精子手工计数原理及操作方法
1.原理：将精液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每毫升精液中精子数。2.方法（按照***版第四版《全国临床检验操作规程》）1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式：精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml 通过计算机图像处理功能对显微镜下放大的精子图像进行识别和跟踪计算，从而得出精子动静态各项参数。上海山羊精子分析WOB
七、精子形态检查[正常参考值]畸形精子：＜10%-15%； 凝集精子：＜10%；未成熟精细胞：＜1%。[临床意义]1．精索静脉曲张病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟时已进入精液，或静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧，或血液带有毒性代谢产物从肾或肾上腺静脉逆流至睾丸，上述原因均有损于精子形态。2. 精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能异常。3. 睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时，精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。
八、精液细胞检查[正常参考值]白细胞(WBC)：＜5个/HP(高倍镜视野)；红细胞(RBC)：0-偶见/HP。[临床意义]1．精液中白细胞增多，常见于精囊炎、前列腺炎及结核等。2．精液中红细胞增多，常见于精囊结核、前列腺*等。3. 精液中若查到*细胞，对生殖系*有诊断意义。 CASA精子分析BCF精子分析仪参数，平均路径速率（VAP）：精子头沿其平均路径移动时的时均速率。
精液常规是精液常规检查的简称；是泌尿外科、男科、生殖科简便普及的化验室检查方法之一。也是妇科经常参考使用的重要参数之一。
精液由精子和精浆组成，其中精子占10%，其余为精浆。它除了含有水、果糖、蛋白质和脂肪外，还含有多种酶类和无机盐。精液中含有锌元素。精子精液是由睾丸产生的。精浆由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌产生。精浆里含有果糖和蛋白质，是精子的营养物质。另外，精浆中还含有前列腺素和一些酶类物质。 正常的精液呈乳白色、淡黄色或者无色，每毫升为精液中的精子数一般在6千万至2亿个。有活动能力的精子占总数的60%以上。畸形精子应总数的10%以下。在室温下精子活动力持续3－4小时。精液是碱性，女性生殖器内部则为酸性。因此，精液进入女性内部，就会被中和。
人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。IVOS和CEROS集成了智能化的分析软件，能够自动识别和计算精子的各项参数，减少了人工操作的误差。
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hamiltonthorne的casa系统适用于临床、研究实验室、动物繁殖基地、水产业、制药公司等各种领域，成为了精液分析业的金标准。可以应用于包括人类、公牛、马、、狗、兔子、老鼠、绵羊、山羊、鱼以及各种濒危动物。全自动的ivos可以提供快的分析速度以及高质量数据输出。可以使用一次性的和可重复的载玻片，深度从10um～100um。每次分析捕捉100帧图像，扫描速度每秒60帧。**的软件升级。ivos能提供：、客观、具有重复性的结果高速分析，在60hz下半秒扫描30帧为实验室节省成本。高等级数据安全。（顺应美国fda的操作软件）数据结果包括：计数、浓度。运动以及前进运动三种速度参数vap，vsl和vcl，外加运动参数lin，alh，str和bcf。内置质控保证分析精度可以回放精子活动，标记不同状态精子。迅速根据新的设定对上次分析结果进行重新计算，此过程不会损失画面。形态可选附件：三维严谨形态（人类）：的经过认证的严谨的形态分析。用户自定义形态。即时形态分析荧光可选附件：自定义荧光（只有ivos）可以用滤光片的casa系统。高精度的计数。同时在氙气灯析运动和静止，使用各种荧光染色，自动探测计数染色细胞，自动归类，可选彩色摄像头。 精子分析仪能分析与精子运动功能相关的各种参数。南京密度精子分析DSL
Hamilton Thorne精子分析仪具备快速和高效的分析功能，能够在短时间内处理大量样本，提高工作效率。上海山羊精子分析WOB
CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态，可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常，还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数，以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。
与人工操作相比，自动化系统更具客观性，精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5]，这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比（Z%），和直线速度（VSL）的精子的百分比，与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的，而且没有显示临界值；高于临界值，妊娠率也不会进一步增加[7]。 上海山羊精子分析WOB
测定精子密度和精子总数的方法主要包括显微镜计数和全自动分析。1.显微镜计数：这是传统的测定方法，需要...
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