改良R2A琼脂(R2AAgar)是一种低营养培养基,主要用于对处理过的饮用水进行细菌学平板计数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点:1.**成分**:改良R2A琼脂的主要成分包括胰蛋白胨、酵母粉、酸水解酪素、可溶性淀粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、木酮酸钠和琼脂。这些成分提供氮源、维生素、氨基酸、碳源、矿物质,同时木酮酸钠有利于受损细胞的恢复,可溶性淀粉能够吸附有毒的代谢副产物,有利于受损微生物的恢复。2.**pH值**:改良R2A琼脂的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:改良R2A琼脂特别适用于饮用水、纯化水、注射用水中微生物的分离、培养、计数和鉴定。它能够让受损的和耐氯细菌恢复生长,同时又不会被快速生长微生物所掩盖。4.**制备方法**:称取适量培养基,用蒸馏水重悬溶解,推荐115℃灭菌20分钟;也可121℃灭菌15分钟。5.**质量控制**:接种质控菌株,如铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6623、大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538等,放置30-35℃需氧培养48-120小时,以确保培养基的质量符合标准。在BCPA培养基上,发酵乳糖的细菌菌落通常呈黄色,而非发酵菌落则保持紫色 。25%甘油硝酸盐琼脂基础
支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的微生物培养基,其特点主要包括:1.**成分**:该培养基包含月示胨、蛋白胨、牛肉浸粉、牛心浸粉、氯化钠、葡萄糖、酵母浸粉、苯酚红和L-精氨酸等成分。这些成分为支原体提供氮源、维生素、矿物质,以及碳源和必要的生长因子。其中,L-精氨酸是可水解的氨基酸,苯酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.6-7.8(25℃),以保证支原体的生长环境。3.**培养基配制**:使用时,需要称取培养基基础33克,溶解于1000mL蒸馏水中,经过121℃高压灭菌15分钟后冷却至室温。然后无菌操作加入马血清100mL、青霉素80万单位和1%醋酸铊10mL,混匀后分装无菌试管,放置-20℃保存。4.**应用**:适用于培养支原体的基础培养基,尤其适合于利用精氨酸的支原体,如口腔支原体等。支原体可以利用培养基中的精氨酸,使培养基pH值升高,遇指示剂酚红使培养基变红,从而可以判断支原体的生长情况。5.**灵敏度检查**:通过变色单位试验法(CCU)进行灵敏度检查,以确保培养基能够有效地检测到支原体的存在。支原体培养基基础(含精氨酸)在使用BCPA培养基前,需要进行质量控制,确保培养基的组成、pH值和灭菌条件符合要求,以保证检测的准确性 。
营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。
SSM琼脂是一种强选择性培养基,其成分包括胨、牛肉膏等氮、碳源,以及其他选择性抑制剂和缓冲剂。这种培养基的设计旨在分离致病的沙门氏菌和志贺氏菌。以下是SSM琼脂的一些关键特点和制备方法:1.**成分**:SSM琼脂的基础成分包括牛肉膏、蛋白胨、酵母膏粉等,这些提供碳源、氮源、维生素和矿物质。此外,还含有乳糖、三号胆盐、枸橼酸钠、硫代硫酸钠、枸橼酸铁铵、中性红和煌绿等特殊成分,这些成分有助于抑制其他微生物的生长,同时促进目标菌的生长。2.**pH值**:SSM琼脂的pH值通常控制在6.9-7.1之间,以保证微生物的生长环境。3.**制备方法**:首先,称取培养基粉末,加入到适量的蒸馏水中,加热煮沸并不断搅拌直至完全溶解。然后,冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中备用。通常不需要高压灭菌,因为培养基中的某些成分可能在高压灭菌过程中失去活性。4.**应用**:SSM琼脂主要用于沙门氏菌的分离培养,也适用于志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌等肠道致病菌的分离培养。在这种培养基上,多数沙门氏菌不发酵乳糖,并产硫化氢,菌落表现为无色透明并有黑色中心。SIM培养基主要用于肠道菌科细菌,如沙门氏菌和志贺氏菌等的鉴定。
Todd-Hewitt肉汤(THB)是一种专为培养链球菌属细菌设计的培养基,尤其适合于肺炎链球菌和B群链球菌的培养。以下是Todd-Hewitt肉汤的一些关键特点:1.**成分**:Todd-Hewitt肉汤的主要成分包括牛肉浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、碳酸氢钠和磷酸氢二钠。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素和生长因子,同时维持细胞渗透压和培养基的pH值。2.**pH缓冲**:培养基通过碳酸氢钠和磷酸氢二钠进行缓冲,以中和葡萄糖发酵过程中产生的酸性物质,保持适宜的pH环境。3.**应用**:它常用于血清学分型前的链球菌培养,以及制备抗原性链球菌溶血素。此外,它也适用于β-溶血素的制备,特别是用于金黄色葡萄球菌的培养。4.**制备方法**:通常将Todd-Hewitt肉汤的干粉与蒸馏水混合,加热煮沸至完全溶解,调整pH至7.8±0.2,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在使用Todd-Hewitt肉汤时,会进行质量控制以确保培养基支持目标微生物的生长。例如,对于肺炎链球菌和B群链球菌,培养后应观察到良好的生长表现。6.**储存条件**:未开封的Todd-Hewitt肉汤干粉通常在常温下保存,保质期为三年。
硝酸盐肉汤用于蜡样芽孢杆菌硝酸盐还原试验,也适用于其他细菌的硝酸盐还原能力测试,如肠杆菌科。25%甘油硝酸盐琼脂基础
KF链球菌琼脂培养基(KF培养基基础)是一种专门用于粪链球菌选择性分离培养及计数的培养基。它的特点包括:1.**成分**:KF培养基包含䏡蛋白胨、酵母浸粉、甘油磷酸钠、氯化钠、麦芽糖、乳糖、叠氮钠、琼脂和溴甲酚紫等成分,以及TTC(氯化三苯基四氮唑)作为指示剂。这些成分为粪链球菌提供了适宜的生长环境。2.**选择性**:叠氮化钠(叠氮钠)的存在可以抑制革兰氏阴性菌的生长,使得KF培养基具有选择性,有利于粪链球菌的分离。3.**指示性**:TTC作为指示剂,当粪链球菌生长并代谢时,能够将TTC还原成一种酸性的偶氮染料,使菌落呈现深红色,从而便于识别。4.**使用方法**:将KF培养基的粉末溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至50℃左右,然后倾入无菌平皿中使用。5.**质量控制**:KF培养基在质控实验中表现出对粪链球菌的良好生长支持,并对大肠埃希氏菌等非目标菌株表现出抑制效果。6.**应用**:KF培养基广泛应用于食品、饮料、水质检测等领域,用于肠球菌和链球菌的分离和计数。7.**储存条件**:通常建议在2-8℃的条件下储存,以保持其稳定性和有效性。这种培养基的设计使其成为实验室中分离和鉴定粪链球菌的重要工具。25%甘油硝酸盐琼脂基础