Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。去氧胆酸盐琼脂(Desoxycholate Lactose Agar,简称DC)是一种在微生物检测中常用的选择性培养基。麦康凯琼脂培养基(MacC)
GC肉汤基础是一种专门用于分离和培养苛养菌,特别是淋球菌和嗜血杆菌等的微生物培养基。其特点主要包括:1.**营养成分**:GC肉汤基础含有胰酪蛋白胨、蛋白胨、玉米淀粉、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和氯化钠等成分,为微生物提供必需的营养。这些成分有助于维持微生物生长所需的能量和合成代谢物质。2.**pH值**:GC肉汤基础的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保证微生物的生长环境。3.**选择性添加剂**:为了提高培养基的选择性,可以添加抗生物质添加剂,如VCN添加剂(V.C.N.Supplement)、VCNT添加剂(V.C.N.T.Supplement)、VCA抑制剂(VCAInhibitor)、VCAT抑制剂(VCATInhibitor)、VancloT添加剂、LincoT添加剂等。4.**营养添加剂**:为了增加培养基的营养性质,可以加入维生素添加剂,如IsoVitaleXEnrichment、SupplementVX或者酵母自溶物添加剂(YeastAutolysateSupplement)。5.**配制方法**:通常需要称取一定量的GC肉汤基础干粉,溶解在蒸馏水中,经过高压灭菌后,冷却至适当温度,再加入过滤除菌的血红蛋白溶液和GC添加剂,混匀后使用。6.**应用**:GC肉汤基础用于致病性奈瑟氏菌的分离,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-N抑菌剂、无菌血红蛋白粉各1支。布氏菌疫苗液体培养基在 TSI 培养基中,细菌产酸产气及产生硫化氢的反应能直观呈现,为细菌鉴定提供重要依据。
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(TryptoneSoyAgar,TSA)是一种常用的微生物培养基,其特点和制备方法如下:1.**成分**:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠(NaCl)和琼脂。其中,牛肉膏提供碳源和能源,蛋白胨主要提供氮源,NaCl提供无机盐,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常控制在7.4-7.6之间,以保证细菌的生长环境。3.**制备方法**:-称量:准确称取牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、NaCl5.0g。-溶化:在烧杯中加入少于所需的水量,用玻璃棒搅匀,然后加热使其溶解。待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。-调pH:在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值。如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。反之,则用1mol/LHCl进行调节。-分装:按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。TSI 培养基可同时检测细菌对三种糖(葡萄糖、乳糖、蔗糖)的发酵利用情况,鉴别能力强。
改良R2A琼脂(R2AAgar)是一种低营养培养基,主要用于对处理过的饮用水进行细菌学平板计数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点:1.**成分**:改良R2A琼脂的主要成分包括胰蛋白胨、酵母粉、酸水解酪素、可溶性淀粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、木酮酸钠和琼脂。这些成分提供氮源、维生素、氨基酸、碳源、矿物质,同时木酮酸钠有利于受损细胞的恢复,可溶性淀粉能够吸附有毒的代谢副产物,有利于受损微生物的恢复。2.**pH值**:改良R2A琼脂的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:改良R2A琼脂特别适用于饮用水、纯化水、注射用水中微生物的分离、培养、计数和鉴定。它能够让受损的和耐氯细菌恢复生长,同时又不会被快速生长微生物所掩盖。4.**制备方法**:称取适量培养基,用蒸馏水重悬溶解,推荐115℃灭菌20分钟;也可121℃灭菌15分钟。5.**质量控制**:接种质控菌株,如铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6623、大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538等,放置30-35℃需氧培养48-120小时,以确保培养基的质量符合标准。TSI 培养基可根据细菌的不同反应,有效筛查出具有特殊生化特性的肠道杆菌。CIN1培养基基础添加剂
KI培养基中含有葡萄糖和乳糖,以及硫酸亚铁作为指示剂。硫酸亚铁与硫化氢反应,生成黑色的硫化亚铁沉淀。麦康凯琼脂培养基(MacC)
胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)是一种通用的营养培养基,广泛应用于各种微生物的培养。以下是TSB的一些关键特点和应用:1.**成分**:TSB的主要成分包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾和葡萄糖。这些成分提供微生物所需的氮源、维生素、生长因子、碳源、缓冲剂和渗透压维持剂。2.**pH值**:TSB的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃)。3.**制备方法**:称取TSB培养基30.0g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,分装于试管或其他容器中,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**应用**:TSB培养基用于药品及生物制品的无菌测试及药品微生物限度检查中供试品的稀释或增菌。它特别适合于无菌工艺环境中源自人体的细菌、芽孢和菌的培养。5.**质量控制**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉等,放置30-35℃需氧培养18-24小时,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TSB培养基应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;未开封产品保质期三年。麦康凯琼脂培养基(MacC)