营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。LIM培养基主要用于肠道菌科细菌,如沙门氏菌和志贺氏菌的鉴定 。APT肉汤
SlantzandBartley培养基是一种专门用于检测和计数肠球菌的选择性培养基。以下是其主要特点:1.**成分**:该培养基包含胰蛋白胨、酵母膏粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、叠氮钠和TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)等成分。这些成分共同为细菌提供碳源、氮源、能源和生长所需的其他营养物质,同时提供选择性和指示性。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:叠氮钠作为选择性抑菌剂,可以抑制革兰氏阴性细菌和一些革兰氏阳性菌的生长,从而提高对肠球菌的选择性。4.**指示性**:TTC作为指示剂,当肠球菌生长并代谢时,能够将TTC还原成红色的TTF(三苯甲月替),使菌落呈现出明显的亮红色,便于识别。5.**应用**:主要用于环境水质、羽绒制品中的肠球菌检测和计数,也可用于食品样本中肠球菌的检测。6.**制备方法**:通常将培养基粉末溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至50-55°C后倾注平板。7.**质量控制**:使用标准菌株进行质量控制,确保培养基的选择性和指示性特点,如粪肠球菌ATCC29212在该培养基上生长良好,呈现红色菌落,而大肠埃希氏菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923则被抑制。
GC肉汤基础是一种专门用于分离和培养苛养菌,特别是淋球菌和嗜血杆菌等的微生物培养基。其特点主要包括:1.**营养成分**:GC肉汤基础含有胰酪蛋白胨、蛋白胨、玉米淀粉、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和氯化钠等成分,为微生物提供必需的营养。这些成分有助于维持微生物生长所需的能量和合成代谢物质。2.**pH值**:GC肉汤基础的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保证微生物的生长环境。3.**选择性添加剂**:为了提高培养基的选择性,可以添加抗生物质添加剂,如VCN添加剂(V.C.N.Supplement)、VCNT添加剂(V.C.N.T.Supplement)、VCA抑制剂(VCAInhibitor)、VCAT抑制剂(VCATInhibitor)、VancloT添加剂、LincoT添加剂等。4.**营养添加剂**:为了增加培养基的营养性质,可以加入维生素添加剂,如IsoVitaleXEnrichment、SupplementVX或者酵母自溶物添加剂(YeastAutolysateSupplement)。5.**配制方法**:通常需要称取一定量的GC肉汤基础干粉,溶解在蒸馏水中,经过高压灭菌后,冷却至适当温度,再加入过滤除菌的血红蛋白溶液和GC添加剂,混匀后使用。6.**应用**:GC肉汤基础用于致病性奈瑟氏菌的分离,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-N抑菌剂、无菌血红蛋白粉各1支。
Leeming-Notman培养基基础是一种专门用于培养马拉色菌属(Malassezia)等亲脂性菌的微生物培养基。其特点主要包括:1.**成分**:Leeming-Notman培养基基础包含蛋白胨、葡萄糖、酵母膏粉、牛胆盐、甘油、单硬脂酸甘油酯(GMS)、吐温60(Tween60)、全脂牛奶粉和氯霉素等成分。这些成分为马拉色菌提供必需的营养和生长环境。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在5.6±0.2(25℃)。3.**添加剂**:为了促进马拉色菌的生长,每80ml培养基基础需要添加1支S0614(马拉色菌培养基添加剂)和1支S4101(橄榄油1.6ml)。4.**制备方法**:称取本品32.0g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸溶解,分装三角瓶,每80ml加入1支S4101(橄榄油1.6ml),121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右,无菌操作每80ml添加1支S0614,摇匀,备用。5.**特殊说明**:由于含有奶粉等物质,Leeming-Notman培养基基础存在大量不溶物。同时,由于含有吐温,培养基湿润且易结块。6.**应用**:Leeming-Notman培养基基础主要用于马拉色菌的培养,该培养基的改良版本也被用于提高马拉色菌的培养效率,并在实际应用中取得了良好的效果。
营养盐琼脂培养基(NSA)的pH值对微生物生长有影响。pH值是影响微生物生命活动的重要因素之一,因为它可以改变细胞膜的电荷状态,从而影响微生物对营养物质的吸收和代谢过程中酶的活性。不同的微生物对pH值的适应范围不同,大多数细菌适生长pH值为6.5~7.5,而酵母和霉菌则偏好pH值在4~6之间。营养盐琼脂培养基的pH值通常控制在6.0~6.5(25℃),这个pH值范围为许多微生物提供了适宜的生长环境。例如,黑曲霉在pH值为5.5±0.2时生长良好。如果pH值偏离这个范围,可能会抑制某些微生物的生长,而促进其他更适应该pH值的微生物种类的生长。此外,环境中的pH值还可能影响营养物质的离子化程度和可给性,以及某些化合物分子进入细胞的状态,从而促进或抑制微生物的生长。因此,了解和控制pH值对于微生物的分离和鉴定非常重要,尤其是在进行临床样本分析或食品工业中的微生物检测时。通过调整营养盐琼脂培养基的pH值,可以优化特定微生物的生长条件,也可以用于选择性地分离特定的微生物种类。KI培养基中含有葡萄糖和乳糖,以及硫酸亚铁作为指示剂。硫酸亚铁与硫化氢反应,生成黑色的硫化亚铁沉淀。CAB K12琼脂
在VRBA培养基上,大肠杆菌菌落为带有沉淀环的紫红色或红色,而其他非目标菌则可能呈现不同的颜色和形态 。APT肉汤
CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。APT肉汤