支原体肉汤培养基是一种专门用于支原体的分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-支原体肉汤培养基的主要成分包括猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。具体配方为每升含有猪胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化钠2.5g,葡萄糖5.0g,酚红0.02g,pH值调至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原体的分离培养,特别是肺炎支原体。支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现,要求使用支原体肉汤培养基培养监测肺炎支原体。3.**培养条件**:-支原体肉汤培养基需要在36℃培养7-14天,观察培养基变色结果。肺炎支原体可以发酵培养基中的葡萄糖,使培养基的pH值降低,遇指示剂酚红使培养基变黄。4.**添加剂**:-每瓶支原体肉汤培养基需配套青霉素溶液(80万IU),每1000ml支原体肉汤培养基溶液中添加1支青霉素溶液(80万IU),以抑制细菌的生长。5.**培养基灵敏度**:-支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基的灵敏度均达到10^9CCU·mL^-1。支原体肉汤基础和精氨酸支原体肉汤基础存放于2~8℃有效期为90天。TBA培养皿的使用方法通常有将待测样本接种到培养皿中,然后在适宜的温度下培养一定时间,观察菌落的生长。气单胞菌培养基基础(Ryan)
硫酸盐还原菌培养基E是一种专门用于培养硫酸盐还原菌(SRB)的培养基,其配方和使用说明如下:1.**配方**:-成分(g/L):磷酸氢二钾0.5g、氯化铵1.0g、硫酸钠0.5g、氯化钙0.1g、硫酸镁2.0g、乳酸钠3.5g、酵母汁1.0g、硫酸亚铁铵0.3g、维生素C0.1g,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。2.**配制方法**:-按照上述配方准确称量各种成分,加入蒸馏水溶解,调节pH值至7.2±0.2,然后进行灭菌处理。3.**灭菌处理**:-配制好的培养基通常在121℃高压下灭菌15分钟以确保无菌。4.**培养条件**:-硫酸盐还原菌的培养条件需要在无氧环境下进行,因为这些细菌通常是厌氧的。培养温度和pH值需要根据具体菌株的偏好进行调整。5.**使用说明**:-培养基融化后应立即移开,室温静置片刻,以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到适宜温度后尽快使用,放置时间一般不超过4小时。剩余的培养基凝固后不得再次融化使用。6.**注意事项**:-在使用和进一步加热前,应将培养基放置到室温。经过高压灭菌的培养基应尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基YEB培养基特别适用于农杆菌的培养和表达,使用此培养基制备农杆菌感受态细胞,转化效率高。
4.**培养条件**:-培养基的制备方法包括称取基础培养基14.2g加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂,混匀,倾入无菌平皿。5.**质量控制**:-质控菌株在37℃培养24-48小时,单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在该培养基上生长良好,形成蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。其他菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌则不生长或生长不良。6.**储存条件**:-制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃。7.**注意事项**:-严格按照标签说明进行配制培养基,避免混合时培养基和添加剂温度过高导致平板出现絮状物。干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。这些特点使得李斯特氏菌显色培养基在食品卫生微生物检验中具有重要的应用价值。
在配制改良高氏二号培养基时,如果遇到成分沉淀问题,可以采取以下措施进行处理:1.**充分溶解**:确保所有成分在加入之前已经充分溶解。对于不易溶解的成分,如琼脂,需要在加热条件下不断搅拌直至完全溶解。2.**调整溶解顺序**:根据各成分的溶解特性,调整添加顺序。通常先溶解无机盐和维生素,再加入有机物质。3.**使用辅助溶剂**:对于某些难溶成分,可以考虑使用适当的溶剂或助溶剂来帮助溶解。4.**避免混合沉淀**:在混合不同成分时,要注意避免因成分相互作用而产生沉淀。例如,避免将钙盐和磷酸盐直接混合。5.**控制pH值**:pH值的变化可能会影响某些成分的溶解度,因此在调节pH值时要小心,确保在成分完全溶解后再进行。6.**分步灭菌**:如果培养基中某些成分不耐热,可以考虑分步灭菌。即先灭菌大部分成分,冷却后再添加不耐热的成分。7.**过滤**:如果沉淀物已经形成,可以通过过滤来去除。使用适当孔径的滤纸或滤网过滤培养基。8.**搅拌**:在溶解和加热过程中,持续搅拌可以减少沉淀的形成。9.**使用螯合剂**:对于易氧化的成分,如硫酸亚铁,可以使用螯合剂(如EDTA)来防止沉淀和氧化。甘油天门冬素琼脂培养基可以用于培养和鉴定链霉菌属的微生物,为这类微生物提供适宜的生长环境 。
除了Pachlewski固体培养基,适合用于厌氧微生物培养的培养基还包括以下几种:1.**疱肉培养基**:这种培养基本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法,适合梭状芽孢杆菌等厌氧菌的培养。2.**硫基乙酸钠培养基**:通常用于培养厌氧菌,通过加入还原剂来创造无氧环境。3.**牛心脑浸液培养基**:这是一种常用的培养基,可以通过物理或化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势,从而适合厌氧菌的培养。4.**Hungate厌氧管**:这是一种特殊的厌氧培养技术,使用Hungate厌氧管可以为厌氧微生物提供一个无氧的生长环境。培养基的制备需要在厌氧条件下进行,并且要使用厌氧培养箱和厌氧技术进行接种和培养。5.**厌氧袋(Bio-bag)**:这是一种在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌的方法。塑料袋内装有气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管和干燥剂,通过一系列操作在袋内形成无氧环境,然后进行培养。6.**厌氧手套箱(Anaerobicglovebox)**:这是一种大型的密闭金属箱,箱内通过控制气体成分(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,适合进行厌氧菌的大量培养和研究。亚硫酸铋指示剂能够抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群,但不影响沙门氏菌的生长。Wilkins-Chalgren 厌氧菌肉汤
红色球形孢囊菌可能具有独特的孢子形状、颜色和大小,孢囊的形态特征,这些特征有助于其在显微镜下的识别。气单胞菌培养基基础(Ryan)
连四硫酸盐肉汤培养基(TetrathionateBroth,简称TTB)是一种选择性富集培养基,主要用于分离和富集沙门氏菌。以下是其主要特点:1.**成分组成**:-连四硫酸盐肉汤培养基的基础成分包括胰酪蛋白胨、动物组织消化物、胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠等。每升培养基中通常包含胰酪蛋白胨2.5g、动物组织消化物2.5g、胆盐1.0g、碳酸钙10.0g和硫代硫酸钠30.0g。2.**选择性**:-该培养基通过添加去氧胆盐和亮绿染料等抑制剂,抑制革兰氏阳性菌的生长,从而提高对沙门氏菌的选择性。碘-碘酸钾与硫代硫酸钠反应生成四硫磺酸盐,阻遏常规肠道细菌生长。3.**鉴别功能**:-葡萄糖和甘露醇是可发酵的糖类物质,辅助肠道致病菌尤其是沙门氏菌的鉴别。连四硫酸盐肉汤培养基含有碘液和煌绿水溶液,这些添加剂有助于抑制共生生物,从而改善沙门氏菌的分离。4.**应用广**:-主要用于伤寒沙门氏菌和其他沙门氏菌的分离、增菌和鉴定。常用于从粪便、污水等样品中分离沙门氏菌。5.**配制方法**:-一般将培养基粉末溶解在蒸馏水或去离子水中,加热煮沸,分装后进行高压灭菌。使用时需现配现用,以保证培养基的稳定性和选择性。气单胞菌培养基基础(Ryan)