计数精子分析VCL

检查具备条件

受检者，经历一段经常排精过程后，禁房事5－7天（上次排精到取标本间隔时间至少不得少于100小时）； [1]备大口有盖清洁干燥容器一个，以**方式获取精液，一次全部射入容器，盖上盖，记录标本离体时间； 贴身保温，30分钟内送到化验室，并向检验员提供标本取出时间。 精液常规观察：精液总容量（毫升），精子活动情况，精子密度（个/毫升），精液液化时间（标本取出到精液液化的时间），不动精子（个/高倍视野）等。见不动精子，须染色方可区分：不活动的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必须离心后检验，仍然找不到精子；方可报告无精。经三次取样化验，结果仍然找不到精子方可确认无精子症。 计算机辅助精子分析根据初估的精子浓度选择合适的检测方法，确保检测过程的准确性和可靠性‌。计数精子分析VCL

人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。广州人精子分析W.H.O 4IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点，能够捕捉到微小的细节和变化，进一步提高了精子分析的准确性。

精子检测是通过一系列检测方法来评估男性生育能力的指标之一。而检测方法的选择直接影响到检测的准确性和结果的可靠性。目前，常用的检测方法有手动计数法、显微镜计数法、电子显微镜计数法、精子运动轨迹分析法等。手动计数法是通过显微镜手动计算精液中精子数量的方法，该方法简单易行，但因操作者技能不同，容易出现误差。显微镜计数法是通过显微镜观察精液中精子数量的方法，该方法比手动计数法更加准确，但需要专业的技能和经验。电子显微镜计数法是通过电子显微镜观察精液中精子数量的方法，该方法非常准确，但需要昂贵的设备。精子运动轨迹分析法是通过计算机分析精子运动轨迹来判断精子活力和数量的方法，该方法不仅准确性，而且可以直观地显示精子的运动状态，但需要较为复杂的技术。除了以上常见的检测方法，还有一些新兴的检测方法，如流式细胞术、全自动分析系统等。这些检测方法虽然在检测精子数量、活力等方面具有一定优势，但由于技术上的限制和设备的昂贵，目前还没有得到广泛应用。在选择检测方法时，需要考虑检测的目的、检测的准确性和结果的可靠性等因素。同时，需要选择正规的医疗机构进行检测，避免因设备不足或技术不过关等因素导致检测结果出现误差。

方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。精子分析仪能分析与精子运动功能相关的各种参数。

扩展性检查：可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤，并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关，精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容，已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上，越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因，而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行，但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响，泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训，严格按照使用指南进行操作‌。广州濒危物种精子分析ALH

男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses，CASA)。计数精子分析VCL

二、生化及免疫学检验：5、精浆肉碱测定【正常参考值】浓度为239.56±l05.59umol/L。【临床意义】精浆肉碱测定精浆中的肉碱主要由附睾分泌，其次是精囊。精浆中肉碱分为游离肉碱和乙酰肉碱二种，附睾中含高浓度的肉碱，主要与精子在附睾成熟时所需的能量来源有关。现认为精浆肉碱含量和果糖含量的变化，常反映附睾、精囊的功能。精浆肉碱及果糖含量正常，表明附睾、精囊功能正常。当肉碱含量高于正常的50%，而果糖含量降低，则提示精囊功能障碍，附睾功能正常；精浆肉碱约为正常含量的50%左右，果糖含量正常，说明附睾功能障碍，精囊功能正常；而肉碱急剧下降，果糖含量亦减少，表示精囊、附睾功能均发生障碍。6、抗精子抗体(AsAb)测定【正常参考值】阴性。【临床意义】AsAb检测对不育原因检查有重要临床意义。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb，可抑制精子的活动，干扰精子的运行，阻碍精子穿透及精卵结合，使受精发生障碍。即使已经受精，也可能影响发育中的胚胎，造成免疫性流产。不育夫妇AsAb阳性者占25%-30%，当精子输出管道受阻、睾丸损伤、炎症、附睾等生殖系***时，系精子外逸而产生的自身抗体。计数精子分析VCL