营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。MIO培养基用于细菌的生化特性鉴定,如沙门氏菌、大肠杆菌等,这些细菌在MIO培养基上会表现特定的生化反应。尿酸琼脂
DG18琼脂基础(Dichloran-GlycerolAgarBase)是一种用于培养嗜渗酵母,特别是蜂蜜中嗜渗酵母的选择性分离培养的培养基。其特点如下:1.**配方成分**:包括酪蛋白胨、无水葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯硝胺、氯霉素和琼脂等。每升培养基中,酪蛋白胨5.0g,无水葡萄糖10.0g,磷酸二氢钾1.0g,硫酸镁0.5g,氯硝胺0.002g,氯霉素0.1g,琼脂15.0g,pH值为5.6±0.2(25℃)。2.**检验原理**:酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;磷酸二氢钾作为缓冲剂;硫酸镁提供必需的微量元素;葡萄糖提供碳源;氯霉素抑制细菌生长;琼脂作为凝固剂;氯硝胺抑制霉菌菌落蔓延生长;甘油维持较低的渗透压。3.**使用方法**:称取31.6gDG18琼脂基础,加入1升蒸馏水或去离子水,加热搅拌煮沸至完全溶解。加入200g甘油,混匀后,121℃高压灭菌15分钟。4.**质量控制**:酿酒酵母ATCC9763和黑曲霉ATCC16404的生长率(PR)应≥0.7,表现为奶油色菌落和白色菌丝、黑色孢子。枯草芽胞杆菌ATCC6633和大肠埃希氏菌ATCC25922的抑菌性应≤1。5.**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;未开封产品保质期为三年。柠檬酸铁溶液去氧胆酸钠的存在使得DC培养基对革兰氏阳性菌具有抑制作用,而对大肠菌群等革兰氏阴性菌则相对促进其生长。
木醋杆菌(Acetobacterxylinum)是一种能够产生细菌纤维素(bacterialcellulose,BC)的微生物,其固体培养基的特点主要包括以下几个方面:1.**碳源**:木醋杆菌的培养基通常需要含有适量的碳源,如葡萄糖、蔗糖等,以提供细菌生长和合成细菌纤维素所需的能量和碳骨架。例如,有研究表明,3%的蔗糖是木醋杆菌HN001的比较好碳源之一。2.**氮源**:氮源对于木醋杆菌的生长和代谢活动至关重要。常用的氮源包括蛋白胨、酵母膏、硫酸铵、氯化铵、乙酸铵或柠檬酸铵等。研究表明,0.1%的乙酸铵或柠檬酸铵是木醋杆菌合成细菌纤维素的比较好氮源。3.**无机盐**:包括磷酸盐和镁盐等,这些无机盐对于细菌的生长和纤维素的合成都有重要作用。例如,0.1%的Na2HPO4和0.025%的MgSO4是木醋杆菌培养基中的重要成分。4.**有机酸**:有机酸如柠檬酸和乙酸等,不仅作为碳源,还能调节培养基的pH值,对木醋杆菌的生长和纤维素的合成有促进作用。研究表明,0.1%的乙酸能够促进木醋杆菌产生纤维素。5.**pH值**:木醋杆菌的生长和纤维素的合成对pH值有一定的要求,通常在pH5.0至6.8之间。有研究表明,pH5.0是木醋杆菌HN001的比较好生长条件之一。
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。TSI 培养基通过细菌在其中的生化反应表现,助力准确区分肠杆菌科的各菌属。
支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的微生物培养基,其特点主要包括:1.**成分**:该培养基包含月示胨、蛋白胨、牛肉浸粉、牛心浸粉、氯化钠、葡萄糖、酵母浸粉、苯酚红和L-精氨酸等成分。这些成分为支原体提供氮源、维生素、矿物质,以及碳源和必要的生长因子。其中,L-精氨酸是可水解的氨基酸,苯酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.6-7.8(25℃),以保证支原体的生长环境。3.**培养基配制**:使用时,需要称取培养基基础33克,溶解于1000mL蒸馏水中,经过121℃高压灭菌15分钟后冷却至室温。然后无菌操作加入马血清100mL、青霉素80万单位和1%醋酸铊10mL,混匀后分装无菌试管,放置-20℃保存。4.**应用**:适用于培养支原体的基础培养基,尤其适合于利用精氨酸的支原体,如口腔支原体等。支原体可以利用培养基中的精氨酸,使培养基pH值升高,遇指示剂酚红使培养基变红,从而可以判断支原体的生长情况。5.**灵敏度检查**:通过变色单位试验法(CCU)进行灵敏度检查,以确保培养基能够有效地检测到支原体的存在。在使用BCPA培养基前,需要进行质量控制,确保培养基的组成、pH值和灭菌条件符合要求,以保证检测的准确性 。XLT4琼脂基础
TSI 培养基成分明确,有助于准确分析细菌的生化反应,是一种可靠的细菌鉴别培养基。尿酸琼脂
CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。尿酸琼脂