牛痘DNA拓扑异构酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)在实验室中的使用主要涉及以下几个步骤:1.**DNA载体连接**:-牛痘DNA拓扑异构酶I可以用于DNA载体连接,特别是在TOPO克隆载体制备中。它能够识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT],并与DNA形成共价连接形成稳定复合物,遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。2.**接头连接**:-在NGS建库中,牛痘DNA拓扑异构酶I可用于接头连接。这包括将含有特定序列的接头A和接头B与酶一起孵育,以实现DNA片段的连接。3.**操作步骤**:-**质粒解旋**:将超螺旋质粒DNA与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现质粒的解旋。-**接头连接**:将接头A(含CCCTT序列)和接头B(含5’OH)与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现接头的连接。4.**注意事项**:-双链接头A通常5’端做NH2封闭修饰,以防止自连接;接头A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴,再长的尾巴会导致连接效率大幅下降。-双链接头B的5’端必须包含-OH。-由于该酶应用广,在不同的实验中使用策略不同,需要灵活运用,并根据具体文献进行调整。
UBE2L3与其他E2酶的区别在于它具有特定的结构特征,它包含一个高度保守的UBC结构域,这是E2酶家族的标志。Recombinant Human Siglec-5/CD170 Protein,His-Avi Tag

5'-3'外切核酸酶活性是指DNA聚合酶能够从DNA链的5'端向3'端切除核苷酸的能力。这种活性通常用于修复受损的DNA或去除错误配对的核苷酸。具体来说,5'-3'外切核酸酶活性可以在DNA合成过程中切除前方的核苷酸,帮助错误或不需要的序列,从而确保DNA的正确复制和修复。在DNA聚合酶中,5'-3'外切核酸酶活性与聚合酶活性相辅相成。聚合酶在合成新链时,5'-3'外切酶活性可以在发现错误时进行修正,确保合成的DNA链的准确性。例如,E.coliDNA聚合酶I具有这种外切酶活性,可以在合成过程中去除错误的核苷酸,从而提高DNA的保真度。需要注意的是,BstDNAPolymerase,LargeFragment不具有5'-3'外切核酸酶活性,这使得它在某些应用中更为稳定,特别是在等温扩增反应中,如LAMP(环介导等温扩增)和RCA(滚环扩增)等。Recombinant Human Uteroglobin可以利用现有的计算工具,如CRISPR design tools,预测gRNA的活性和特异性,以辅助实验设计 。

BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶大片段)是一种常用于分子生物学实验的酶,特别是在等温DNA扩增技术中。以下是一些关于BstDNAPolymerase,LargeFragment的关键信息:1.**来源**:这种酶来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus),是一种热稳定的DNA聚合酶。2.**活性**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有5'到3'的DNA聚合酶活性,并且具有链置换活性,这使得它能够用于等温扩增反应,如环介导等温扩增(LAMP)。3.**热稳定性**:由于其嗜热特性,BstDNAPolymerase,LargeFragment能够在较高的温度下保持活性,通常在60-65°C。4.**应用**:-**等温扩增**:用于LAMP和其他等温扩增技术,这些技术不需要传统的热循环仪。-**全基因组扩增**:用于快速扩增少量DNA样本,以进行进一步的分析。-**突变检测**:在某些情况下,用于检测特定基因的突变。5.**优点**:-**高保真度**:与某些其他DNA聚合酶相比,BstDNAPolymerase,LargeFragment具有较高的保真度。-**快速扩增**:等温扩增技术可以在短时间内快速产生大量DNA。
磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种利用磁性纳米颗粒固相核酸富集技术来纯化质粒DNA的产品。它通常包括高性能纳米磁珠和独特的缓冲体系组合,通过裂解菌体后释放的DNA,能够有效地结合于磁珠表面,漂洗除杂后获得高质量的目的质粒。以下是磁珠法质粒小量抽提试剂盒的一些主要特点和应用:1.**快速简便**:操作步骤简单,无需多次离心,整个抽提过程通常只需20-25分钟。2.**高得率和纯度**:可以从1-5ml新鲜大肠杆菌菌液中分离纯化2-20µg高质量的质粒DNA。纯化得到的DNA质量高,完整性好,OD260/280比值一般为1.8~1.9之间,OD260/230比值大于2.0。3.**适用性广**:适用于1-5mL小体积高通量菌液质粒抽提,且抽提所得的质粒DNA可直接用于酶切、测序、文库筛选、连接和转化等各种下游分子生物学实验。4.**自动化兼容**:可整合移液法自动化仪器和磁棒法自动化仪器进行高通量提取实验。5.**安全性高**:操作过程中不涉及酚/氯仿等有毒试剂,更加环保和安全。6.**成本效益**:相比传统的离心柱法,磁珠法可以减少离心次数,获得完整性更好的质粒,且操作更为简便快捷。7.**操作灵活**:磁珠的使用量可灵活调节,适合不同体积和浓度的样品处理。在基因编辑中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或编辑工具的克隆,减少克隆过程中的非目标突变。

Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease,简称λExonuclease)是一种具有特定特性和应用的酶,以下是其主要特点和应用:1.**特异性作用**:λExonuclease是一种5'→3'核酸外切酶,能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**酶切活性**:对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低,不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**嗜磷酸性**:该酶具有非常强的嗜磷酸性,磷酸化的核酸链与非磷酸化的核酸链的切割效率相差达200倍以上。4.**切割效率**:Lambda核酸外切酶是一种具有高度持续性的碱性核酸外切酶,可以连续地将核酸切割成为单个碱基,切割比较高速率可以达到1000nt/S。5.**应用领域**:-生成单链PCR产物用于DNA测序。-DNA单链构象多态性(SSCP)分析。-滚环扩增。-从双链DNA片段生成单链DNA。-PCR产物的克隆。-质粒制备净化。6.**酶活性定义**:Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoproduce10nmolofacid-solubledeoxyribonucleotidefromdouble-strandedsubstrateinatotalreactionvolumeof50μlin30minutesat37ºCin1XLambdaExonucleaseReactionBufferwith1μgsonicatedduplex[3H]-DNA。去泛素化酶可以去除泛素化标记,这一步骤是泛素化过程的逆转过程,它允许细胞对泛素化事件进行精细调控。Recombinant Human IL-1 Rrp2/IL-1 R6 Protein,hFc Tag
中间的催化结构域以及 C 端结构域,这种多结构域的组成使 Tn5 转座酶能精细地与 DNA 相互作用并发挥其功能。Recombinant Human Siglec-5/CD170 Protein,His-Avi Tag
磁珠法提取的DNA通常指的是通过磁珠吸附技术从样本中纯化得到的核酸,而基因组DNA(gDNA)是指一个生物体细胞核中包含的全套遗传信息的DNA。两者的主要区别在于:1.**来源和组成**:-磁珠法提取的DNA可以是基因组DNA,也可以是质粒DNA、线粒体DNA等其他类型的DNA。它是一个广的概念,指的是通过磁珠法技术提取的任何类型的DNA。-基因组DNA特指一个生物体细胞核中的DNA,包含了所有的基因信息,以及可能的非编码区域。它通常包含了大量的碱基对,如人类基因组由大约30亿个碱基对组成。2.**纯度和应用**:-磁珠法提取的DNA的纯度和质量取决于提取过程中的裂解、吸附、洗涤和洗脱步骤,以及磁珠的质量和操作条件。高质量的磁珠法提取的DNA可以用于多种分子生物学实验,如PCR、克隆、测序等。-基因组DNA的提取通常需要考虑其完整性和纯度,以确保后续实验的准确性。基因组DNA提取的难点在于血液样本成分复杂,且白细胞体积占比低,因此提取纯化难度较高。3.**提取方法**:-磁珠法提取DNA是一种高效、快速的核酸提取技术,它利用磁珠表面修饰的特定官能团与核酸的特异性结合,通过外加磁场实现核酸与杂质的快速分离。Recombinant Human Siglec-5/CD170 Protein,His-Avi Tag
在生物科学的浩瀚宇宙中,AatII酶犹如一颗璀璨的星辰,以其独特的功能闪耀着。它是一种限制性核酸内切酶,宛如一位精细的“裁缝”,专门在DNA分子上施展“剪裁”技艺。AatII酶的识别序列是“GACGT”,一旦它在DNA链上找到这个特定的“密码”,便会毫不犹豫地在序列的特定位置将DNA链切断。这种精细的切割能力,让它在基因工程领域大放异彩。科学家们可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地“剪切”出来,就像从一幅巨大的拼图中精确地取出需要的那一块。在构建基因表达载体时,AatII酶更是不可或缺的助手。它可以将目的基因与载体DNA在特定位置切开,然后通过DNA连接酶将它们无缝拼接在一起,从而构建出...