二代测序——质量控制类问题
如何评估二代测序数据的质量:主要通过一些质量指标来评估,如Q值(质量值)分布,用于衡量每个碱基的测序质量;碱基含量分布,检查四种碱基的比例是否正常;GC含量分布,看是否与预期的基因组GC含量相符;序列重复度,评估数据中重复序列的比例;比对率,即测序数据与参考基因组比对上的比例等。影响二代测序质量的因素有哪些:样本质量是关键因素之一,如DNA的纯度、完整性和浓度等会影响文库构建和测序结果;文库构建过程中的操作不当,如片段化过度、接头连接效率低等;测序仪器的性能和运行状态,包括试剂的质量、测序芯片的质量、仪器的校准等;生物信息学分析过程中的参数设置和算法选择也会对**终的结果质量产生影响。 二代测序是为了改进一代测序通量过低的问题而出现的。湖北二代测序原理
二代测序技术的一些***研究进展②
植物基因组学研究领域 :
花生四倍体野生种基因组测序:河南农业大学殷冬梅教授团队和上海交通大学韦朝春教授团队联合发布了花生四倍体野生种近乎完整基因组 amon2.0 版本。该研究结合 ONT 超长读段、二代测序和 Hi-C 等多种测序技术,使基因组的连续性、完整性和准确性都得到了显著提高,为花生的遗传驯化和分子育种提供了重要的基因组数据信息资源。
长雄野生稻基因组解析:中科院昆明动物所王文研究组与云南省农科院粮食作物研究所胡凤益研究组等中外机构合作,利用二代测序技术成功组装出高质量的长雄野生稻基因组,并对其与近缘物种的分歧时间、基因的收缩扩张等进行了分析,还鉴定出一批可能影响地下茎以及自交不亲和性状的候选基因及代谢途径,为解析相关分子机制提供了重要线索。 河北二代测序二代测序是一种能够同时对数百万甚至数十个亿DNA片段进行测序的方法。
二代测序——基因组测序该测几个G?③
基因组测序所需的测序量通常用数据量来衡量,一般以 G 为单位,不同的测序目的和基因组类型所需要的测序量有所不同。
微生物基因组测序细菌基因组:
细菌基因组
相对较小,一般在1M-10M之间,测序深度通常在50X-100X左右,数据量在0.05G-1G左右即可满足基本的基因组组装和变异检测需求。
***基因组:***基因组大小差异较大,从几M到上百M都有。对于较小的***基因组,测序深度在30X-50X左右,数据量在0.1G-5G之间;而对于较大的***基因组,可能需要适当降低测序深度至10X-20X,数据量在1G-20G左右。
二代测序—全外显子测序的局限性
不能检测所有的遗传变异:它只能检测外显子区域的变异,对于非外显子区域(如内含子、基因间区域)的变异无法检测,而这些区域的某些变异也可能对基因的表达和功能产生重要影响,如内含子中的突变可能影响基因的剪接。
数据分析复杂:全外显子测序会产生大量的数据,需要复杂的生物信息学工具和方法来进行数据分析。包括数据的质量控制、变异的检测和注释、致病性的评估等多个环节,其中任何一个环节出现问题都可能导致错误的结论。 基因组重测序是二代测序吗?
二代测序技术在不同人群中的准确性有何差异④
***性疾病患者
优势:病原学二代测序可准确检测病原体的基因序**定病原体种类和基因型,为***性疾病的诊断和***提供依据,在检测罕见病原体、病毒***等方面具有独特优势,有助于快速明确诊断,尤其是对于一些传统检测方法难以诊断的***性疾病,如不明原因的发热、肺炎、脑膜炎等。
局限性:对于低丰度病原体,可能出现假阳性或假阴性结果。样本质量、测序深度和数据分析方法等因素也会影响准确性,若样本中病原体含量低或杂质多,可能导致检测失败或结果不准确 单细胞测序也是二代测序。重庆哪里有二代测序流程
二代测序的过程有哪些?湖北二代测序原理
二代测序——蛋白质甲基化
概念及位置:蛋白质甲基化是指在蛋白质的氨基酸残基上添加甲基基团。常见的甲基化修饰位点包括精氨酸(Arg)和赖氨酸(Lys)残基。
作用
1、调节蛋白质 - 蛋白质相互作用:例如,组蛋白(染色体的组成成分)的甲基化可以改变染色质的结构和功能,影响基因的可及性。当组蛋白 H3 的赖氨酸残基(如 H3K4、H3K9 等)发生甲基化时,会招募不同的蛋白质复合物,从而***或抑制基因转录。2、调节酶的活性:某些酶的活性可以通过蛋白质甲基化来调节。甲基化可能改变酶的活性中心的结构或者影响其与底物的结合能力。
检测方法:质谱分析:这是一种***用于检测蛋白质甲基化的方法。它能够精确地确定蛋白质分子的质量,通过比较甲基化和未甲基化蛋白质的质谱图,可以鉴定甲基化位点和修饰程度。 湖北二代测序原理