萨氏液体培养基SDY(SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract)在实验室中的灭菌方法应该遵循以下步骤:1.**称量培养基**:首先,根据需要的体积,称量适量的萨氏液体培养基SDY干粉,通常为60克干粉培养基用于制备1升培养基。2.**溶解**:将称量好的干粉加入到蒸馏水或去离子水中,加热并搅拌直至完全溶解。注意,萨氏液体培养基SDY的配方中通常包含蛋白胨10.0g、酵母提取物10.0g、葡萄糖40.0g,pH值控制在6.0±0.2(25℃)。3.**调整pH值**:在使用前,根据需要调整培养基的pH值至7.0,以适应的生长条件。4.**分装**:将溶解并调整好pH值的培养基分装到适合的容器中,准备进行灭菌。5.**灭菌**:有两种推荐的灭菌方法,一种是在121℃下高温灭菌15分钟,另一种是在115℃下灭菌20至30分钟。6.**注意事项**:-灭菌过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。-灭菌后应让培养基冷却至室温,并储存在适当的条件下。-使用时应注意个人防护,穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩,以避免粉尘引起的不适。通过遵循这些步骤,可以确保萨氏液体培养基SDY在实验室中得到正确的灭菌处理,为培养提供适宜的环境。SCA培养皿,即标准培养皿(Standard Culture Dish),是一种实验室常用的培养容器。胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)
MD培养基(MinimalDextroseMedium)是一种常用于毕赤酵母(Pichiapastoris)等微生物的培养基,具有以下特点:1.**配方成分**:-MD培养基的主要成分包括酵母氮源、无氨基酸和硫酸铵、硫酸铵、D-葡萄糖和琼脂糖H,还含有G418硫酸盐用于抗生物质的筛选。-具体成分如YNB(酵母氮源基)、D-生物素、D-葡萄糖、腺嘌呤和L-组氨酸等。YNB的具体成分可以参见相关产品说明。2.**用途**:-MD培养基主要用于毕赤酵母营养缺陷型菌株的转化子筛选,特别是用于筛选his4标记和ade2标记。适用的酵母菌株包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPinkstrain等。-MDA培养基(MinimalDextroseMedium+Adenine)即含有腺嘌呤的基础葡萄糖培养基,用于培养腺嘌呤缺陷型毕赤巴斯德酵母,如PichiaPink菌株。-MDH培养基(MinimalDextroseMedium+Histidine)即含组氨酸的基础葡萄糖培养基,用于培养组氨酸缺陷型毕赤巴斯德酵母。3.**使用方法**:-如用于配置液体培养基,每包含约16.7g,加入500mL水中,磁力搅拌溶解后,过滤除菌即可。-如用于配置固体培养基,每包含约16.7g,加入250mL水中,磁力搅拌溶解后,过滤除菌70℃备用;配置250mL的4%的琼脂粉,高压灭菌70℃水浴备用;按照1:1混合后倒平板即可。匹马霉素溶液SDA中添加的物质(如氯霉素或庆大霉素)可以抑制细菌的生长,从而使得菌种在培养过程中成为优势菌群。
哥伦比亚琼脂培养基(ColumbiaAgar)是一种常用的微生物学培养基,具有以下特点:1.**用途**:-主要用于梭菌的分离培养,特别是用于药品中梭菌的检测。2.**成分组成**:-培养基的主要成分包括酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、玉米淀粉、氯化钠和琼脂。这些成分提供碳氮源、维生素和生长因子,维持均衡的渗透压,并作为凝固剂。3.**添加剂**:-每瓶需配套添加硫酸庆大霉素,以抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。4.**pH值**:-培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃)。5.**配制方法**:-称取44g培养基粉末,加热溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃,加入硫酸庆大霉素20mg,混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**培养条件**:-将培养基放置于30℃-35℃恒温培养箱中,进行厌氧培养48-72小时。7.**质控结果**:-接种质控菌株如生孢梭菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,观察其生长情况和特征。生孢梭菌在该培养基上生长良好,形成无色菌落,而大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌则被抑制。8.**注意事项**:-培养基中含少量淀粉,若灭菌前未加热煮沸溶解,灭菌后冷却可能出现少量白色沉淀。
CATC琼脂是一种用于食品和饮料中肠球菌分离培养的微生物培养基,其特点如下:1.**成分**:CATC琼脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氢钾、柠檬酸钠、吐温80、碳酸钠、叠氮钠、红四氮唑(TTC)和琼脂等成分,为肠球菌提供所需的营养和生长环境。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.0±0.2(25℃),以保证肠球菌的适宜生长条件。3.**选择性**:叠氮钠作为抑制剂,有助于抑制革兰氏阴性菌和其他非目标菌的生长,使得肠球菌更容易被分离和培养。4.**指示性**:TTC作为指示剂,当肠球菌生长并代谢时,能够将TTC还原成一种酸性的偶氮染料,使菌落呈现深红色,便于识别。5.**制备方法**:通常将CATC琼脂的干粉加入蒸馏水或纯化水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后冷却至50℃左右,每100mL培养基加入1%无菌TTC溶液,混匀后倾注无菌平皿备用。6.**应用**:CATC琼脂主要用于食品和饮料中肠球菌的分离培养,也适用于生活饮用水中肠球菌的计数。7.**储存条件**:建议在避光、干燥处储存,以保持培养基的稳定性和有效性,通常保质期为三年。含糖牛肉汤琼脂培养皿主要成分包括牛肉浸粉、氯化钠、胨、乳糖等,为细菌提供所需的碳源、氮源和维生素。
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。由于含有不溶性活性炭,BCYE琼脂培养基整体呈现黑色,这有助于在培养过程中观察到的特征性变化 。0.1%蛋白胨水培养基
SIM培养基中的硫酸铁铵在细菌产生的硫化氢作用下生成黑色的硫化铁沉淀。胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)
轻唾琼脂培养基(MSA)基础,也称为轻型唾液链球菌琼脂基础,是一种用于分离培养轻型链球菌(绿色链球菌)、唾液链球菌(非溶血性链球菌)和肠球菌的选择性培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:MSA基础的主要成分包括胰酪蛋白胨、示蛋白胨、磷酸氢二钾、葡萄糖、蔗糖、台盼蓝、结晶紫和琼脂粉。这些成分为细菌提供碳源、氮源和必需的生长营养。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),以保证细菌的适宜生长环境。3.**选择性**:结晶紫和亚碲酸钾作为抑制剂,有助于抑制大多数革兰氏阴性杆菌和大多数革兰氏阳性细菌的生长,而对链球菌生长影响较小。4.**指示性**:台盼蓝是一种酸性偶氮染料,给予菌落蓝色外观,有助于菌落的观察和识别。5.**应用**:MSA基础培养基主要用于轻型链球菌和唾液链球菌的分离培养,也适用于从临床样本中分离这些菌种。6.**制备方法**:称取适量的培养基粉末,用蒸馏水或去离子水重悬并加热煮沸至完全溶解,高压灭菌后冷却至50-55°C,加入无菌的亚碲酸钾溶液,混匀后倒入无菌培养皿中。7.**储存条件**:MSA基础培养基通常在室温下保存,有效期为3年。胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)