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在卵母细胞冷冻保存过程中，纺锤体的形态变化是评估冷冻效果的重要指标之一。传统的纺锤体观察方法往往需要将卵母细胞固定并进行免疫荧光染色，这不仅破坏了细胞的活性，还限制了进一步观察其发育潜能的机会。而偏光成像技术则能够在不解冻、不染色的情况下，直接观察纺锤体的形态变化。通过Polscope系统，研究者可以实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化，评估冷冻保护剂对纺锤体的保护效果，以及解冻后纺锤体的恢复情况。冷冻后的卵母细胞纺锤体及染色体异常率增高，这将直接影响解冻后卵母细胞的减数分裂进程和胚胎的染色体正常性。利用偏光成像技术，研究者可以准确评估冷冻前后纺锤体的异常率，包括纺锤体的形态、位置、稳定性等参数。通过对比分析，可以明确冷冻过程对纺锤体的具体影响，为优化冷冻保存条件提供科学依据。纺锤体形成的精确性对于维持生物体遗传稳定性至关重要。上海非侵入式成像纺锤体Oosight Meta

纺锤体是如何形成的(1)

纺锤体是动植物细胞分裂期形成的与染色体正常分离直接相关的分裂器，纺锤体的装配在有丝分裂的前期完成。动物细胞纺锤体由星体微管、极间微管、动粒微管及其结合蛋白构成，因含有星体微管故称有星纺锤体。无中心体的动物细胞和植物细胞也能形成纺锤体，因不含有星体微管而称之为无星纺锤体。微管是由α、β微管蛋白异源二聚体及少量微管结合蛋白聚合而成的亚稳定动态结构。动物细胞的中心体由一对相互垂直的圆筒状中心粒及中心体基质构成。它是纺锤体微管向外生长的**，又称微管组织中心。在有丝分裂前间期的S期初期，中心体开始复制倍增，在G2期结束时完成。在细胞分裂期前期，间期复制倍增的两个中心体分离，每一个中心体形成放射状排列的微管，称为星体，每个中心体是它自身星体的**。在有丝分裂细胞周期的分裂期，微管通过持续增加和丢失组成微管的微管蛋白亚基来实现微管的聚合和解聚，微管始终处于生长和缩短的更替中。在分裂前期，纺锤体微管由游离的微管蛋白组装而成，介导染色体的运动；分裂末期，纺锤体微管解聚，又组装形成细胞质微管网络。纺锤体微管包括动粒微管、极间微管和星体微管. 美国成熟卵母细胞纺锤体改善分级纺锤体在细胞分裂完成后迅速解体，为细胞质分裂提供空间。

胞质膜

      在动物细胞的细胞分裂结束时，母细胞在一个被称为“胞质分裂”的过程中分裂成两个子细胞和分区隔离的染色体。有丝分裂纺锤体控制胞质膜上的“胞质分裂”事件，但连接这两个宏观结构的机制一直不清楚。Mark Petronczki及其同事提供了一个结构和功能分析结果，他们发现**纺锤体蛋白（纺锤体中间区域和中间体中的一个蛋白复合物）是有丝分裂纺锤体与胞质膜间所缺失的联系环节，这个联系环节确保“胞质分裂”过程的***结果。本文作者还发现，**纺锤体蛋白的MgcRac***亚单元中的一个区域为一个“系绳”，它连接到胞质膜中的磷酸肌醇脂质上。 [4]

随着科学技术的不断进步和研究的深入，成熟卵母细胞纺锤体冷冻保存技术有望迎来更加广阔的发展前景。一方面，研究者们将继续优化冷冻保护剂的配方和浓度，降低其对细胞的毒性；另一方面，通过改进冷冻速率和程序，减少冷冻过程中对细胞的机械损伤。此外，随着基因检测和遗传病筛查技术的发展，未来有望实现对冷冻卵母细胞的遗传病筛查，进一步保障后代健康。同时，随着法律伦理环境的逐步改善和公众对卵母细胞冷冻保存技术的认知度提高，该技术有望在更多国家和地区得到普及和应用。这将为更多女性提供生育能力保存的机会，同时也为生殖医学领域的发展注入新的活力。纺锤体微管网络的形成和维持需要消耗大量能量。

秋水仙素会使动物细胞染色体加倍吗微管蛋白按照来源可分为植物微管蛋白和动物脑蛋白。因植物微管蛋白难以制备，秋水仙碱与动物脑微管蛋白结合反应研究得要更多一些。秋水仙碱是从植物秋水仙中提纯出的一种生物碱，又名秋水仙素，构成微管的α、β微管蛋白异源二聚体是秋水仙素分子的结合靶点。当秋水仙碱与正在进行有丝分裂的细胞接触时，秋水仙碱结合到微管蛋白的特定位点，导致α微管蛋白与β微管蛋白二聚体结构变形，从而阻断微管蛋白组装成微管，但并不影响微管蛋白的解聚，所以纺锤体会迅速消失。

秋水仙碱的浓度和作用时间对动、植物细胞染色体加倍的影响是关键。有研究结果表明，在花粉母细胞减数分裂细线期与粗线期进行美洲黑杨2n花粉的诱导效果比较好，总体上在减数分裂粗线期进行诱导得到的2n花粉**多，并且诱导的比较好浓度为0.5%。刘爱生等在利用人类外周血淋巴细胞进行染色体G显带制作中，在阻断培养的4h内任意时间加入相应剂量的秋水仙素，能获得用于G显带的形态完好、大小适中、分散均匀、轮廓清楚的中期染色体标本相。陈长超等利用秋水仙碱处理MⅠ期卵母细胞，结果发现Ml期纺锤体发生解聚，染色体周围纺锤体微管全部消失或部分残留，染色体排列异常。 纺锤体微管网络的动态变化揭示了细胞分裂过程中分子层面的奥秘。武汉核移植纺锤体起偏器

纺锤体在细胞分裂过程中与细胞骨架协同工作。上海非侵入式成像纺锤体Oosight Meta

纺锤体观测仪在补救ICSI中的应用

我们知道，成熟的卵母细胞排出***极体。IVF加入精子后，精子会穿透层层障碍**终进入卵子，随着时间的推移，卵子的纺锤体会将染色单体拉向两极，进而排出第二极体，再往后大约加精后9-16小时，雌雄原核会出现，而原核的出现才是受精的标志。但是对于那些没有受精的卵子，到了原核出现的时间窗，发现没有受精时再去补救ICSI，往往错过了卵子的比较好受精时间，因为没有受精的卵子会在体外老化，即使受精，胚胎的发育潜能也很低。所以，我们在加精后的4-6小时，通过观察第二极体的排出来初步判断是否受精，**的增加了那些受精障碍患者的受精率，也避免了卵子的老化。

当然，偶尔也会出现错误补救。文献报道对IVF受精后的未排出第二极体的卵母细胞进行ICSI补救，实验组用纺锤体观测仪观察并统计纺锤体的数目，82.7%含有一个纺锤体，17.3%含有两个纺锤体，并对含有一个纺锤体的卵母细胞进行补救ICSI；而对照组并未用纺锤体观测仪观察纺锤体，只对未排出第二极体的卵母细胞进行补救ICSI。结果发现，使用纺锤体观测仪观察纺锤体的数目能显著提高正常受精率，降低多原核受精比率。 上海非侵入式成像纺锤体Oosight Meta

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