是导致不育的重要原因。(2)精子活动力：指精子活动状态，也是指活动精子的质量。世界卫生组织(WHO)推荐将精子活动力分为4级：①精子活动好，运动迅速，活泼有力，直线向前运动；②精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动，带有回旋；③精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差；④死精子，精子完全不活动。正常精子活动力应在③级以上，若＞40%的精子活动不良(③、④)级，常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低，主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性***，应用某些药物如抗疟药、雄***等所致。在精子研发的历程中，计算机辅助精子检测经历了黑白图像机、彩色图像检测。目前先进的是荧光精子图像检测。香港濒危物种精子分析精子动力分析

美国HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOXIVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。马精子分析STR不同品牌CASA分析的结果差异较大，因此，更高效精确的精液质量检测系统对促进男科学发展具有重要的意义。

医生处置质量是指诊断质量‚是以当今医学科学知识、技术为基础依据症状来完成的。CASA系统可以为医生提供优于传统精子分析的手段和快速准确的分析结果［5］。CASA在医生处置质量方面的特点在于：①当CASA系统的参数设定和样品的处理方式（温度、稀释法、缓冲液）确定时‚通过个体内和个体间的比较‚CASA的精子活力重复性明显好于直观评估［6］。②实验室数据资料是质量的一部分‚CASA系统所有数据都是直接在线获得的‚因此明显优于其他方法［6］‚记录传递到数据库的过程无错误发生‚可清楚准确地打印出结果。所有的数据可直接转换到数据库、能够对***前和***后测定的数据进行统计学比较［9］、质量控制数据的采集与保存、每天的标本测试记录以及许多其他报告等等‚如此大量数据的处理只有在计算机中才能完成。但是CASA系统的参数设定也许限制了其质量‚特别是在精子形态学检查中‚通过CASA系统对精子形态学特征进行分析［7］‚这些特征（细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它）可由操作者选择‚这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差［8］。就形态学分析而言‚传统方法的可变性远远大于CASA分析。

CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态，可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常，还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数，以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。与人工操作相比，自动化系统更具客观性，精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5]，这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比（Z%），和直线速度（VSL）的精子的百分比，与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的，而且没有显示临界值；高于临界值，妊娠率也不会进一步增加[7]。CASA系统操作简便，检测速度快，且重复性优于人工检测。

HamiltonThorneIVOS是一套整合了光学观察系统的精子动力分析仪。如今，IVOS已成为快速、准确、稳定可靠的进行精子分析的代名词。仪器特点：新款内建CDWriter!内部整合光学系统自动化，内置样品台可用于多种样品分析仪器操作简单提供满足需求的分析结果实时质量控制分析结果列表内部整合的光学系统IVOS是***一套内置光学系统的精子动力分析仪。与其它同类产品相比，IVOS并不采用显微镜持续照明方式，而是采用闪光拍摄方法。这种拍摄方法能够消除由于精子运动而造成的位置模糊。通过60祯/秒的拍摄速度，能够得到准确可靠的精子速度和运动参数分析结果。IVOS可在以下三种模式下分析精子样品：相差，明场和多波长荧光模式。自动化内置加热平台作为整合光学系统的一部分，由计算机控制的IVOS样品平台可在分析时提供准确的温度控制和位置定位。样品台的温度可在室温到40°C范围内调节，稳定度为0.5°C。分析区域的选择可选用自动或手动方式。样品台的温度和位置可实时显示在视频窗口中。IVOS还允许用户自己进行分析室设定，控制分析样品量。Hamilton Thorne精子分析仪具有良好的数据管理和报告生成功能，能够方便用户查阅和分享分析结果。香港人精子分析DSL

传统的CASA系统仍使用传统阈值图像处理方法，准确率有待提高。香港濒危物种精子分析精子动力分析

前沿性检查：目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为，氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素；新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分，强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求，增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此，手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。香港濒危物种精子分析精子动力分析