曙红亚甲蓝琼脂培养基(EosinMethyleneBlueAgar,简称EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的特点和相关信息:1.**成分**:EMB培养基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲蓝、曙红钠和琼脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,能够在酸性条件下结合形成黑色沉淀;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培养基是一种弱选择性培养基,特别用于分离肠道致病菌,如大肠杆菌。它通过抑制非目标菌的生长,促进目标菌的生长,从而实现分离。4.**实验原理**:曙红钠为酸性染料,亚甲基蓝为碱性染料。细菌分解乳糖产酸时,细菌带正电荷,可以与带负电的酸性染料结合,即染上了曙红钠的颜色;如果细菌因产碱性物质较多,带负电荷时与带正电荷的碱性染料亚甲基蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时,染料可析出结晶形成金属光泽。接种: 使用无菌的技术在琼脂培养基表面接种待测样品,可以是从食品、水样或其他来源收集的微生物样品。DNA酶试验琼脂培养皿
Vogel-Johnson(V-J)琼脂基础是一种用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)选择性分离培养的培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:V-J琼脂基础包含明胶蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚红、磷酸氢二钾、氯化锂、甘氨酸和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素以及凝固剂。2.**选择性**:甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长。3.**鉴别特性**:金黄色葡萄球菌能够还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。4.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),适合金黄色葡萄球菌的生长。5.**使用方法**:称取V-J琼脂基础粉末,溶解于蒸馏水中,煮沸后高压灭菌。冷却至45-50℃时加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀后倾注平板。6.**培养条件**:接种后的培养基通常在30-35℃下需氧培养24-48小时。7.**结果观察**:金黄色葡萄球菌在V-J琼脂上通常形成黑色菌落,周围培养基变黄;而大肠埃希氏菌等非目标细菌则被抑制。8.**储存条件**:V-J琼脂基础应在避光、阴凉干燥处储存,使用后立即旋紧瓶盖,以保持其有效性。营养盐琼脂平板去氧胆酸盐琼脂含有去氧胆酸盐,可以选择性地抑制一些肠道细菌的生长,从而使一些其他的细菌能容易地生长。
0.1%蛋白胨水培养基是一种用于微生物培养的溶液,具有以下特点:1.**低浓度蛋白胨**:培养基中蛋白胨的浓度为0.1%,为微生物提供氮源。2.**pH值稳定**:pH值控制在7.1±0.2,为微生物生长提供适宜的酸碱环境。3.**用途广**:主要用于样品的稀释和冲洗,也适用于微生物的增菌培养。4.**简单配方**:主要成分为蛋白胨和蒸馏水,配方简单,易于配制。5.**质量控制**:具有明确的感官、理化指标和生物学指标,确保培养基的稳定性和适用性。6.**微生物灵敏度试验**:可用于接种质控菌株,进行需氧培养,观察生长情况。7.**储存条件**:应在2~25℃,避光保存,保证培养基的有效期和活性。8.**使用方法**:从储藏室取出后恢复至室温,用75%酒精消毒瓶盖,按规定方法进行加样,之后置于培养箱中按规定温度和时间培养。9.**灭菌处理**:使用前需经过121℃高压灭菌15分钟,确保培养基的无菌状态。这些特点使得0.1%蛋白胨水培养基成为微生物实验室中常用的培养基之一,特别适合用于微生物的初步培养和计数。
胆盐乳糖培养基(BL)是一种专门用于增菌培养的微生物培养基,它具有以下特点:1.**用途**:主要用于药品和生物制品中大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的增菌培养。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,氯化钠维持渗透压,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾作为缓冲剂,牛胆盐和去氧胆酸钠作为选择性抑菌剂。3.**pH值**:通常调节至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先将培养基粉末加入蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品处理后加入培养基中,放入恒温培养箱内培养18至24小时,必要时可延长至48小时,观察结果。5.**应用**:胆盐乳糖培养基也用于乳品中大肠菌群的快速检测研究,通过构建检测片法和细胞培养瓶剂法,可以快速检测乳品中的大肠菌群。6.**选择性**:胆盐的存在使得培养基能够选择性地促进革兰氏阴性菌的生长,抑制革兰氏阳性菌的生长,这使得BL培养基在分离和鉴定肠道细菌中非常有用。7.**检测乳糖发酵能力**:由于含有乳糖,该培养基能够用于检测细菌的乳糖发酵能力,革兰氏阴性细菌如大肠杆菌等通常能够将乳糖发酵产生酸或气体。在临床实验室中,BHI Agar常用于从患者样本(如血液、尿液、脑脊液等)中分离和培养病原微生物。
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基是一种专门用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)活性的培养基,具有以下特点:1.**荧光检测**:MUG作为荧光底物,在β-葡萄糖醛酸苷酶作用下,裂解后产生蓝色荧光终产物,可通过紫外线监测。2.**应用广**:MUG培养基用于荧光检测大鼠体内的β-葡萄糖醛酸苷酶基因表达,也用于植物中葡萄糖醛酸酶基因的表达进行荧光检测。3.**产品特性**:MUG具有纯度≥99%,熔点102°C,分子量为352.29(无水基础),在冷冻(-20℃)条件下储存。4.**培养基配方**:包含蛋白胨、磷酸盐缓冲系统、硫酸锰、亚硫酸钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、氯化钠、氯化钙和MUG等成分,pH值控制在7.3±0.1(25℃)。5.**操作步骤**:包括称取培养基粉末溶解、分装、灭菌、接种质控菌液、培养和观察有无荧光等步骤。6.**试验现象**:接种大肠埃希氏菌等质控菌株,在30-35℃培养后,通过366nm紫外灯下观察有无荧光,再滴加靛基质试剂观察有无玫红色环出现。7.**安全性**:操作MUG时应穿实验服并戴一次性手套,以确保安全。8.**应用示例**:包括细菌培养物的荧光检测和转基因植物GUS基因的表达测定。9.**储存与运输**:MUG培养基应-20℃干燥保存,有效期2年,运输时使用冰袋。改良后的Letheen琼脂培养基不仅限于传统的应用,还可能拓展到食品微生物学、环境微生物学等领域。EMB培养皿
DC培养基的主要成分包括:葡萄糖、琼脂、去氧胆酸盐(Deoxycholate)、柠檬酸盐。DNA酶试验琼脂培养皿
马铃薯葡萄糖琼脂(PotatoDextroseAgar,简称PDA)是一种使用的微生物学培养基,特别适合于菌的培养,尤其是酵母和霉菌。以下是PDA培养基的一些特点:1.**成分**:PDA主要由马铃薯浸出液、葡萄糖和琼脂组成。马铃薯提供了丰富的营养物质,葡萄糖作为碳源,琼脂则作为凝固剂。2.**pH值**:PDA的pH值通常调整至5.6±0.2(25℃),以优化菌的生长条件。3.**用途**:PDA被用于食品和乳制品中酵母和霉菌的平板计数,也适用于从临床样本中培养酵母和霉菌。它对于保存某些皮肤菌的菌种库也非常有用。4.**选择性**:PDA可以通过添加酸或抗生物质(如氯霉素、酒石酸和四环素)作为选择性抑制剂来抑制细菌生长,从而促进菌生长。5.**结果解读**:在PDA上,酵母菌通常形成乳白色至白色的菌落,而霉菌则长成各种颜色的丝状菌落。不同菌在PDA上展现出独特的菌落形态特征,如颜色、质地及结构,这对于初步识别菌种至关重要。6.**局限性**:虽然PDA能有效支持多种酵母和霉菌的生长,但为了获得菌种的完整鉴定,建议对纯培养菌落进行生化、免疫学、分子生物学或质谱分析等进一步的测试。7.**储存条件**:PDA应在干燥、避光的条件下储存,通常在室温下保存,以保持其有效性。DNA酶试验琼脂培养皿